荧光猝灭法研究氟比洛芬与DNA相互作用

采用荧光光谱法和紫外光谱法, 在生理条件下(pH=7.40)对氟比洛芬(FP)与脱氧核糖核酸(DNA)的作用方式进行了研究.证实了氟比洛芬通过沟槽结合方式与DNA发生相互作用.实验表明, DNA与氟比洛芬的相互作用为静态猝灭过程,测得结合常数为5.53×10~5 L·mol~(-1),结合位点数为1.12.     

荧光光谱法研究间硝基苯胺与牛血清白蛋白的相互作用

应用荧光光谱法研究间硝基苯胺与牛血清白蛋白的相互作用。激发波长为280nm,发射波长为342nm,在pH 7.50的Tris-盐酸缓冲溶液中反应150min后,间硝基苯胺对牛血清白蛋白的猝灭效果最为明显。289K,304K和318K下的结合常数分别为1.667×104,1.428×104,1.250×104L·mol-1。根据分子间的相互作用力与相关热力学参数间的相互关系,结合间硝基苯胺与牛血清白蛋白相互作用的焓变(ΔH)0和熵变(ΔS)0,可推断两者的相互作用力主要为静电作用力。结果表明:间硝基苯胺对牛血清白蛋白的荧光猝灭方式为静态猝灭,最后用紫外吸收光谱法对其作用机理进行了确认。     

自猝灭荧光探针法测定DNA

随着现代分子生物学和分子生物技术的发展，体内重要的遗传物质──脱氧核糖核酸（DNA）越来越引起人们的重视，对于DNA探针的研究也日渐深入．DNA探针作为研究DNA的有力工具，在90年代取得了长足的进展，新的靶扩增技术（PCR）已日臻完善，发光标记探针也已经与放射性同位素标记具有同等重要的地位，而且已应用于DNA杂交研究、疾病诊断和食品微生物检测等方面[1~5]．但是，研究开发新的、灵敏度高的DNA探针仍然是十分迫切和有意义的工作．本文报道了一种新的基于水杨酸、邻氨基苯甲酸荧光自碎灭的DNA探针技术，这对筛选灵敏度高…     

金纳米微粒与藏红T相互作用的吸收、荧光和共振Rayleigh散射光谱特征

用共振Rayleigh散射(RRS)光谱并结合吸收光谱和荧光光谱研究了金纳米微粒与藏红T(ST)的相互作用. 在pH 5左右的柠檬酸盐介质中, 柠檬酸根(H₂L)^2−自组装于带正电荷的金纳米微粒表面, 形成[(Au)_n(H₂L)_m]^x−复合物. 此时(H₂L)^2−的一个羧基氧原子向内结合于金纳米微粒表面, 另一个羧基氧原子向外形成带x个负电荷的超分子复合阴离子, 此时它再与藏红T阳离子借静电引力、疏水作用力和电荷转移作用形成新的结合产物. 这里(H₂L)^2−起了“桥”的作用. 讨论了结合产物在引起吸收光谱红移, 金纳米微粒等离子体吸收带降低和荧光猝灭的同时, 将导致RRS的急剧增强并出现新的RRS光谱. 研究了金纳米微粒与藏红T相互作用对RRS、吸收光谱和荧光光谱的影响, 结合产物引起RRS增强的原因, 并结合量子化学方法对于反应机理进行了探讨, 认为RRS光谱不仅可对纳米微粒及其反应产物的研究提供新的信息并且也可作为表征和检测纳米微粒的一种灵敏手段.     

荧光法研究牛血清白蛋白与中性红的相互作用

用荧光光谱、同步荧光光谱、三维荧光光谱和吸收光谱研究了牛血清白蛋白与中性红的结合反应特征,用Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数函数方程等处理实验数据,得到了15℃时动态猝灭常数kq=5.434×1012L.mol-1.s-1;静态猝灭结合常数KLB=3.300×104L.mol-1,结合位点数n=1.18,根据F ster能量转移原理计算出中性红在牛血清白蛋白上的结合距离r=2.63 nm。     

CdTe量子点荧光猝灭法测定对硝基苯胺的含量

以CdTe量子点作为荧光探针,基于荧光猝灭法对对硝基苯胺进行了定量检测,考察了缓冲溶液体系、量子点浓度、反应时间等多种因素的影响.实验结果表明,在pH7.7的0.2 mol/L Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液中,反应时间为10 min,对硝基苯胺浓度为1.2×10-6～2.0×10-5 mol/L范围时,其线性回...     

番红花红T与表面活性剂的作用及其在标记DNA中的应用

对阳离子染料番红花红Ｔ（ＳＴ）在阴离子表面活性剂存在时的溶液状态的吸收光谱和荧光光谱进行了研究。结果表明，低浓度阴离子表面活性剂与ＳＴ形成缔合物，导致ＳＴ的吸收与荧光强度降低；增大表面活性剂的浓度，其分子胶束前预聚集促使染料形成非荧光二聚体，导致荧光急剧猝灭，吸收光谱出现新的特征吸收峰；当表面活性剂浓度大于临界胶束浓度（ＣＭＣ）时，染料二聚体离解，ＳＴ单体增溶于胶团中形成新的高量子产率荧光体。本文     

