酵母中G-蛋白循环系统的数学建模和敏感性分析

1 引言 G-蛋白是高度保守在所有真核细胞内的重要信号转导分子,通常与受体分子结合负责把细胞外的信号精确无误地传递到细胞内,是细胞感知环境并产生或者切换相关反应的必不可少的分子开关．在动物细胞里,G-蛋白参与广泛的信号转导,如光、味觉、激素和生长因子等．G蛋白有两种构象:与GTP结合时的激活态和GDP结合时的失活态．通     

姜黄素抑制刺猬信号诱导小细胞肺癌细胞凋亡

目的：探讨姜黄素对小细胞肺癌NCI- H446细胞的作用及可能机制。方法不同浓度（5、10、15μmol/L）的姜黄素作用于小细胞肺癌NCI- H446细胞后,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot技术检测索尼克刺猬信号（Shh）、脑胶质瘤相关癌基因1（Gli1）的表达水平。结果不同浓度的姜黄素与小细胞肺癌NCI- H446细胞共培养后,浓度为15μmol/L的姜黄素能明显抑制NCI- H446细胞的增殖。与其余各组相比,差异有统计学意义（P＜0.01）。小细胞肺癌NCI- H446细胞经姜黄素处理后,姜黄素15μmol/L与其余各组比较,细胞凋亡率的差异有统计学意义（P＜0.01）。经姜黄素（15μmol/L）处理的NCI- H446细胞,Shh和Gli1表达均明显降低,与对照组相比,差异均有统计学意义（P＜0.01）。结论姜黄素能通过抑制刺猬信号通路,抑制小细胞肺癌细胞的增殖,诱导其凋亡。     

原花青素及其组合物对泡沫细胞形成的影响

目的观察原花青素及其与抗炎活性成分（积雪草苷、姜黄素、茶多酚）的组合物对氧化低密度脂蛋白（ox- LDL）刺激巨噬细胞形成泡沫细胞过程中炎症细胞因子和细胞内胆固醇含量的变化。方法以体外培养的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞为材料和ox- LDL刺激RAW264.7细胞24h形成泡沫细胞为模型,RT- PCR方法检测细胞因子IL-1β和TNF-αmRNA水平,试剂盒测定细胞内游离胆固醇和总胆固醇的含量。结果原花青素及其与积雪草苷、姜黄素、茶多酚组合物可明显降低泡沫细胞内的胆固醇酯与总胆固醇的比值,抑制泡沫细胞的形成,显著抑制泡沫细胞的IL-1β和TNF-αmRNA表达,其中原花青素与姜黄素的组合物作用最强。结论原花青素组合物通过降低细胞内胆固醇酯的含量,减轻细胞泡沫化程度和减轻细胞的炎症反应起到抗动脉粥样硬化的作用。     

藤黄酸诱导肺癌细胞H1975凋亡的机制研究

目的 研究藤黄酸（GA）诱导人肺癌细胞H1975凋亡的分子机制,探讨氧自由基（ROS）和JNK信号通路在GA杀伤 肺癌细胞中的作用。方法 以人肺癌细胞H1975为研究对象,MTT法测定GA抑制细胞增殖的作用,Annexin V/PI 双染法测定细胞凋亡率,DCFH-DA 法测定ROS 含量,JC-1探针染色分析线粒体膜电位（MMP）,Western blot检测JNK 信号通路的激活和线粒体凋亡途径相关蛋白表达的变化。结果 GA 呈剂量依赖性抑制H1975细胞的增殖,各实验组细胞存活率与空白对照组比较,均有统计学差异（P＜0.05 或0.01）。1、2.5 和5滋mol/L GA 作用24h 后,细胞凋亡率分别为25.2%、51.8%和75.1%,剪切型凋亡相关蛋白cleaved caspase-9、cleaved caspase-3 和cleaved PARP 的表达随GA 浓度增高而显著增加,与空白对照组比较,均有统计学差异（P＜0.05或0.01）。GA 作用2h 后H1975细胞ROS 含量显著升高,磷酸化JNK（p-JNK）表达上调（P＜0.05或0.01）。GA 作用16h后各实验组细胞MMP 均明显降低（均P＜0.05）。GA 作用24h后实验组细胞线粒体凋亡途径相关蛋白Bax、Bak、Bik表达增加,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达与空白对照组相比明显下降（P＜0.05 或0.01）。结论 GA 具有诱导H1975 细胞凋亡的作用,其可能机制是上调细胞内ROS含量,激活JNK 信号通路,进而引起MMP 降低和线粒体凋亡途径激活。     

