稀土掺杂无机纳米晶及其时间分辨荧光生物检测应用

时间分辨荧光生物标记作为一种灵敏的非放射性标记技术,在科研及医疗机构已获得广泛应用.传统的时间分辨荧光标记以稀土螯合物作为分子探针,存在着光化学稳定性差、长期生物毒性以及价格昂贵等缺点.稀土掺杂无机纳米晶因其优异的光化学与光物理性能,是目前普遍看好且有望成为替代稀土螯合物的新一代时间分辨纳米荧光探针.利用稀土纳米探针的...     

稀土螯合物探针及其在时间分辨荧光免疫分析中的应用

本文总结了近年来所用的稀土螯合物探针及其在时间分辨荧光免疫分析中的应用，着重介绍了稀土螯合物探针标记的原理和特点，评述了ＬＫＢ体系和ＣｙｂｅｒＦｌｕｏｒ体系的相对优缺点，展望了荧光免疫分析的发展趋势     

基于铕螯合物纳米粒子标记的时间分辨荧光免疫法检测嗜水气单胞菌

以铕螯合物荧光纳米粒子标记嗜水气单胞菌菌株B15兔抗IgG,得到纳米粒子-IgG复合物,建立了新的嗜水气单胞菌双抗夹心时间分辨荧光免疫检测(TRFIA)法.采用正交试验优化了兔抗IgG的包被时间和包被浓度,以及纳米粒子-IgG的免疫反应时间和稀释度.偶合了铕螯合物的纳米粒子发光强度大,光稳定性高,因此灵敏度被改善.方法...     

非标记铕配合物荧光免疫分析法研究: 测定血清中的金属硫蛋白

本文报告一种新型非同位素免疫分析法, 非标记稀土铕配合物荧光免疫分析。它仍以免疫反应为基础, 所不同的是无须制备标记物。较标记免疫分析法简便、快速、在所建立的方法中, 金属硫蛋白(MT)的量与Eu-β-二酮配合物的荧光强度成负相关。测定范围为0-1.3μg/mL, 测定血清中MT的回收率为95%-100%, 相对标准偏差<10%。     

稀土有机螯合物发光研究进展

总结了稀土有机螯合物结构与发光性能的关系：配体最低三重态能级与稀土离子激发态能级的匹配是中心稀土离子能否发光的主要因素;螯合物结构的平面性和刚性是中心离子发光效率高低的重要因素;适宜的第二配体的加入一般导致螯合物分子刚性和稳定性增高,因而有利于能量的传递,致使中心离子发光效率增高,但也不能忽视第二配体加入所引起光能的吸收和能量传递过程的竞争;配体的耐热,耐辐射性是配合物能否作为材料的必要因素,自行设计,合成了5类25种新的有机配体及其相应的二元,三元稀土螯合物,研究了这些螯合物的配位性质,发光性能,发光与结构关系及发光机制。提出并发展了稀土离子发光和电子振动光谱作为配合物和生物分子结构探针的两种新的方法。将稀土－β－二酮的发光螯合物与树脂制成荧光塑料;利用铕和铽螯合物的发光和免疫反应,检测了体液中生物活性物质的含量,证实以稀土离子替代放射性同位素作为标记物,有希望替代放射免疫分析方法,成为常规的临床检验方法,利用Tb^3 荧光检测了植物中生长激素的含量。     

雌二醇的水凝胶毛细管电泳免疫分析

雌二醇是雌性激素中最重要和作用最强的一种激素 .临床上 ,雌二醇的长期监测可用于研究与激素相关的致癌物作用机理、绝经期妇女的雌激素补充及不孕病人的跟踪治疗等方面 .研究发现 ,人体中雌二醇含量与某些肿瘤如乳腺癌、子宫癌和肝癌等密切相关 [1] .由于雌二醇在体液中含量很低 ,难于测定 .免疫分析法的出现给雌二醇的测定带来了变革 ,提高了测定的灵敏度和特异性 .目前测定雌二醇的免疫分析方法有放射免疫分析法 ( RIA) [2 ]、酶免疫分析法 ( EIA) [3～ 7]、荧光免疫分析法 ( FIA) [8]和化学发光与生物发光免疫分析法 [9,10 ] .但 R…     

