促甲状腺激素化学发光免疫分析的研究

抗原、抗体间可发生特异性免疫反应 ,将发光物质标记在抗体上 ,经免疫反应和化学发光反应 ,测量光信号可对待测抗原进行定性、定量分析。本实验以吖啶酯DMAE·NHS标记TSH单克隆抗体 ,建立了TSH化学发光免疫分析方法。该方法分析灵敏度为 0 .0 1mIU/L ,批内相对标准偏差为 4 .2 9%～ 6 71% ,批间相对标准偏差为 4 .36 %～ 8.14 % ;平均回收率为 98%。与TSHIRMA法的相关方程为Y =0 .0 2 +0 .92X ,相关系数为 0 .993;与CibaCorningTSHCLIA测量值的相关方程为Y =- 0 .16 +0 .92X ,相关系数为 0 .986。     

化学发光物质9-[2',6'-二甲基-4'-(琥珀酰亚胺氧羰基)苯氧羰基]-10-甲基吖啶-单甲基-磺酸盐的合成

报道了一种化学发光物质吖啶酯衍生物9-[2',6'-二甲基-4'-(琥珀酰亚胺氧羰基)苯氧羰基]-10-甲基吖啶-单甲基-磺酸盐(DMAE·NHS)的合成,合成共经历7个步骤,每步合成的产物经IR,1H NMR,MS和元素分析表征,结果表明合成产物为所期望的化合物.该合成产物显示为一种非常理想的化学发光物质.     

化学发光物质9-[2',6'-二甲基-4'-(琥珀酰亚胺氧羰基)苯氧羰基]-10-甲基吖啶-单甲基-磺酸盐的合成

报道了一种化学发光物质吖啶酯衍生物9-[2',6'-二甲基-4'-(琥珀酰亚胺氧羰基)苯氧羰基]-10-甲基吖啶-单甲基-磺酸盐(DMAE•NHS)的合成, 合成共经历7个步骤, 每步合成的产物经IR, ¹H NMR, MS和元素分析表征, 结果表明合成产物为所期望的化合物. 该合成产物显示为一种非常理想的化学发光物质.     

甲基、磺酸基取代的9,9'-双吖啶衍生物的化学发光研究

研究了１０,１０’－二甲基－９,９－双吖啶（ＤＭＢＡ）,２,２‘－二磺酸基－９,９－双吖啶二硝酸盐（ＤＳＢＡＤＮ）,１０,１０’－二甲基－２,２‘－二磺酸基－９,９’－双吖啶（ＤＭＤＳＢＡ）,及１０,１０‘－二甲基－９,９’－双吖啶二硝酸盐９ＤＭＢＡＤＮ,谷称光泽精）等４种９、９‘－双吖啶衍生物的化学发性质,发现１０,１０’－二 磺酸基－９,９‘－双吖啶的化学发光强度是光泽精的２２倍,是迄今为止发     

碘化10-乙羧基吖啶-9-羧酸苯酯的电致化学发光行为研究

研究了碘化10-乙羧基吖啶-9-羧酸苯酯(CACPEI)的电致化学发光行为.结果表明,在KNO₃介质中,于Pt电极上施加正矩形脉冲电压时,10-乙羧基吖啶-9-羧酸苯酯产生很强的电致化学发光(ECL)信号,信号强弱受电化学参数和发光反应条件的影响,探讨了可能的发光机理.在最佳条件下发光信号与CACPEI的浓度在5.0×10^-10～1.2×10^-7g/mL范围内呈良好的线性关系.检出限可达2.4×10^-10g/mL.     

10,10’-二甲基-3,3’-二磺酸基-9,9’-双吖啶的电致化学发光行为

研究了新试剂10,10'-二甲基-3,3'-二磺酸基-9,9'-双吖啶(简称DMDSBA)的电致化学发光(ECL)行为. 考察了电化学参数、反应介质以及pH等条件对DMDSBA电致化学发光信号的影响. 结果表明, 在玻碳电极上施加适当电压时, DMDSBA在KNO₃溶液介质中产生很强的电化学发光信号, 于优化的实验条件下, 发光强度的自然对数与DMDSBA浓度的自然对数在1.0×10^-5-1.0×10^-8 mol·L^-1范围内呈良好的线性关系,检出限可达2.3×10^-9 mol·L^-1. 并用循环伏安法、电致化学发光光谱以及荧光光谱, 研究了DMDSBA的电致化学发光机理.     