细胞趋硬性迁移的研究进展

细胞力学微环境可以调控许多细胞生理功能.特别地,在细胞力学微环境各种信号梯度的作用下,细胞可以定向地迁移.这些定向迁移可以显著影响伤口愈合、癌细胞转移和组织形貌发育等生理过程.目前为止,细胞的定向迁移主要包括:在化学药物梯度作用下的趋药性迁移,在黏附分子梯度作用下的趋触性迁移,以及在细胞外基质硬度梯度作用下的趋硬性迁移等.虽然细胞趋药性和趋触性迁移的力学机理得到了很好的研究,但是关于细胞趋硬性迁移的机制和作用还不清楚.该文重点介绍了细胞趋硬性的相关实验和理论研究进展,分析了不同研究间的联系与区别,讨论了细胞趋硬性迁移的潜在力学机制,提出尚存在的问题和未来可能的研究方向.     

HIF-1α及 VEGF 在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的表达及意义

目的研究类风湿性关节炎（RA）患者滑膜细胞在体外常氧和缺氧培养条件下缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的差异性及意义。方法对RA患者及骨关节炎（OA）患者的关节滑膜细胞在体外常氧和缺氧条件下分别进行培养,根据培养条件分为常氧组、缺氧6h组及缺氧12h组;采用免疫印迹法分别检测各组成纤维样滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达情况。结果与常氧组相比,缺氧6h及12h的RA和OA患者滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均显著增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。同时RA和OA患者缺氧12h组滑膜细胞HIF-1α及VEGF的表达高于缺氧6h组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。RA和OA患者3组滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均呈正相关（均P＜0.05）。常氧组RA与OA患者滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均无统计学差异（均P＞0.05）;而缺氧6h和12h组中RA滑膜细胞HIF-1α及VEGF的表达均高于OA滑膜细胞,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论在缺氧条件下RA患者滑膜细胞HIF-1α及VEGF表达显著升高且密切相关,可能缺氧-HIF-1α-VEGF这一信号途径在RA的发生、发展中起着重要作用。     

考虑细胞外基质黏弹性行为的细胞黏附力学模型

细胞外基质由大量胶原蛋白和纤维蛋白组成,这些基质蛋白形成复杂的交联网络状结构,具有黏弹性力学特性.研究表明,黏弹性基质能显著影响细胞迁移、增殖和分化等生理行为,还能影响癌症转移和组织纤维化等疾病的发生与发展.然而,细胞感知细胞外基质黏弹性力学特性的分子机制仍不清楚.该文通过建立细胞黏附力学模型,从分子层次揭示细胞黏附在细胞响应外界黏弹性力学微环境中的作用.结果表明,细胞能通过调控细胞黏附动力学（包括黏附周期和黏附形成时间）响应细胞外基质的黏弹性力学特性.通过将模型计算结果与实验现象相比较,验证了模型的正确性.细胞黏附力学模型将为组织工程中细胞力学微环境的构建奠定理论基础.     

雷帕霉素对基质细胞衍生因子-1α诱导的内皮生长晕细胞增殖及黏附能力的影响

目的探讨雷帕霉素对基质细胞衍生因子-1α（SDF-1α）诱导的内皮生长晕细胞（EOCs）增殖及黏附能力的影响。方法使用密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,培养并扩增EOCs,然后用免疫组化法、荧光染色法鉴定其内皮细胞特性。分为空白对照组、10ng/ml SDF-1α处理组、10ng/ml SDF-1α及10ng/ml雷帕霉素共同干预组、10ng/ml雷帕霉素处理组,各处理组与EOCs作用24h,CCK8检测细胞增殖能力,并在倒置显微镜下检测细胞的黏附能力。结果采用贴壁法培养的EOCs具有多种内皮细胞特性。10ng/ml的SDF-1α能显著提高EOCs的增殖及黏附能力（P＜0.05）,而10 ng/ml的雷帕霉素能阻断SDF-1α对EOCs增殖、黏附能力的促进作用（P＜0.05）。结论雷帕霉素可抑制SDF-1α诱导的EOCs增殖及黏附。     

