小鼠肝组织中单胺氧化酶碱解产物(次黄嘌呤、腺嘌呤)的高效液相色谱分析

用HPLC法检测小鼠肝组织中单胺氧化酶碱解产物(次黄瞟呤、腺嘌呤)方法。该方法快速简单,提取样品所用缓冲溶液KOH-KHPO_4(pH=7.2)为最佳。碱解量KOH 2ml,温度36℃,时闻24h,所用色谱条件为: HPLC柱C_(18) 4.6mm×25cm 5μm,流动相为)甲醇:水10:90(V/V,检测波长249nm,灵敏度0.05AuFs,该方法只需12min将完成一次色谱分析。     

三聚氰胺在双色谱柱串联模式下的色谱保留研究

研究了亲水相互作用色谱柱串联C_(18)柱上三聚氰胺的色谱保留,并应用牛奶基质中三聚氰胺的高效分离。将HILIC柱与C_(18)柱串联,研究不同色谱柱串联顺序及色谱分离条件下三聚氰胺的保留情况,结果表明:当流动相为乙腈-乙酸铵(10mmol/L)=85∶15(v/v)、柱温30℃、流速0.75mL/min、检测波长220nm、HILIC柱在前C_(18)柱在后串联时,三聚氰胺分离效果最佳。在最佳的色谱条件下,对市售牛奶进行测定,未检测出三聚氰胺,加标回收率在81.1%～119%,三聚氰胺在双柱模式下分析效果良好。     

高效液相色谱手性流动相添加法拆分阿卓乳酸对映体

采用C₁₈反相色谱柱,以磺丁基醚-β-环糊精（SBE-β-CD）作为手性流动相添加剂,建立了阿卓乳酸对映体的高效液相色谱拆分方法。考察了环糊精衍生物类型、手性添加剂浓度、流动相pH、流速和柱温对手性分离的影响,同时探讨了高效液相色谱采用磺丁基醚-β-环糊精分离阿卓乳酸对映体的分离机制及包结常数,确定了色谱条件为YMC-Pack ODS-A C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为含25 mmol/LSBE-β-CD的0.1 mol/L磷酸盐缓冲液（pH 2.68）-乙腈（90：10,v/v）,流速为0.6 mL/min,柱温为30 ℃,紫外检测波长为220 nm。对映体的保留时间分别为26.65和28.28 min,分离度为1.68。本方法分离度好,简便易行,且比使用手性固定相分离更加经济。     

高效液相色谱-荧光检测法同时测定血清中的犬尿氨酸和犬尿喹啉酸

建立了在线衍生、双波长高效液相色谱-荧光检测器同时检测血清中犬尿氨酸(kynurenine, Kyn)和犬尿喹啉酸(kynurenic acid, KYNA)含量的方法。血清标本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后,上清液直接进样分析测定。采用的色谱柱为Hypersil C8柱;流动相为0.25 mol/L醋酸锌-50 mmol/L醋酸溶液(含3%乙腈),流速为1.5 mL/min。在0～10 min时间段,在激发波长和发射波长分别为365 nm和480 nm时检测Kyn;10 min后,在激发波长和发射波长分别变换为344 nm和404 nm时检测KYNA。Kyn的保留时间约为8.1 min,线性范围为98～19600 nmol/L,最低检出浓度为50 nmol/L,平均回收率为94.88%,日内、日间测定值的相对标准偏差(RSD)均低于4%。KYNA的保留时间约为13.0 min,线性范围为2.62～1047 nmol/L,最低检出浓度为0.11 nmol/L,平均回收率为102.72%,日内、日间测定的RSD均低于4%。苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸和5-羟色胺等物质对目标物的检测无干扰。71例健康成人血清中,Kyn和KYNA含量分别为(1.40±0.34) μmol/L和(24.22±8.67) nmol/L。该方法简便、快速、灵敏、特异,适于临床和科研应用。     

铽增敏高效液相色谱柱后衍生荧光检测法同时检测鸡肉中的三种氟喹诺酮类药物残留

基于氟喹诺酮类药物与铽离子形成配合物后的荧光增强作用,建立了同时检测鸡肉中氟喹诺酮类(FQs)药物环丙沙星、诺氟沙星和恩诺沙星残留的Tb3+增敏高效液相色谱（HPLC）柱后衍生荧光检测方法。优化的实验条件如下：流动相为0.05 mol/L 醋酸/醋酸钠缓冲液(pH 6.0)-乙腈(体积比为89∶11),色谱柱为Hypersil BDS-C18,柱温40 ℃,流速0.8 mL/min;Tb3+浓度为8×10-5 mol/L;衍生反应温度40 ℃,衍生泵流速0.5 mL/min;荧光检测激发波长271 nm,发射波长545 nm。实验结果表明,将上述3种药物以1.0,10.0,50.0,100.0 ng/g水平添加到鸡肉后的回收率范围为66.3%~88.0%,相对标准偏差（RSD）均小于15.0%。定量分析的线性范围为0.1~500 ng/mL,方法的日内和日间RSD均小于13.0%;最低检出限分别为0.05(环丙沙星)、0.05(诺氟沙星)和0.08(恩诺沙星)ng/g,比前人报道的非衍生高效液相色谱荧光检测法检测FQs药物的灵敏度有极大的提高。该项研究为FQs药物多残留检测提供了灵敏度更高的新方法。     

