微量热法研究Na+,K+-ATPase酶促反应

首次用微量热方法研究了Na^ ,K^ -ATPase催化ATP水解的酶促反应，在310．15K，PH＝7．4的100mmol.L^-1Tris-HCl,100mmol.L^-1NaCl,10mmol.L^-1KCl,3mmol.L^-1MgCl2缓冲溶液环境下，用对比进度法得出了Na^ ,K^ -ATPase酶促反应的米氏常数Km值和最大反应速率Vm值，所得常数值与文献给出的相符，并用比色法得出了一致的Km和Vm值，同时初步研究了酶预稀释对酶促反应的影响。     

小茴香的抑菌作用

以20%的乙醇溶液提取小茴香中的成分,测定了其提取液对常见食品腐败菌的抑菌效力(抑菌圈直径)及最低抑菌浓度(MIC).其结果为苏云金杆菌和变形杆菌最敏感,金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和根霉菌次之,青霉菌和酿酒酵母稍差.     

高温胁迫下不同龙须菜品系抗氧化能力的比较

以龙须菜耐高温新材料07-2、龙须菜良种981及野生型龙须菜3个品系为材料,研究在不同温度条件下(24、28、32℃)其总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化物酶(POD)的活性变化,及抗坏血酸(维生素C)、维生素E、可溶性蛋白和丙二醛(MDA)的含量变化.结果表明:高温胁迫条件下,981和07-2的总抗氧化能力均高于野生型,28℃时981上升幅度比野生型高102.35%,07-2比野生型高18.86%;32℃时981比野生型上升幅度高17.87%,07-2则比野生型高73.52%.高温胁迫条件下,无论是酶促抗氧化系统还是非酶促抗氧化系统981和07-2都不同程度地优于野生型.可见,高温胁迫条件下981和07-2与野生型相比具有更强的清除活性氧的能力,表明抗氧化活性指标与龙须菜耐热性有相关性.     

气阀控微流控芯片中微液滴的研究

为了实现微液滴的可控制备和应用,设计和制作了一种集成有微气阀的双层微流控芯片,在该芯片上产生体积可控的水相微液滴,并对微液滴进行了操控.基于该平台研究了β-半乳糖苷酶(β-Gal)的酶促反应,制备了含有β-Gal及其底物乳糖RGP的微液滴并使之融合,在混合均匀后将其捕获,原位观察融合前后微液滴荧光强度的变化.并在底物溶液中加入酶抑制剂(DTPA),研究了DTPA对于酶活性的抑制作用.     

诺氟沙星-Cu(Ⅱ)-DNA三元络合物的光谱

诺氟沙星(NFA)是一种具有荧光活性并通过抑制促旋酶成为抗菌谱广的药物.采用紫外-可见分光光度法和固定波长同步荧光光度法(CW-SFS)研究了NFA-Cu2 -DNA三元络合物体系,考查了各成分间的相互作用,并由测量数据计算得到结合常数.     

脂肪酶催化合成聚R-3-羟基丁酸乙酯寡聚物研究

聚R-3-羟基丁酸酯是一类具有重要生理作用的聚合物,其合成方法一直是手性聚合物合成领域的研究热点之一.在充分考察底物构型、溶剂等因素对酶促动力学拆分/聚合反应影响的基础上,结合过渡金属配合物对醇的原位外消旋化作用与酶促聚合反应,建立了一种绿色、高效的酶促动态动力学拆分/聚合一锅合成聚R-3-羟基丁酸酯的方法.通过该方法制备所得聚合物的分子量可以达到2.0×10³ Da.通过改变聚合单体的光学纯度还可实现对聚合物分子量的调控,在不同光学纯度聚合单体的聚合反应中,聚合物的分子量可以较为均匀地分布在0.3×10³~1.3×10³ Da内.该方法具有高效、无毒等优点,对进一步研究手性聚酯的应用具有重要的理论和现实意义.     

动态光谱法研究血红蛋白在反向胶束中的类酶催化作用

以动态光谱分析法研究血红蛋白作为过氧化物酶的催化作用和在胶束及反向胶束中的反应机理.通过研究反胶束中酶促反应活性中间体,即对微环境中的酶-底物配合物分子光谱行为进行监测,发现含血红素的生物大分子在催化过程中具有典型的过氧化物酶特征.导出催化过程速率方程,为酶法分析活性氧分子及血红素衍生物提供化学动力学理论依据.     

