基于H2O2-丁基玫瑰红B-Fe2+体系的荧光猝灭法测定血清过氧化氢酶的活性

利用H₂O₂-Fe²⁺可以快速使丁基玫瑰红B(BRMB)发生荧光猝灭,而过氧化氢酶(CAT)对该猝灭有抑制效应,提出了基于H₂O₂-BRMB-Fe²⁺体系的荧光猝灭法测定血清CAT活性的方法。取血清样品10μL,加入1 mmol·L^-1 H₂O₂底液0.50 mL,于30℃恒温反应15 min,再依次加入0.02 mmol·L^-1 BRMB溶液0.70 mL、0.1 mol·L^-1冰乙酸-乙酸钠缓冲液(pH 4.2)1.00 mL和0.01 mol·L^-1 Fe²⁺溶液0.08 mL,于室温反应20 min后用水定容至10 mL,测定体系在590 nm发射波长处的荧光强度F;以煮死酶液为对照,按照同样的方法测定其在590 nm发射波长处的荧光强度F₀。结果表明：CAT活性在0.005...     

牛血红蛋白催化分光光度法测定过氧化氢

在pH 4.8的0.1mol·L-1柠檬酸-0.2mol·L-1磷酸氢二钠缓冲介质中,于43℃水浴加热60min,牛血红蛋白对过氧化氢氧化邻苯二胺的反应有明显的催化作用。试验结果表明:过氧化氢浓度在8.24×10-6~2.31×10-4 mol·L-1范围内与相应吸光度的增加值ΔA呈线性关系,检出限(3s/k)为4.50×10-8 mol·L-1。据此提出了牛血红蛋白催化分光光度法测定过氧化氢的含量。采用此法测定消毒液和雨水中过氧化氢的含量,测定值的相对标准偏差(n=5)分别为0.081%和1.6%,消毒液中过氧化氢的测定值与滴定法测定结果相符。以上述2种试样作基体用标准加入法进行回收试验,测得回收率分别为99.3%和97.3%。     

荧光光度法测定过氧化氢

在碱性介质中,以四羧基铁酞菁为过氧化物酶模拟催化H2O2氧化邻苯二胺,生成2,3-二氨基吩嗪,该产物在577 nm处产生荧光,其荧光强度随H2O2浓度的增大而增加,在1.6×10-7～9.7×10-6mol/L范围内呈良好的线性关系,相关系数r为0.9941,据此建立了一种测定痕量H2O2的新方法。方法的检出限为1.1×10-7mol/L,用于雨水中H2O2的测定,结果令人满意。     

Fe2+-H2O2-RhB体系荧光猝灭法测定CAT活度

基于Fe²⁺-H₂O₂-RhB荧光猝灭体系实现过氧化氢酶(CAT)活度测定。荧光物质罗丹明B(RhB)于585 nm处有特征荧光峰,H₂O₂、Fe²⁺协同作用致其荧光猝灭,CAT是H₂O₂分解专属酶,CAT对H₂O₂的前期分解在一定程度上保留了RhB荧光。结果表明,加酶前后荧光强度变化(ΔF)与酶活度之间线性相关,线性范围为5.6×10^-5～5.6×10^-2 U/mL,其线性方程为ΔF=-3.466+1 472E(U/mL),相关系数r=0.9962,检测限为2.6×10^-5U/mL。该方法具有良好的重现性和准确性,可应用于人体血清CAT活度的快速检测。     

2，3-二氨基萘荧光光度法测定楚雄地区糖尿病患者发硒含量

采用2,3-二氨基萘荧光光度法测定了楚雄地区糖尿病患者发硒含量,选取糖尿病患者50例,健康人群30例进行测定。结果表明,楚雄地区糖尿病患者发样中硒含量总体平均值为（0．3052±0．1263）μg/g,健康人群发样中硒含量总体平均值为（0．3345±0．1512）μg/g,糖尿病患者发样中硒含量明显低于健康人群,差异有统计学意义。     

催化荧光光度法测定痕量过氧化氢

在pH 7.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲溶液中,四羧基铁酞菁(FeTCPc)能催化过氧化氢氧化L-酪氨酸,形成荧光二聚体,据此提出了荧光光度法测定水中过氧化氢的方法。在激发波长(λex)320nm与发射波长(λem)410nm处,反应体系的ΔF(F-F0)与过氧化氢的浓度在7.6×10-7～2.7×10-5 mol.L-1之间呈线性关系,方法的检出限(3s/k)为5.2×10-8 mol.L-1。以此方法对两种水样进行分析,测得回收率在96.5%～96.9%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)在1.0%～2.8%之间。     

酶催化分光光度法测定过氧化氢

过氧化氢能够氧化茜素红使之褪色,而模拟酶-血红蛋白对其具有催化作用.建立了一种以茜素红为指示剂的过氧化氢一茜素红一血红蛋白酶催化反应体系测定痕量过氧化氢的方法.确定了反应的最佳条件,体系的酸度为pH 9.8的氨水-氯化铵缓冲溶液,最大吸收波长为525 nm.线性范围为3.0×10-7～8.0×10-5mol·L-1,检出限(3s/k)为5.2×10<'-8>mol·L-1,表观摩尔吸光率为1.1×104mol-1·cm-1.该方法可用于雨水及消毒水中过氧化氢含量的测定.并以此样品为基体,测定了方法的平均回收率和相对标准偏差(n=5)依次为100.3%及3.26%.     