核酸水解产物嘌呤、嘧啶碱基在BDS柱上的分离及测定

 用高效液相色谱法测定了核酸水解的中间产物及最终产物 6种嘌呤、嘧啶碱基 ,探讨了色谱柱、流动相等对其分离的影响 ,确定了最佳色谱条件为 :HypersilBDS C18柱 ,乙腈 0 1mol/LKH2 PO4 (H3 PO4 调节 pH至4 0 5 ) (体积比为 2∶98)作流动相 ,紫外检测器在 2 6 0nm波长下检测。方法的精密度在 3%以内 ,回收率在 82 %～ 114%。方法应用于酵母核酸样品的测定中 ,取得了很好的结果。     

高效液相色谱法同时测定虫草素和腺苷

本文用微波法提取蛹虫草培养基和子实体中的虫草素及腺苷,并利用高效液相色谱法同时测定虫草素和腺苷.选择Inertsil ODS-SP柱(150×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,乙腈-水为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,二极管阵列检测器(DAD)检测,检测波长260 nm,进样量10 μL.在2～10 μg...     

高效液相色谱法同时测定鸭梨种子中3种内源激素

建立了高效液相色谱同时测定鸭梨种子中3种内源激素赤霉素(GA3)、生长素(IAA)和脱落酸(ABA)含量的方法.采用C18反相色谱柱,柱温35 ℃,以甲醇-水(含1%乙酸)(4∶ 6, V/V)为流动相,流速为1 mL/min, 检测器波长开始用254 nm, 2.5 min时将波长切换至210 nm,至3.8 min,GA3出峰结束后,再次将波长切换回254 nm测定IAA和ABA.GA3、IAA和ABA的平均回收率分别为92.8%、91.6%和94.7%.为快速、准确分离和测定鸭梨种子内源激素提供了一种可靠方法.     

高效液相色谱法测定过氧化氢工作液中2-乙基蒽醌、2-戊基蒽醌及其氢化物

建立高效液相色谱法快速测定过氧化氢工作液中2-乙基蒽醌、2-戊基蒽醌及其氢化物含量的方法.选择ZorbaxXDB–C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为分离柱,以甲醇–水溶液(体积比为75:25)为流动相,流量为0.8 mL/min,柱温为40℃,紫外检测器检测,检测波长为254 nm,外标法定量.2-乙...     

大肠杆菌DNA和RNA中核苷的高效液相色谱分析

建立了用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定大肠杆菌（E.coli）脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）水解产物中核苷的方法，色谱柱为Supelco Inc.c18反相柱，254nm和280nm紫外吸收波长同时检测，分析条件经选择在流速为1mL/min，流动相A（2.5%甲醇 0.01mol/L KH2PO4,PH4.6)28min，流动相B（8.0%甲醇 0.01mol/L KH2PO4，PH4.6)37min，柱温为20℃条件下65min可实现核苷的完全分离，回收率为80.19%-99.31%，相对标准偏差RSD为0.86%-2.62%，该方法具有高灵敏度、高选择性的特点，得到的结果与十分满意。     

固相萃取-高效液相色谱法测定人血浆中的川芎嗪

建立了高效液相色谱测定人血浆中川芎嗪浓度的方法。色谱条件:分析柱为Luna C18(150 mm×4.6 mm i.d.,5 μ m),流动相为甲醇-乙腈-醋酸盐缓冲液(pH 5.0)(体积比为50∶8∶42),流速1.0 mL/min,柱温40 ℃,检测波长280 nm。 血浆样品预处理采用C8固相小柱萃取法。方法的线性范围为25～5000 μg/L,线性相关系数为0.9999。高、中、低浓度 的川芎嗪在标准血浆样品中的平均提取回收率为96.72％～100.90％,日内和日间相对标准偏差(RSD)小于8.64％,准确度 为99.59%~103.26%,检测限为10 μg/L。该方法的各项效能指标符合生物样品的分析要求,可用于川芎嗪制剂的人体药 代动力学研究。     

Multielement electrothermal atomic absorption spectrometry: A study on direct and simultaneous determination of chromium and manganese in urine