不同氮源对水稻幼苗根氨同化酶的影响

将氮索含量相同、但来源不同的氮源分别加入到水稻培养液中,分析了不同氮源对水稻幼苗根氨同化酶活性的影响．与无氮培养的水稻根相比,(NH4)zSO4,NH4NO3,KNO3,谷氨酸(Glu)和谷氨酰胺(Gin)都能分别促进水稻根谷氨酰胺合成酶(GS)、依赖于NADH的谷氨酸合酶(NADH-GOGAT)和依赖于NADH的谷氨酸脱氢酶(NADH-GDH)活性．(NH4)2SO．对GS和NADH-GOGAT活性促进最为显著,而Gln对GS和Glu对NADH-GOGAT的活性分别影响最小．Glu对NADH-GDH活性的诱导稍强于其它氮源．这些结果提示,不同氮源对水稻根氨同化酶活性影响的差别也许反映了这些物质对水稻根部氮索代谢的影响以及对这些酶诱导能力的不同．     

微生物酶催化甲胺磷降解机理初探

甲胺磷 (MAP)农药经微生物酶 -甲胺脱氢酶催化后 ,采用聚酰胺薄膜层析、钼酸铵试剂和 HPL C等分法 ,分别可检测出氨基、磷酸根和甲醇等化合物 .将去除氨基的 MAP溶液作小鼠灌胃试验 ,发现该农药的毒性明显降低 .文中还对 MAP在自然界的降解过程等问题进行了讨论 .     

喹诺酮药物的定量结构-活性关系

喹诺酮类抗菌素是一类重要的抗茵药物．本文对32个喹诺酮类分子进行了HF／6—31G＊水平的结构优化,在优化结构上获得了分子的表面静电势分布,并在此基础上对其统计导出的参数进行了计算,同时计算了反映三维信息的3D-Morse参数,其后,运用多元线性回归方法对喹诺酮分子抑制金黄色葡萄球菌DNA促旋酶（QR—gY—rase）活性、人类Ⅱ型拓扑异构酶（TOPO—Ⅱ）的抑制活性、以及二者抑制活性之差与分子的结构参数进行了关联．结果表明：分子静电势参数结合三维3D-Morse参数可以很好地用于喹诺酮类化合物抑制DNA促旋酶、TOP（3-Ⅱ活性与分子结构间的定量关系,并能有效地区分抑制两种酶的活性;同时结合3D-Morse参数的静电势参数被成功应用到定量结构-活性关系研究中．     

气单胞菌几丁质酶的性质与发酵条件

从浙江省土样中分离出一株产几丁质酶的好氧菌,经鉴定该菌属于气单胞菌属(Aeromonas sp.),命名为CJ-5菌株.经研究发现,CJ-5菌产生的几丁质酶是一种诱导、分泌型酶,其产酶的最佳发酵条件为起始pH7.0,温度为30℃,几丁质底物质量浓度为2%～2.5%,培养基装量为三角烧瓶总体积的20%.在3 L发酵罐中进行了扩大培养,发酵液的最高几丁质酶活力为0.41 U·mL-1.该酶的酶促反应最适温度为36℃,最适pH为7.0.在进一步的研究中,还发现CJ-5菌株是一株产双酶的菌株,既产几丁质酶,又产壳聚糖酶.     

长期曝气下梭鱼草(Pontederia cordata L.)的生理响应及水质氮磷变化

测定了2个各水培有13棵/m~2水体而积梭鱼草(Pontederia cordata L.)的净化槽(曝气、非曝气)的植物叶片叶绿素(Chla,Chlb)含量、可溶性蛋白(SP)含最与根组织过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性及对应的净化槽水质,同时测定了植物根、茎、叶的长度与氮磷含量及生物量,研究了长期曝气下梭鱼草(P.cordata)的生理响应及水质的氮磷变化.另设空白槽对照(CK),结果表明:曝气影响了植物的生理特性,曝气槽植物的根、茎、叶长分别比非曝气槽植物短12.67,18.30,2.33 cm,根组织POD、CAT活性分别比非曝气槽根组织高0.028 3 U/(g·min),0.179 0 mg/(g·min),而非曝气槽叶片Chla、Chlb与SP含量分别比曝气槽叶片高0.314 2,0.118 4,15.75 mg/g;曝气影响植物组织的氮磷积累及生物量,曝气槽根、茎、叶组织的氮磷含量分别比非曝气槽根、茎、叶低5.04 g/kg与1.03 g/kg;6.57 g/kg与1.32 g/kg;8.67 g/kg与1.46 g/kg,根、茎、叶的生物最分别比非曝气槽植物低3.03,2.32,0.74 g/棵;曝气影响净化槽水质的氮磷浓度,TN、NH_4~+-N浓度比非曝气槽低11.22,7.81 mg/L,而TP、溶P浓度较非曝气槽高0.089,0.044 mg/L.     

