朊圆酵母尿酸酶的基本特性研究

研究了尿酸酶分离纯化条件和pH、温度、底物浓度、一些有机和无机试剂对尿酸酶酶促反应速度的影响.研究结果表明,用Triton X-100及巯基乙醇处理细胞悬液(pH 8.5),再用超声波处理破碎细胞效果最佳.硫酸铵沉淀尿酸酶的最佳浓度为75%.用Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析和Xanthine-agarose亲和层析两步纯化步骤可获得理想纯度的酶制剂.在一定的条件下,尿酸酶的最适pH和酸碱稳定pH范围分别为8.5和5.0~12.最适温度为37℃;热稳定性较好,在50℃处理30 min时     

产朊圆酵母尿酸酶形成条件研究

择到一株产尿酸酶较高水平的产朊圆酵母（Torula utilis Henneb）．对此菌株尿酸酶形成条件的研究表明：蔗糖、葡萄糖是酶形成的适合碳源;蛋白胨和酵母膏是产酶的适合氮源,另添加无机氮源对产酶略有帮助作用;尿酸、黄嘌呤和乌嘌呤对酶形成起诱导作用,底物尿酸是适宜的诱导物．尿酸酶形成最适培养基组成为（％）：蔗糖3,蛋白胨2,酵母膏0．5,（NH4）2SO40．05,尿酸0．05,KCl0．04,Pb^2＋、Fe^3＋、Hg^2＋、Mg^2＋、Ag^＋、Ca^2＋、Zn^2＋不利于产酶．另对培养条件做了优化探索：最适pH为6．0,在250mL三角瓶中装30mL培养液,接种量10％,在200r／min的旋转摇床上28℃振荡培养23h．     

产朊圆酵母尿酸酶的分离纯化及其部分性质研究

产朊圆酵母Y0401经尿酸诱导培养,菌体采用超声波处理,依次经过DEAE-Sepharose离子交换层析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析和Xanthine-agarose亲和层析,尿酸酶比活力达到18U/mg,纯化倍数为409倍,回收率为19.2%.纯化后的酶经还原、非还原SDS-PAGE分析为单一蛋白染色带,HPLC显示纯度为98%以上.用HPLC和Superdex 200分子筛层析两种方法测得该酶的相对分子质量为127kDa,在还原条件下进行SDS-PAGE,测得表观分子质量为33kDa,综上结果推测该酶是由分子量相同的4个亚基组成的四聚体蛋白.等电聚焦显示其等电点在6.8~7.5之间.该酶具有较强的酸碱稳定性和热稳定性.最适pH为8.5,最适温度为40.0℃.在最适pH和温度条件下测得该酶Km值为3.34×10-5mol/L.对某些金属离子和有机物对酶活性的影响也进行了研究.     

产朊圆酵母(Torula utilis Henn 2.281)尿酸酶快速提取法的研究

近年来,种类繁多的细胞破碎技术在迅速发展的生物工程领域占有越来越重要的地位．酵母细胞由于其细胞壁的特殊结构,较难破碎,从而限制了它的应用前景．对此,前人曾经进行了广泛而深入的研究：Asenjo等人对酵母细胞的酶溶过程中温度、pH、酶用量及使用次序等方面进行了深入的研究．     

产朊假丝酵母(Candida utilis)尿酸酶的基本特性

产朊假丝酵母尿酸酶通过由DEAE-sepharose和Xanthine-agarose等层析纯化.纯化酶经SDS-PAGE显示单一蛋白带,HPLC显示纯度为97.5%.其相对分子质量为127 kDa,变性SDS-PAGE表明该酶的表观分子质量为33 kDa.该酶具有较强的酸碱稳定性和热稳定性,最适pH为8.5,最适温度为40.0℃.在最适条件下测得其Km为35.0 μmol/L.某些金属离子对酶活性的研究结果表明,Co3 ,Pb2 ,Mn2 及EDTA,NEMI对尿酸酶活性有抑制作用,Mg2 ,Triton X-100对尿酸酶活性略有激活作用.     

以啤酒洗槽废水为主料产朊圆酵母液体发酵的研究

以啤酒洗槽废水为主料通过单因素优选和正交试验法对产朊圆酵母进行液体发酵培养基的筛选与发酵条件的确定，经方差分析结果最佳培养基为2^oBe糖度的啤酒洗槽废水，豆饼粉0.5%,葡萄糖2％，MgSOr.7H2O0.05%,KH2PO40.1%。最佳发酵条件为时间18h，温度28℃，转数150r/min，装量100mL/250mL三角瓶，pH5.0。干菌体系累量为20.12g/L。     

产朊假丝酵母种子液培养基的优化

采用单因素及正交实验,对产朊假丝酵母的培养基组成(麦汁、酵母浸出粉、尿素、无机盐)进行优化,结果表明:以麦汁浓度6.5°Bé,酵母浸出粉0.08%,尿素0.12%,K2HPO40.06%,CaCl20.025%为最佳培养基组成,在此条件下,酵母细胞数可达3.2×108.mL-1.     