A study was carried out on the direct determination of Cr and Mn in urine using simultaneous atomic absorption spectrometry (SIMAAS). The heating program conditions, the absorbance signal profiles, the influence of different chemical modifiers, and the urine sample volume delivery into the tube were optimized to perform the calibration with aqueous solutions. Among several chemical modifiers tested, the best recovery and repeatability results were obtained for 3 microg Mg(NO3)2. On using this modifier, the pyrolysis and atomization temperatures for simultaneous determination of Cr and Mn were 1,300 degrees C and 2,500 degrees C, respectively. Urine samples were diluted (1+1) with 2.0% (v/v) HNO3 + 0.05% (w/v) Triton X-100 prepared in high purity water. A 20-microL aliquot of analytical solution and 10 microL of chemical modifier solution were delivered to the graphite tube. The characteristic masses were 7.8 pg for Cr (RSD=4.0%) and 4.6 pg for Mn (RSD=2.6%). The limits of detection were 0.08 microg L(-1) (n=20, 3s) for Cr and 0.16 microg L(-1) (n=20, 3s) for Mn. Recovery studies for 1.0 or 2.5 microg L(-1) of Cr and Mn added to different urine samples showed acceptable results for Cr (100%, RSD=14%) and Mn (88%, RSD=5.6%).     

Direct determination of Cr and Cu in urine samples by electrothermal atomic absorption spectrometry using ruthenium as permanent modifier (R1)

In this study Ru, deposited thermally on an integrated platform pyrolytic graphite tube, is proposed as a permanent modifier for the determination of Cu and Cr in urine samples by electrothermal atomic absorption spectrometry. The samples were diluted 1:1 with nitric acid (1% v/v). Pyrolysis and atomization temperatures for spiked urine samples were 1,100 degrees C and 1,900 degrees C respectively for Cu, and 1,400 degrees C and 2,500 degrees C respectively for Cr. For comparison purposes, the conventional modification with Pd+Mg was also studied. The sensitivity for Ru as permanent modifier was higher for the two analytes. The characteristic masses were 7.3 and 17.7 for Cr and Cu. The detection limits (3sigma) were 0.22 and 0.32 microg/L, for Cr and Cu, respectively. Good agreement was obtained with certified urine samples for the two elements.     

高效液相色谱-荧光检测法测定牛奶中氯霉素的残留量

建立了对牛奶中氯霉素的残留量进行检测的高效液相色谱-荧光检测方法。氯霉素还原后在温和条件下与荧光胺发生衍生化反应,采用十八烷基键合硅胶固定相,以乙腈/四氢呋喃/0.02 mol/L醋酸钠-醋酸缓冲液(pH 6.0)(体积比为16∶8∶76)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温40 ℃,荧光检测激发波长为410 nm,发射波长为508 nm。在上述实验条件下,氯霉素检测的线性范围为0.4~800 μg/L (r2=0.9999),检出限为0.2　μg/L。当空白样品中氯霉素添加水平为2~40 μg/L时,该方法的回收率为66.6%~92.8%,相对标准偏差为4.5%~9.4%。该方法适用于牛奶中氯霉素痕量残留的监测,具有干扰小、选择性好、灵敏度高等优点。     

高效液相色谱法测定头孢他啶的含量及杂质

采用高效液相色谱法测定了头孢他啶的含量及杂质。以Alltima C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)为分离柱,以乙腈和磷酸盐缓冲溶液(pH 3.9)分别为流动相A和流动相B进行梯度洗脱,流速1.3 mL/min,柱温35 ℃,紫外检测波长255 nm。从头孢他啶药物中共分出14个杂质,且14个杂质间具有良好的分离度。头孢他啶在0.267~1069 μg/mL范围内与峰面积具有良好的线性关系(r=1.0000);其定量限(S/N=10)和最低检出限(S/N=3)分别为3.1 ng和0.93 ng。3个浓度的日内测定值的相对标准偏差(RSD）为0.72%(n=3),日间测定值的RSD为0.91%(n=3)。头孢他啶溶液在4 ℃避光条件下放置24 h保持稳定。本方法与欧洲/英国药典和日本药局方的方法比较,具有分离杂质数量多、分离度好的优点。     

反相高效液相色谱法测定苹果中槲皮素的含量

采用反相高效液相色谱法测定了苹果肉和苹果皮中槲皮素的含量。将样品于-80 ℃冷冻24 h后,在2,6-二叔丁基对 甲酚的保护下加入6 mol/L盐酸制成匀浆,于90 ℃恒温水浴中回流水解2 h。水解液在反相ODS柱上分离,以甲醇-水(体积 比为55∶45,乙酸调pH值为3.3)为流动相,在波长370 nm处进行测定。结果表明:苹果肉中槲皮素的平均含量为3.11～10.78 μg/g;苹果皮中槲皮素的平均含量为253.57～744.59 μg/g;苹果肉中槲皮素的平均加标回收率为100.4%。该法操作简 便易行、结果准确可靠。     