新型荧光试剂N-9-吖啶基氨基乙酸及其甲酯的合成

设计合成了新型荧光试剂N-9-吖啶基氨基乙酸及N-9-吖啶基氨基乙酸甲酯,其结构经IR,^1H NMR表征,并初步讨论了它们的荧光性质及UV性质。可望应用于金属离子和有机高分子的检测及免疫分析等方面。     

第二菊酸类混合含氟苄酯的合成及其杀虫活性

>报道了第二菊酸及其2(3)-氟-4-甲氧甲基苄酯和2(3)-氟-4-甲基苄酯的合成, 生物活性测试的结果表明这两种新化合物对淡色库蚊四龄孑孓显示出较高的杀虫活性.     

头孢卡品酯的合成

头孢卡品酯是第四代头孢菌素中的重要品种,具有稳定性高、抗菌能力强、毒性低等特点,其合成方法已有很多研究报道。本文以7-氨基头孢氨酸(7ACA)和(Z)-2-(2-叔丁氧羰基氨基噻唑-5-基)-2-戊烯酸为原料设计并研究了4条头孢卡品酯的合成路线,最终通过路线IV成功地合成了头孢卡品酯,总收率达到14%。     

10,10′-二甲基-3,3′二氨基-9,9′-双吖啶电致化学发光行为及机理研究

研究了10,10′-二甲基-3,3′-二氨基-9,9′-双吖啶(简称DMDABA)的电致化学发光(ECL)行为.考察了电化学参数、反应介质以及pH值等条件对DMDABA电致化学发光信号的影响.结果表明:在玻碳电极上施加适当电压时,该新试剂DMDABA在KNO3乙醇溶液中产生很强的电致化学发光信号,于最优化条件下,发光强度的自然对数与DMDABA浓度的自然对数在2.16×10-5~2.16×10-8mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限可达5.2×10-9mol/L.还用循环伏安法、电致化学发光光谱以及荧光光谱研究了DMDABA的电致化学发光机理.     

化学发光酶免疫法测定游离三碘甲腺原氨酸

以辣根过氧化物酶为三碘甲腺原氨酸类似物的标记物,鲁米诺为化学发光反应底物,建立了一种高灵敏度化学发光免疫检测游离三碘甲腺原氨酸的方法。该法线性范围为0.90~80 ng/L,批内变异小于12.1%,批间相对标准偏差均小于15%,其余各项指标均良好。利用本法对血清样品进行了测定,关于甲状腺机能亢进组病人的临床诊断符合率达到83.3%。与其它化学发光免疫分析方法比较所得相关系数为0.9005。在方法条件选择上,以尽可能保持游离激素和蛋白结合激素之间的平衡为原则,提高游离三碘甲腺原氨酸浓度测定的准确性。     

红细胞标记抗体的化学发光免疫分析

用红细胞代替辣根过氧化物酶作为双抗体夹心免疫分析中第二抗体的标记物, 建立了一种红细胞标记抗体的免疫化学发光测定乙型肝炎病毒表面抗原的新方法. 在免疫反应完成后, 结合了抗原-抗体免疫复合物的致敏红细胞在低渗溶液中溶血, 释放出血红蛋白. 基于血红蛋白对鲁米诺-H2O2体系化学发光具有催化作用的原理, 采用化学发光法测定血红蛋白含量. 测得的血红蛋白发光强度与待测抗原浓度呈线性关系. 采用这种方法可检测出0.5 ng/mL的乙型肝炎病毒表面抗原. 将该方法与酶联免疫吸附分析(ELISA)结合起来对乙型肝炎患者血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg)进行检测, 两者符合率均为97%, 表明本法具有良好的灵敏度和特异性, 可用于临床标本测试.     

新化学发光试剂ITCI的合成及其性能研究

合成一种新化学发光试剂异硫氰酸异鲁米诺（ＩＴＣＩ），研究其化学发光及标记酵母ＲＮＡ的性能。标记反应条件温和快速，１克酵母ＲＮＡ可与１．５×１０－５ｍｏｌＩＴＣＩ结合。建立了测定ＩＴＣＩ和ＲＮＡ的化学发光分析方法，线性范围分别为１．０×１０－１０～１．０×１０－７ｍｏｌ／Ｌ和４．０～×１０－９～２．０×１０－７ｇ／ｍＬ，检测限分别为６．６×１０－１１ｍｏｌ／Ｌ和８．０×１０－１０ｇ／ｍＬ。     

Determination of Enrofloxacin in Bovine Milk by a Novel Single-Stranded DNA Aptamer Chemiluminescent Enzyme Immunoassay