当归提取液对HaCaT细胞凋亡的影响及其机制

目的研究当归提取液在体外诱导人角质形成细胞株HaCaT细胞凋亡的作用及其可能的机制.方法采用MTT法检测不同浓度当归提取液对HaCaT细胞增殖的影响,流式细胞仪FITC-Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡情况,分光光度法检测细胞内半胱天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)活性的改变情况.结果浓度≥10mg/ml的当归提取液处理后HaCaT细胞增殖受到抑制,早期凋亡率显著增高(均P<0.01),细胞内Caspase-9活性明显增加(P<0.05),均呈浓度依赖性.结论在一定浓度范围内,当归提取液可抑制诱导HaCaT细胞凋亡,Caspase-9活性增加可能是其诱导凋亡的机制之一.     

角蛋白17在皮肤科中的研究进展

表皮角质形成细胞占整个表皮结构组成的85%以上,角蛋白是表皮及毛发角质形成细胞内的主要结构蛋白,是角质形成细胞和其他上皮细胞的标志性成份,角蛋白17（K17）属于其中一种。K17是角质形成细胞增殖分化的标志性分子,可能与银屑病等疾病有关。近年来, K17在皮肤科疾病中的表达研究也逐渐增多,笔者就其在皮肤科中的研究进展作一综述。     

转化生长因子-β1诱导小鼠足细胞凋亡实验研究

目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）是否能诱导小鼠足细胞株凋亡以及诱导凋亡的途径。方法（1）体外培养小鼠足细胞株;（2）应用不同浓度（10^-1～104ng／L）TGF-β1诱导小鼠足细胞凋亡;（3）10^3ng／LTGF-β1诱导不同时间（12、24、48h）后观察足细胞凋亡情况;（4）采用流式细胞仪检测AnnexinV、Caspase3;（5）实时定量PCR及Western印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、Smad2、Smad3、Smad7mRNA及蛋白质的表达情况。结果（1）小鼠足细胞在不同浓度（10^-1～10^4ng／L）TGF-β1刺激下,细胞凋亡率明显高于正常对照组（均P〈0.05）;（2）随着TGF-β1浓度增加、凋亡时间增加,足细胞凋亡率增高（P〈0．05）;p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7mRNA表达增加;TGF-β1 103ng／L为最佳诱导小鼠足细胞凋亡浓度,24h为最佳诱导凋亡时间;（3）与正常对照组比较,10^3ng／LTGF-β1诱导后Caspase3阳性细胞比率显著增加（P〈001）．p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7蛋白质表达亦显著增加（P〈0．01）。结论TGF-β1能诱导小鼠足细胞凋亡,呈浓度及时间依赖性。TGF-β1通过Smad通路、p38MAPK通路以及线粒体通路诱导小鼠足细胞凋亡。     

初发系统性红斑狼疮患者调节性T细胞和Th17细胞的检测及意义

目的：观察初发系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血调节性T细胞（Treg）和Th17细胞的变化,探讨其临床意义。方法检测15例初发SLE患者（活动组11例,非活动组5例）及10例健康对照者（对照组）的外周血CD4＋CD25highTreg、Th17细胞占CD4＋的比例,分析两种细胞的比率与疾病活动指数（SLEDAI）的相关性。结果初发SLE患者外周血CD4＋CD25highTreg和Th17细胞的比例与对照组相比,差异无统计学意义（P＞0.05）,与SLEDAI无相关性（均P＞0.05）。CD4＋CD25highT细胞与Th17细胞的比率在活动组患者下降尤为明显（P＜0.05）,且与SLEDAI呈明显的负相关（P＜0.05）。结论初发的活动性SLE患者外周血Treg与Th17细胞的比率明显下降,并与疾病活动密切相关,两群细胞的失衡可能在SLE发病机制中起重要的作用。     

MicroRNA-143对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭和迁移的影响

目的探讨microRNA-143（miR-143）对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭、迁移和增殖的影响。方法在脂质体介导下将miR-143抑制剂（miR-143 inhibitors）转染入MCF-7细胞，以inhibitor negative control（inhibitor NC）作为阴性对照。通过MTS试剂盒检测细胞增殖能力，以Transwel 侵袭实验和迁移实验分别检测细胞侵袭能力和迁移能力。结果（1）miR-143 inhibitors组与inhibitor NC组间细胞增殖活性无明显差异（P＞0.05）；（2）Transwel 侵袭及迁移实验显示转染miR-143 inhibitors后，MCF-7细胞的侵袭及迁移能力均明显增强（P＜0.05）。结论 miR-143对人乳腺癌MCF-7细胞的侵袭及迁移能力存在负性调控作用，可能成为乳腺癌治疗的潜在靶点。     