柱切换技术-高效液相色谱法快速检测大鼠血浆中的普萘洛尔对映体

建立了快速检测大鼠血浆中普萘洛尔对映体浓度的柱切换-高效液相色谱法。将自制限进填料柱作为预处理柱,通过直接进样方式,使普萘洛尔对映体在预处理柱上保留,同时除去血浆中的蛋白质等大分子;再通过柱切换技术,使普萘洛尔对映体在键合型纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(Chiralcel OD-RH)分析柱上得到手性拆分。通过条件优化,确定切换前预处理流动相为硼酸盐缓冲液(pH 8.5)-甲醇(95:5, v/v),流速为1.0 mL/min;切换后分析流动相为异丙醇-乙醇-0.2 mmol/L硼酸盐缓冲液(pH 8.5)(30:30:40, v/v/v),流速为0.8 mL/min;切换时间为3 min;柱温为25 ℃;检测波长为293 nm。普萘洛尔两对映体在25～500 mg/L的质量浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.9995), 3个加标水平(50、100、250 mg/L)的平均回收率为97.89%～101.56%,日内和日间精密度均小于5%。该方法简便、快速、灵敏、准确,适于血浆样本中手性药物的药代动力学研究。     

Determination of polyethylene glycol in low-density polyethylene by large volume injection temperature gradient packed capillary liquid chromatography

Polyethylene glycol (PEG) 20000 in low-density polyethylene has been determined using column switching and inverse temperature programming in reversed-phase packed capillary liquid chromatography with evaporative light scattering detection. PEG 20000 was extracted into water from the polyethylene dissolved in toluene and PEG 35000 was added as an internal standard (I.S.). The samples in aliquots of 100 microl were reconcentrated on the enrichment column using a loading mobile phase of acetonitrile-water (3:97, v/v) at a flow-rate of 75 microl/min for 3 min, then back-flushed and separated on the analytical column with acetonitrile-THF-water (40:5:55, v/v) as mobile phase. The column temperature was reduced from 68 to 55 degrees C with a ramp of -1.5 degrees C/min, held constant for 3 min and then reduced further to 45 degrees C with a -1.5 degrees C/min ramp and kept constant for 1 min. The analysis runtime was 20 min. The recovery of PEG 20 000 was determined to 65.1% with 2.8% RSD and the mass limit of detection of PEG 20 000 was 1.25 microg. The within-assay and between day precision of the retention times of both PEG 20000 and PEG 35000 displayed RSD of less than 1.1% (n = 9), while the overall area ratio RSD of 100 microg/ml PEG 20000 over PEG 35000 was 1.3% (n = 9). The method was linear within the investigated concentration range 25-125 microg/ml (R2 = 0.9983). In addition, a mixture of PEG 4000, 8000, 10000, 20000 and 35000 was analysed on the system to demonstrate the possibility of analysing several PEGs in a sample with the use of temperature gradient elution.     

气相色谱法检测人尿中R,S-美芬妥英浓度

建立了人尿中Ｒ,Ｓ－美芬妥英的气相色谱（ＧＣ）手性分离与检测方法。在选定的色谱条件下能很好地分离Ｒ,Ｓ－美芬妥英,尿中其它物质无干扰。用外标法定量,线性范围为１２．５～２５００μｇ／Ｌ尿,最小检出浓度为６μｇ／Ｌ尿。方法具有样本制备简便、分析时间短、线性范围宽、干扰少、灵敏和准确等优点,已广泛用于人体内美芬妥英代谢的研究和肝药酶ＣＹＰ２Ｃ１９酶活性的检测。     

高效液相色谱-柱前衍生化法测定饲料中的含硫氨基酸

发展了一种饲料中含硫氨基酸的检测方法。样品经过甲酸氧化,将其中的胱氨酸和蛋氨酸分别氧化为磺基丙氨酸和蛋氨酸砜;再经酸水解后,采用2,4-二硝基氟苯进行柱前衍生化,衍生物经高效液相色谱分析。使用Elite AAK C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)分离;以0.05 mol/L乙酸钠和乙腈-水(50:50, v/v)为流动相,梯度洗脱,流速为1.2 mL/min;检测波长为360 nm;柱温为31 ℃。结果表明,胱氨酸在0.4～16.0 mg/L、蛋氨酸在0.7～29.6 mg/L范围内的线性相关系数分别为0.9999、0.9998;胱氨酸和蛋氨酸的定量限(信噪比(S/N)=10)分别为2.6 μg/kg和3.1 μg/kg;3次样品平行测定的胱氨酸和蛋氨酸含量的相对标准偏差(RSD)分别为0.79%和2.56%,加标回收率分别为100.28%～102.00%和105.72%～107.89%。该方法分析成本低,测定结果准确,灵敏度高,符合饲料中含硫氨基酸的检测要求。