Enrofloxacin, a widely used fluoroquinolone antibiotic, may be a cause of bacterial drug resistance and is forbidden in poultry. Consequently, a sensitive and rapid method is required for its determination. Aptamers, which are more stable and easily synthesized than antibodies, may serve as alternatives in the development of methods for rapid detection. Six single-strand DNA aptamers binding to enrofloxacin were selected by in vitro selection. Aptamer number 17 showed the highest affinity for enrofloxacin with a dissociation constant of 188 nM and the highest guanine concentration (35%), which was predicted to be crucial for strong affinity of the aptamer to enrofloxacin, and successfully distinguished enrofloxacin from its structure analogs. Using aptamer number 17, a novel chemiluminescent enzyme immunoassay associating with biotin-streptavidin was developed that allowed the determination of enrofloxacin to 2.26 ng/mL. Due to its capability to determine enrofloxacin in bovine milk, this newly selected aptamer may find broad application in food and environmental monitoring.     

农产品中三唑磷农药残留化学发光酶免疫分析方法研究

运用棋盘法确定直接竞争CLEIA法抗体和酶标半抗原的最适工作浓度,以4-(咪唑-1-基)苯酚(4-IMP)作为增强剂,运用L25(56)正交设计实验优化增敏液配方,建立了农产品中三唑磷农药残留的化学发光酶免疫分析方法。优化的最适工作条件:抗体包被浓度为2.0μg/mL,酶标半抗原浓度为0.006μg/mL;增敏液最佳配方为:6.4%DMF,0.01 mmol/L pH 9.0的Tris-HCl缓冲液,0.6 mmol/L鲁米诺,2 mmol/L H2O2,1 mmol/L 4-IMP。优化后方法灵敏度为0.489 ng/mL,线性范围为0.16~20.00 ng/mL,相关系数为0.996 4。该方法能实现对苹果、节瓜、大米、柑橘、荔枝及甘蓝等样品中三唑磷残留的快速、灵敏检测,加标回收率为82.8%~118.4%,与GC-MS法的相关性(r2)为0.957。结果表明,该方法可用于农产品中三唑磷农药的快速筛查。     

A Novel Organophosphorus Compound as a Coupling Reagent for Peptide Synthesis

3-(Diethoxyphosphoryloxy)-1,2,3-benzotriazin-4 (3H)-one 1 is a new organophosphorus compound which can be used as an efficient coupling reagent for peptide synthesis by either solution or solid phase coupling.

Standard abbreviations for amino acids and protecting groups follow the IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemistry Nomenclature: J. Biol. Chem. 1971, 247, 977.     

流动注射协同增强化学发光免疫分析法的建立与评价

以兔IgG为模型 ,NaTPB与PPP协同增强的Luminol H2 O2 HRP混合液为发光体系 ,HRP标记抗体 ,建立了灵敏度高、特异性强、重现性好的流动注射协同增强化学发光免疫分析法。结果表明 :在 2～ 6 0 μg L范围内兔IgG量与发光强度有良好的线性关系 ,相关系数r=0 .994 1 (P <0 .0 1 ) ;绝对检测限为 0 .6 5fmol;方法精密度为 4 .72 %～ 9.31 % ;回收率为 92 .5 0 %～ 99.4 0 %。免疫柱可反复使用 2 0 0次以上。本法测定不同浓度兔IgG标准溶液的结果与RIA法的测定结果基本一致     

Determination of Salbutamol,Clenbuterol, and Brombuterol in Urine by a Highly Sensitive Chemiluminescence Enzyme Immunoassay

A salbutamol-bovine serum albumin and a salbutamol-ovalbumin coating antigen were synthesized, and six New Zealand white rabbits were treated with the immunogen to obtain polyclonal antibodies to develop a rapid, sensitive, and indirect chemiluminescent enzyme immunoassay (ciCLEIA) for the analysis of swine and bovine urine. The prepared antibodies showed high cross-reactivities with clenbuterol (139.6%) and brombuterol (225%). Under the optimized conditions, the linear dynamic range and the limit of detection (LOD) for salbutamol were from 0.007 to 0.17 µg L^?1 and 0.003 µg L^?1, with a correlation coefficient of 0.9965 and a half maximum inhibition concentration of 0.028 µg L^?1. Recoveries for salbutamol, clenbuterol, and brombuterol were from 78.8% to 119.0% with intra-assay and inter-assay coefficients of variation less than 13.9% and 19.7%, respectively. The reported ciCLEIA was about 10-fold more sensitive for salbutamol and 20-fold more sensitive for clenbuterol compared to conventional methods. This study showed that ciCLEIA was a reliable, convenient, and sensitive method for the simultaneous determination of salbutamol, clenbuterol, and brombuterol in swine and bovine urine.