稀土铕离子标记抗-乙型肝炎表面抗体

结合生命科学中生物活性物质的高灵敏度分析检测方法研究,组装了时间分辨激光荧光免疫分析装置;合成了稀土离子与蛋白质联接的双向螯合剂－二乙三胺五乙环酐（ＤＴＰＡＡ）;纯化了抗－乙型肝炎表面抗体;研究了Ｅｕ＾３－ＤＴＰＡＡ－抗－乙型肝炎表面抗体制备过程;确定了标记物制备的最佳条件;依据解离增强原理,采用时间分辩激光荧光光谱技术,对Ｅｕ（β－ＮＴＡ）３（ＴＯＰＯ）２螯合物的有关参数进行了测定。     

微流控芯片电泳免疫激光诱导荧光检测人血清中肿瘤标记物癌胚抗原CEA

癌胚抗原CEA被认为是结/直肠癌的特异性肿瘤标志物,临床已将CEA作为结肠、乳腺癌、胰腺癌、肺癌等肿瘤普查筛选的指标之一.目前,检测CEA的常用方法有放射免疫分析法~([1])、酶免疫分析法~([2])、时间分辨荧光免疫分析法~([3])和化学发光免疫分析法~([4])等.本研究以荧光标记二抗为示踪剂,建立了测定了人血清中肿瘤标记物CEA的微流控芯片电泳激光诱导荧光均相非竞争免疫分析新方法.     

Au纳米标记物增强电化学免疫分析大肠杆菌的研究

通过在Au纳米颗粒表面修饰辣根过氧化酶(HRP)标记的大肠杆菌抗体制备了一种新型的Au纳米标记物, 并将该纳米标记物应用于增强电化学免疫分析大肠杆菌. 经过酶联免疫反应后, Au纳米标记物、免疫磁性颗粒(IMB)和大肠杆菌形成了IMB/抗体-大肠杆菌-Au纳米标记物的三明治式免疫复合物. 以3,3,5,5-四甲基联苯二胺(TMB)溶液作为底物, 采用电化学与流动注射检测(FIA)相结合的技术测定HRP的活性. 检测到的电流大小与免疫复合物上HRP的量成正比, 从而与大肠杆菌的浓度成正比. Au纳米颗粒增加了HRP的负载量, 增强了电化学信号, 大大提高了大肠杆菌的检测灵敏度. 实验结果表明, 大肠杆菌浓度在 1.0×102～5.0×104 cfu•mL－1范围内与电流大小成线性相关, 最低检测限达50 cfu•mL－1, 若对大肠杆菌样品溶液进行预浓缩, 将得到更宽的检测范围和更低的检测限. 本方法总的分析时间比其他方法短, 在1 h内就能完成对大肠杆菌样品的快速检测.     

利用铕鳌和试剂建立超灵敏的胃蛋白酶原I时间分辨荧光免疫分析法

采用时间分辨荧光测量技术,以稀土离子为示踪材料,建立了PGI的时间分辨荧光免疫分析法(TR-FIA),该方法具有测量灵敏度高、操作简便、示踪物稳定、定量分析量程宽、无放射性污染和应用范围广等优点。研究用北京佳瑞生物技术公司提供的抗PGI单克隆抗体8003#和8016#,PEI参考标准。结果表明,方法的特异性PGII对PGI-TRFIA无交叉反应。精密度和回收率:本方法的批内和批间CV分别为1.9%和4.7%,精密度图显示可测范围为3.5~328 KU.L-1;回收率为102.65%。灵敏度和稳定性:以零剂量点发光值均值加2 s后的发光值在标准曲线上得到的相应值为0.2 KU.L-1。8条不同时间进行的PGI-TRFIA的效点均值ED20,ED50和ED80分别为(11.34±0.2)KU.L-1,(38.73±0.8)KU.L-1和(132.3±2.9)KU.L-1。