系统性红斑狼疮患者树突状细胞对Th1/Th2细胞分化的影响

目的探讨系统性红斑狼狼疮（SLE）患者树突状细胞对Th1/Th2细胞亚群分化的影响。方法淋巴细胞分离液分离获得SLE患者外周血单个核细胞,免疫磁珠阳性分选CD14细胞,联合应用rhGM- CSF、rhIL-4和rhTNF-α诱导分化树突状细胞成熟。在培养的第9天,流式细胞术检测表型,细胞增殖/毒性剂盒分析树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。ELISA法检测培养上清液中IL-12和IL-10的表达。诱导的成熟树突状细胞与健康对照组淋巴细胞共培养5d后,佛波酯+离子霉素+莫能霉素刺激培养4h,进行T淋巴细胞表面抗原及胞质内细胞因子染色,流式细胞仪检测Th1、Th2的比例。结果 SLE患者诱导培养的树突状细胞其CD1a的表达降低（P＜0.05）,HLA- DR、CD80、CD86的表达均明显升高（P＜0.05）。活动组与非活动组的树突状细胞HLA- DR、CD80、CD86的表达有统计学差异（P＜0.05）。SLE患者诱导培养的树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞增殖能力增强（P＜0.05）。活动组与非活动组的树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞也有所差异（P＜0.05）。SLE患者诱导培养的树突状细胞分泌IL-12的水平均明显降低（P＜0.05）;分泌IL-10的水平明显升高（P＜0.01）,活动组与非活动组的树突状细胞分泌IL-12和IL-10的水平差异无统计学意义（P＞0.05）。活动组的树突状细胞与对照组淋巴细胞共培养后Th1的比例明显降低（P＜0.01）,Th2的比例差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 SLE患者诱导的树突状细胞表型增加,刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力增强,分泌IL-12降低,IL-10升高。SLE患者树突状细胞功能的异常可能导致了Th1细胞分化不足,在SLE发生、发展过程中起重要作用。     

宏观经济监测预警系统(Ⅳ)

§4　　预警信号系统 本讲座开始时即已提及,对于宏观经济运行的动态进行预警,是对经济运行中不正常状态进行及时调控,使经济运行正常发展的重要手段.而预警信号系统是实现此一目的的工具.建立一个科学合理的宏观经济预警系统的基本步骤如下: (1)选取预警指标 (2)确定预警界限 (3)输出预警信号 (4)预警信号分析 本节将按以上次序介绍各步的内容. §4.1预警信号的选取 建立预警信号系统最重要的任务是选择一组反映经济发展状态的敏感性指标来建立预警指标体系.预警指标应能在不同方面反映国民经济的发展规模、发展水平和发展速度,入选的预警…     

幼儿颊黏膜脱落细胞钙离子含量与龋病活跃性检测结果的关系

目的探讨幼儿颊粘膜脱落细胞钙离子含量与幼儿患龋状况以及幼儿龋病活跃性检测结果的关系。方法将50例3～5岁幼儿根据龋蚀指数分为两组：龋病高危组26例、无龋组24例。采用Dentocult SM、Dentocult LB、Cariostat、SCAT 4种方法对幼儿进行龋病活跃性检测。取幼儿颊黏膜脱落细胞,Fluo-3染色,用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+的荧光强度值,统计分析其与龋病活跃性的关系。结果高危组幼儿Ca2+荧光强度低于无龋组（P＜0.01）;高危组幼儿颊黏膜内Ca2+的荧光强度与dft、CSI均呈直线负相关关系（均P＜0.01）;3岁组Ca2+荧光强度高于5岁组（P＜0.05）;Ca2+荧光强度分别与Dentocult SM、Dentocult LB及SCAT结果呈等级负相关关系（P＜0.05或0.01）。结论3~5岁幼儿颊黏膜钙离子荧光强度与患龋状况具有一定的相关性,龋坏程度重则细胞内钙离子荧光强度低。幼儿颊黏膜细胞内钙离子的荧光强度可作为筛选龋病易感儿童的一项参考指标。     