碳源浓度对新疆淡肤根石耳地衣组织培养的影响

地衣(Lichen)是真菌与藻类的共生体,被誉为植物界的"先锋植物",是互惠共生现象中最突出最完善的类群.随着地衣细胞工程学和分子生物学技术的发展,地衣在各领域中的作用逐渐被人们所认识,其中蕴含的巨大经济价值亦日益显露.地衣中富含地衣酸及地衣多糖,在医药,香料,食品,饲料,环境监测等方面都有发展潜能.由于地衣生长缓慢,难以人工培养,因而能否合理利用地衣资源,能否通过人工组织培养进一步提高地衣的经济效益,我们进行了初步探索.本次实验,在己知的地衣型真菌和藻类培养方法基础上,对新疆石耳属地衣(Umbilicaria haffm)中的淡肤根石耳(Umbilicaria Virginis schaer)在地衣型真菌培养基和共球藻有机营养培养基上,通过改变各种培养基中碳源的含量进行了组织培养.碳源可影响地衣酸的生成量,而地衣酸又直接影响地衣的生长.此次实验初步结果表明,不同碳源种类及碳源浓度对淡肤根石耳地衣的组织培养有一定影响,其中本次实验所用麦芽汁--酵母膏培养基(麦芽汁含量30g/L溶液)对新疆淡肤根石耳的地衣型真菌是较理想的培养基,30g/L的麦芽汁是对新疆淡肤根石耳的地衣型真菌的菌丝体的生长是被定为最佳浓度,共球藻培养基(葡萄糖含量20g/L溶液)对共生藻的生长较合适,20g/L葡萄糖是对新疆淡肤根石耳的共生藻的苍生皲髓池生长被定为最佳浓度.     

纤维素酶降解纤维素机理的研究进展

综述了近年来纤维素酶降解纤维素机理的研究,新的理论认为纤维素难以被降解的主要原因可能是忽略了纤维素酶的超分子结构.概述了温度、pH值、酶促反应时间、抑制剂及激活剂等因素对纤维素酶降解纤维素效率影响的研究状况,提出了纤维素酶降解纤维素中存在的问题,并指出了未来研究的方向.     

新疆甜瓜AFLP反应体系的建立

以新疆甜瓜叶片为试验材料,通过对扩增片段长度多态性(AFLP)反应体系中的几个关键参数进行研究,建立了适合新疆甜瓜的AFLP技术体系.结果表明,采用改进CTAB法提取的基因组DNA质量好,符合AFLP反应要求;双酶切必须完全彻底,基因组DNA 300 ng用EcoR I和MseI各3 U,37℃酶切5 h;连接产物稀释10倍用于预扩增;预扩增产物的稀释以75倍为宜.本研究为构建新疆甜瓜的遗传图谱及分子标记辅助育种奠定了基础.     

转基因 红豆草植株的再生

红豆草 子 叶外植体 能被 含非致 瘤性 的 i T 质粒 的根癌 农杆 菌感染.该载体 质 粒含 一个nt P一I基 因和一个胭脂 碱合 成酶基因.对 卡那霉素抗性 植株的胭脂碱检测、N P T一I酶 活性测定和 D N A 分子 杂交 试验表 明,外 源的 n Pt一,基 因和胭脂 碱合成酶基 因已 导入 了红豆 草细胞并能在植株水平表达相应 的性状.     

多聚螯合物酶联抗体交联磁性纳米乳胶的脂联素免疫透射比浊方法研究

采用多聚螯合物酶联抗体交联磁性纳米乳胶的脂联素免疫透射比浊法检测了血清中脂联素. 发现多聚螯合物酶上含有大量HRP酶, 可以极大地放大检测信号; 在优化条件下, 免疫比浊信号强度在脂联素0.005~0.2ng?mL-1范围内变化时, 并随着ADPN浓度的增加呈线性关系(R2=0.998), 检出限为2 pg?mL-1. 该方法能成功用于血清样本中脂联素的检测.     

阿魏酸、根皮素及Trolox复方微乳制备及性质

通过绘制拟三元相图优化吐温80/乙醇/丁酸乙酯/水微乳液体系的配方,用于制备阿魏酸、根皮素及Trolox 3种复方抗氧化剂微乳液。考察了体系的温度、盐度和酸度对微乳的影响,研究了微乳对复方抗氧化剂的稳定性、增溶性及体外释药等性质。结果表明:随着温度升高和pH值降低体系微乳区稍有减小,盐度对微乳区基本无影响;该微乳对3种复方抗氧化剂有增溶、保护作用。该研究为复方微乳应用于食品、医药、化妆品等体系提供理论依据。     

根皮素缩氨基硫脲合成及其抑制酪氨酸酶活性作用

以根皮素为母体合成了根皮素缩氨基硫脲,采用UV,IR,1 H NMR,13 C NMR及MS等手段对产物进行结构表征。以L-多巴为底物研究了根皮素及根皮素缩氨基硫脲对酪氨酸酶的抑制作用。结果表明,相比于根皮素,根皮素缩氨基硫脲对酪氨酸酶表现出更强的抑制作用,其IC50值为57.81±1.46μM。酶学动力学研究表明,二者对酪氨酸酶的抑制作用均表现为混合型可逆抑制作用。     

线性扫描溶出伏安法测定食品中的乙基香兰素

报道了食品中乙基香兰素的线性扫描溶出伏安测定方法。在pH1.98Britton-Robinson缓冲溶液中,乙基香兰素有一灵敏的氧化峰,峰电位为976mV(vs.Ag/AgCl),其峰电流与乙基香兰素的浓度在0.5~5.5μg·mL-1范围内呈线性关系,检测限为0.11μg·mL-1。还对乙基香兰素的电化学行为进行了较详细的探讨。将该法用于食品中乙基香兰素含量的测定,结果令人满意。