2-氨基咪唑血红素模拟酶催化荧光光谱法测定过氧化氢

基于2-氨基咪唑血红素模拟酶催化过氧化氢氧化对甲酚的反应建立了测定过氧化氢浓度的荧光光谱法。在优化的试验条件下,过氧化氢浓度在1.02×10-8~3.07×10-5 mol·L-1范围内与体系的荧光强度呈线性关系,方法的检出限(3S/N)为8.31×10-9 mol·L-1。本方法用于雨水中过氧化氢的测定,加标回收率在95.1%~99.0%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.3%~2.5%之间。     

催化动力学荧光光度法测定溴化物

研究在硫酸介质中,Br-对过氧化氢氧化罗丹明6G反应具有催化作用,基于此建立了测定微量Br-离子的催化荧光光度方法。结果表明:反应体系的激发波长和发射波长分别为556nm、535nm,测定的线性范围为1.68×10-6~3.36×10-5mol·L-1,检出限为1.14×10-6mol·L-1。方法用于样品中微量Br-的测定,相对标准偏差为1.393%~1.829%,回收率为99%~101%。     

荧光分光光度法测定中药对过氧化氢的清除率

基于苯胺被H2O2氧化为硝基苯使其荧光猝灭的原理建立了一种测定中药对H2O2清除率的新方法。研究表明：苯胺荧光在pH7～8之间有最大强度；乙醇浓度为50%（V/V）时，瑞利散射干扰最小，荧光强度最大；苯胺浓度为110mmol/L，H2O2的浓度小于1mmol/L时，苯胺荧光猝灭程度与H2O2浓度呈线性关系，测定了中药厚朴和杜仲对H2O2的清除率，结果与鲁米诺化学发光法测定值一致。     

6-巯基嘌呤-H2O2-Cu2+-NaOH体系荧光分光光度法测定6-巯基嘌呤的研究

在碱性介质中,6-巯基嘌呤(6-MP)与过氧化氢反应可在405 nm波长处产生微弱的荧光,微量铜(Ⅱ)的存在能大大增敏其荧光强度。据此,建立了一种高灵敏测定6-MP的荧光光度分析新方法。在优化的条件下,体系的荧光强度与6-MP的浓度在2.1×10-8~1.7×10-5mol.L-1范围内呈线性关系,检出限为7.1×10-9mol.L-1。方法用于片剂中6-MP含量的测定,其结果与药典方法对照,令人满意。     

催化荧光光度法测定辣根过氧化物酶及甲胎蛋白

建立了催化动力学荧光光度法测定辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）及人甲胎蛋白（ＡＦＰ）的新方法。在含ＴｒｉｔｏｒＸ－１００的磷酸盐缓冲溶液中,辣根过氧化氢氧化邻苯二胺的产物２,３－二氨基吩嗪的荧光强度有明显的增强。在一定的实验条件下,该产物的荧光强度与ＨＲＰ的量成正比,方法对ＨＲＰ的线性范围为１０～２００pg,线性相关系数为０．９９５６,最低检出下限可达８pg,其相对标准偏差为３．２％（n＝１０）。应用此测定体     

中性红褪色光度法测定白菜中过氧化氢酶活性

建立了一种中性红(NR)褪色光度法测定过氧化氢酶(CAT)活性的方法。称取20g本地大白菜样品,研碎,用磷酸盐缓冲溶液(pH 7.0)定容至1 000.0mL,取稀释液1.00mL于50mL容量瓶中,再加入1mmol·L~(-1) H_2O_2基质溶液5.00mL,在25℃下进行酶催化反应15min后,立即加入0.01mol·L~(-1)酸性Fe~(3+)溶液(内含0.02mol·L~(-1) H_2SO_4溶液)1.00mL用于终止酶促反应(H_2SO_4)和催化褪色反应(Fe3+),再加入5×10~(-4)mol·L~(-1) NR溶液3.00mL,摇匀,在80℃水浴中进行褪色反应,25min后加水定容。取适量样品溶液于1cm比色皿中,以水为参比,于波长528nm处测量其吸光度A。同时完成空白试验吸光度A0测定,根据吸光度的变化ΔA(ΔA=A0-A)确定CAT的活性(E)。结果表明:在10min内,酶促反应符合一级动力学反应的特征,CAT活性E在0.3U·mL~(-1)内与ΔA呈线性关系,检出限(3S/N)为0.006 8U·mL~(-1)。对大白菜的叶、茎、根进行加标回收试验,CAT的含量依次为6.25,9.00,8.00U·g~(-1),回收率均为104%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.7%～3.4%。将大白菜茎部自然放置4d后,CAT活性降至最初的30%。     