早期自然流产患者绒毛滋养细胞中CXCL14的表达及其临床意义

目的研究正常早孕妇女和早期自然流产妇女之间绒毛滋养细胞中CXCL14的表达情况，探讨其表达的临床意义。方法选取33例正常早孕妇女绒毛组织和37例早期自然流产妇女绒毛组织，HE染色后光镜下观察两组绒毛组织的形态学变化；采用免疫组化SP三步法检测两组绒毛滋养细胞中CXCL14的表达。结果HE染色下两组绒毛滋养细胞形态对比，见早期自然流产组绒毛组织滋养细胞层变薄、滋养细胞变性甚至坏死、滋养细胞嗜酸性增强、绒毛间质水肿坏死；免疫组化示正常早孕组绒毛滋养细胞CXCL14的表达量为0.07±0.05，自然流产组绒毛滋养细胞CXCL14的表达量为0.12±0.02，两组比较差异具有统计学意义（P＜0.01）；首次流产组CXCL14表达量0.116±0.067，多次流产组CXCL14表达量0.086±0.127，两组比较差异无统计学意义（P＞0.01）。结论早期自然流产绒毛滋养细胞中CXCL14表达升高，可能在自然流产的发生中起着重要作用。     

耦合混沌Hindmarsh-Rose神经元系统中相互作用诱导的周期解研究

神经元细胞作为构成神经系统结构和功能的基本单位,在神经信号传输过程中具有非常重要的作用.采用Hindmarsh-Rose神经元模型,探究与细胞中钙离子浓度有关的一个恢复变量参数在神经元信号传递中的影响.研究表明,当改变恢复变量参数值时,单个神经元会出现周期或混沌的放电行为,并且对该参数值变化比较敏感.此外,当单个神经元为混沌放电时,随着相互作用强度的变化,耦合神经元系统不仅会出现混沌放电行为,还会产生周期放电行为,周期解窗口和混沌解窗口交替出现.当恢复变量参数值不同时,周期解窗口的个数和周期解的性质明显不同.该结论表明,该恢复变量参数在调控神经元混沌放电和周期放电行为过程中扮演着非常重要的角色.     

血清反应因子在心血管疾病中的作用

血清反应因子（serum response factor,SRF）属于MADS转录因子家族的成员之一,是高度保守且广泛表达的转录因子。SRF在成年或发育期的心肌组织中均有表达,主要与下游靶基因启动子上特定DNA序列CArG盒[血清反应元件（SRE）的组成部分,CC（A/T）6GG box]结合,调控抗凋亡或促细胞增殖等基因（如IEGs：c-fos、mcl-1、Egr-1）的表达,对外界因素（如：缺血、缺氧等）刺激表现出快速的基因响应,影响心肌细胞的发育、分化、增殖及凋亡[1-2]。许多辅助转录调节因子蛋白（co-activator/co-repressor,如TCF家族成员Elk-1和MRTFs家族等）与SRF/SRE发生相互作用,激活与心肌分化、增殖及凋亡相关基因的转录。因此,对SRF-CArG box依赖基因转录的调控,是影响心肌凋亡/生存的关键因素之一[3]。另外,研究表明skeletal a-actin、b-MHC、car原diac a-actin、MLC-2v、dystrophin等收缩类蛋白[4-6]及非收缩类蛋白,诸如参与心脏功能的ANF、肌质网Ca-ATPase（SERCA2）、Na+/Ca2+交换离子通道 NCX1[7-8]均为SRF依赖的基因。由此可见,SRF在调控收缩蛋白基因和收缩功能器官的重要作用充分说明SRF在心脏功能中发挥着重要的调控作用。     

胸腺细胞发育非线性模型的稳定性分析

T细胞同祖细胞在骨髓中的发育一样在胸腺中分裂、分化、并最终发育成为成熟的T细胞.研究人员通过建立一类描述T细胞增殖、分化、死亡的微分方程模型来估计胸腺细胞总量及各种未成熟或成熟细胞所占的比例.本文在利用准静态近似法的基础之上,采用微分方程稳定性理论中的有关方法对这类微分方程模型的稳定性等问题进行了完整的理论分析,所获得的其平衡位置为全局渐近稳定的结论为有关文献中采用数值模拟所预测的结论的正确性提供了理论依据.