产朊假丝酵母细胞壁33kD蛋白的酶学特性研究

培养产朊假丝酵母菌收获菌体,经裂解酶处理细胞壁,离心后得到上清粗酶液,粗酶液经DEAE－纤维素层析,Seplarose 4B凝胶过滤纯化,对33kD蛋白的酶学性质研究表明,反应最适pH为5．5,反应的最适 度为45度,热稳定性较差,50度温度下放置1h活力下降50％,主要水解β-糖苷键,具有较强的专一性,是一种典型的葡聚糖内切酶（对pNPG无作用）。     

产朊假丝酵母对铜离子的抗性与吸附能力

一定条件下，用含不同浓度ＣｕＳＯ４培养基培养产朊假丝酵母。实验结果，当ＣｕＳＯ４浓度高达１０ｍｍｏｌ／Ｌ时，菌体生长被完全抑制，产朊假丝酵母对铜离子有很强耐受力。     

产朊假丝酵母细胞和细胞壁对铜离子吸附能力观察

通过比较产朊假丝酵母细胞与分离纯化的细胞壁对铜离子吸附能力差异,探讨了细胞壁在酵母吸附重金属离子过程中的作用。结果表明,细胞壁吸附的铜离子量通常是细胞吸附量的50% 以上。说明细胞壁是酵母吸附重金属离子的主要部位。     

不同海拔金佛山方竹出笋及幼竹生长特性

【目的】探究海拔对金佛山方竹生长发育的影响,为金佛山方竹引种及高效培育技术提供参考。【方法】以贵州顶箐山和箐坝山的金佛山方竹林为研究对象,在试验林低、中低、中高、高海拔处分别布设样方,观测并比较笋期、幼竹高生长、成竹生长等指标。【结果】试验区金佛山方竹笋期为8月下旬至10月上旬,不同海拔处日出笋量的动态变化均呈典型的正态分布格局,出笋始发及结束时间、发笋高峰期均随海拔的增高而提前,但总出笋量差异较小;各海拔下幼竹高生长均符合“慢—快—慢”的“S”形曲线,Logistic回归方程模型能较好地拟合其生长节律,决定系数(R²)均达0.99以上。随着海拔的升高,幼竹高生长持续时间有所下降,但平均生长速率及最大生长速率总体呈上升趋势;成竹胸径和全高分别在中高和高海拔处最大,均在低海拔处最小,较高海拔处竹林生长优于较低海拔处。【结论】海拔对金佛山方竹的笋期及幼竹生长有明显影响,较高海拔处竹林出笋更早,生长状况更好。     

响应面法优化产朊假丝酵母的枇杷酒降酸工艺

采用响应面法优化产朊假丝酵母CU-6的枇杷酒降酸工艺,应用中心组合Box-Benhnken实验设计进行响应面分析,建立数学模型.结果表明:经优化后的产朊假丝酵母CU-6降酸最佳工艺参数SO2质量浓度为50mg·L-1,酒精度为7.8%,残糖质量浓度为4.3g·L-1,在苹果酸质量浓度为4.5g·L-1,接种量为1.5%,发酵温度为24℃,发酵周期为5d的条件下,枇杷酒的理论降酸量可达到1.82g·L-1.采用优化后的工艺枇杷酒的降酸量达到(1.80±0.02)g·L-1.     

预负荷系数对三油叶固定瓦滑动轴承性能影响的数值研究

根据有限长三油叶固定瓦滑动轴承的结构特点,通过编程对二维R eyno lds方程离散化数值求解,研究了滑动轴承预负荷系数这一关键结构参数对三油叶固定瓦滑动轴承的承载能力、偏位角、油膜刚度、油膜阻尼等性能参数的影响,得出了承载能力、偏位角、油膜刚度、油膜阻尼随预负荷系数变化而变化的一系列规律性的结论,表明预负荷系数对三油叶固定瓦滑动轴承的性能有重要影响。     

发酵青刺果种子的酚类物质组成及抗氧化活性分析

以青刺果种子为研究对象,利用4种不同丝状真菌(少孢根霉3152、米曲霉变种2083、米根霉40503、米根霉3005)分析发酵前后的总酚、总黄酮含量及抗氧化活性的变化.结果表明少孢根霉3152、米曲霉变种2083、米根霉40503这3种真菌发酵均可显著提高其总酚、总黄酮含量,其中米曲霉变种2083发酵48 h后效果最佳(总酚、总黄酮含量分别为750.74±11.33、833.70±3.77 mg/100 g种子干重).发酵前后其含量最高的酚类物质均为芦丁,由67.12±0.69μg/g增加至108.07±0.18μg/g.发酵能改善青刺果种子的抗氧化能力,其中少孢根霉3152发酵48 h清除DPPH·的效果最佳,米曲霉变种2083发酵48 h对ABTS+·的清除最强.发酵可以显著提高青刺果种子的总酚、总黄酮含量以及抗氧化活性,适合作为功能性食品的原料加以开发.