过氧化氢—磷钼蓝体系催化光度法测定痕量铁

铁在酸性条件下对过氧化氢氧化磷钼蓝的退色反应具有显著的催化，此建立了催化光度法测痕量铁的新方法。本方法的检出限为６×１０＾－７ｇ／Ｌ，测定范围为每２５ｍＬ０－２μｇ。     

橙黄G-Fenton体系催化分光光度法测定雨水中过氧化氢

基于在pH=3.0的H2SO4介质中,利用Fenton体系产生的羟基自由基能够与橙黄G发生反应,使其吸光度降低的原理,建立了一种在常温下测定H2O2浓度的催化光度分析新方法.在橙黄G最大吸收峰478 nm波长处测得的吸光度降低值(△A)与H2O2浓度在0～100 μmol/L范围内呈线性相关,检测限(S/N=3)为0.5μmol/L.该方法简单、方便、快捷,将其应用于雨水中微量H2O2的测定,结果满意.     

罗丹明B荧光猝灭法测定过氧化氢酶活性

构建罗丹明B(RB)荧光猝灭法测定过氧化氢酶(CAT)活性新方法。研究表明,在酸性条件下碘离子与过氧化氢反应生成碘,碘与罗丹明B反应导致其荧光猝灭,过氧化氢酶加入前后荧光强度变化量体现了酶的活性,由此建立了一种简便的过氧化氢酶活性荧光分析方法。加酶前后罗丹明B荧光猝灭值与0.15～9U·L^-1活度范围内的过氧化氢酶呈良好的线性关系,检测限达到0.005U·L^-1。方法用于鱼肝提取液CAT分析,结果令人满意。     

铬-二苯卡巴肼体系间接光度法测定过氧化氢

酸性条件下,Cr(Ⅵ)与二苯卡巴肼形成稳定的紫红色铬合物,在544nm处有最大吸收,利用过氧化氢对该体系的褪色作用可实现过氧化氢的间接测定,摩尔吸光系数为2.51×10     

基于邻苯二胺与Ag+构建荧光探针检测邻苯二酚

本文利用Ag⁺氧化邻苯二胺(OPD),生成银纳米颗粒(AgNPs)和橘黄色的荧光物质2,3-二氨基吩嗪(OPDox)。邻苯二酚(CC)有2个相邻的酚羟基,在弱碱性介质中,容易通过氧化自聚黏附在AgNPs表面,抑制了AgNPs对Ag⁺与OPD之间反应的催化作用,导致生成OPDox的量减少,荧光强度下降。据此,建立一种原位构建OPDox荧光探针测定水中CC的方法。在最佳实验条件下,体系荧光强度的变化(ΔF)与CC浓度在0.080～1.0μM范围内呈现良好的线性关系,该方法的检出限为0.024μM。一些常见的酚类化合物,如间苯二酚(RC)、对苯二酚(HQ)等不干扰测定。该方法灵敏,操作简单,可以应用于水样中邻苯二酚的选择性检测。     

过氧化氢氧化-荧光分光光度法测定片剂中叶酸含量

1　引　　言作者曾开发出ＫＭｎＯ4 氧化 荧光分析法测定片剂中叶酸 (ＰＧＡ)含量的荧光新体系。该法通过测定ＰＧＡ的氧化产物蝶呤 6 羧酸的荧光强度 ,间接测定了ＰＧＡ的含量。考虑到用Ｈ2 Ｏ2 氧化ＰＧＡ ,分析其氧化产物蝶呤 6 甲醛的结构 ,也是强荧光性物质 ,也有可能用荧光测定法。为此本文详细研究了在ＮａＡｃ ＨＡｃ和ＮＨ4 Ｃｌ ＮＨ3·Ｈ2 Ｏ不同缓冲溶液中Ｈ2 Ｏ2 氧化ＰＧＡ的最佳条件和荧光特性 ,ＰＧＡ的检测限分别为 5 .2 μｇ/Ｌ(ｐＨ 5 .0 )、6.8μｇ/Ｌ (ｐＨ 10 .5 0 ) ,前者最佳ｐＨ范围较宽 ,抗干扰能力也明显强于…