水溶性金属席夫碱与DNA相互作用的荧光光谱

研究了几种水溶性的金属席夫碱与 DNA相互作用的光谱性质。在所研究的金属中 Mn的络合物与 DNA的相互作用最强,荧光强度改变最大且其激发和发射峰均有微小紫移。其紫外可见光谱亦有明显的减色效应和微紫移。 KI猝灭和 Mn席夫碱与溴化 3, 8 _ 二氨基 _ 5 _ 乙基 _ 6 _ 苯基菲啶的竞争实验证实了 Mn席夫碱与 DNA之间的作用方式是嵌入方式。同时也考察了 pH值、温度对 Mn席夫碱及 Mn席夫碱－ DNA体系荧光强度影响。 Mn席夫碱仅与 DNA的一部分键位发生作用, Mn席夫碱相对荧光强度与加入的小牛胸腺 DNA的浓度,在 3× 10－ 6～ 2× 10－ 4 mol/L范围内呈线性关系。水溶性 Mn席夫碱可以作为一种新型荧光探针用于微量 DNA的检测。     

荧光光谱研究喹诺酮抗菌素与过氧化氢酶的相互作用

应用荧光光谱法研究了水溶液中喹诺酮抗菌素氧氟沙星、环丙沙星与过氧化氢酶分子间的结合反应。结果表明：药物对过氧化物酶的内源荧光有较强的猝灭作用,形成复合物所产生的静态猝灭是引起过氧化氢酶荧光猝灭的主要原因。进一步依据荧光猝灭结果确定了药物－酶复合物的形成常数和结合位点数。     

荧光红-曙红Y能量转移及荧光猝灭法测定痕量铜(Ⅱ)的研究

在λex／λem=404．7／550nm,乳化剂OP存在下,荧光红-曙红Y能够发生有效能量转移,使曙红Y荧光强度大大提高;在pH6．5～7．6的KH2PO4-NaOH缓冲溶液中,Cu(Ⅱ)与曙红Y和邻菲罗啉形成配合物,使曙红Y的荧光猝灭,从而建立了测定痕量铜的荧光分析新方法。铜含量在0～250μg／L范围内与曙红Y的荧光猝灭程度呈良好的线性关系。方法的检出限为0．82μg／L;测定100μg／L铜溶液,其RSD为4．6％(n=11);样品加标回收率为102．1％～105％。本法用于人发、茶叶和大米中痕量铜的测定,结果满意。     

番红花红聚合膜修饰电极对鸟嘌呤的测定及应用研究

研究了鸟嘌呤(G)在番红花红聚合膜修饰的玻碳电极上的电化学行为,发现SFR聚合膜电极对G的氧化能够起到明显的电催化作用。利用差分脉冲法研究了G在磷酸盐缓冲溶液中的线性关系,发现其浓度分别在6.0×10-7～1.0×10-5mol/L、2.0×10-5～7.0×10-5mol/L范围内与峰电流呈良好的线性关系。该电极用于实际样品的测定,回收率在97.1%～102%之间。     

含芘荧光化学敏感器化合物同小牛胸腺DNA分子间的相互作用

研究了含芘荧光化学敏感器分子被ctDNA猝灭的荧光光谱.ctDNA分子对该化学敏感器中芘的激发单体,激基缔合物都有猝灭作用.对激发单体的猝灭速度顺序为;化合物(2)>化合物(1)>芘丁酸>化合物(3);对激基缔合物的猝灭速度顺序为;化合物(2)化合物(3).由得到的荧光猝灭数据,可按公式(2)求得荧光化学敏感器分子与ctDNA分子相互作用的稳定常数.发现化合物(2)与ctDNA分子间有着最强的相互作用能力.按ctDNA和含芘荧光化学敏感器的分子结构、构型以及分子内原子-原子的间距等提出了ctDNA分子与该荧光化学敏感器的作用模型,并对上述结果进行了初步解释.     

Triplet state interaction of Safranine T with inorganic cations in different solvents

The triplet-triplet absorbance of Safranine T (3,7-Diamino-2,8-dimethyl-5-phenylphenaznium chloride) has been studied in a series of polar and non-polar solvents. When non-aqueous solvents are gradually added to the aqueous solution of Safranine T (ST) the lifetime of the triplet state decreases. It has been established that the dye forms weak complex with the solvent molecules. The quenching of triplet state of ST by Fe²⁺, Co²⁺ and Mn²⁺ has been studied in different solvents. The double protonated long-lived triplet species of ST; absorbs at 580 nm. The decay of the triplets follows first order kinetics. The quencher generates reduced semidye from ³ST by electron transfer mechanism. The reduction of ³ST by Mn²⁺ and Fe²⁺ is thermodynamically allowed but electron transfer from Co²⁺ to ST is endoergic. The mechanism of quenching by Co²⁺ can be explained as compensation by charge transfer mechanism between ³ST and Co²⁺.     

聚乙烯醇增敏藏红T为探针的共振瑞利散射法测定阴离子表面活性剂

在pH=4.0的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲体系中,藏红T(ST)与十二烷基苯磺酸钠(SDBS)通过静电引力和疏水作用结合形成离子缔合物,再进一步与聚乙烯醇(PVA)形成三元复合物后,可使体系的共振瑞利散射强度显著提高,其最大散射强度位于340nm处。SDBS含量在0.15~5.0μg/mL范围内与共振瑞利散射强度增强值ΔI呈良好线性关系(R2=0.9969),检出限为8.6ng/mL,据此建立一种定量分析阴离子表面活性剂的共振瑞利散射新方法。探讨了影响因素和最佳实验条件,并将建立的方法应用于环境水样中阴离子表面活性剂的检测。该方法测得结果与国家标准方法相比较无显著性差异。     

钙黄绿素-藏红T与DNA作用机理的光谱研究

应用能量转移方法和光谱技术，研究了钙黄绿素-藏红T荧光能量转移体系与ctDNA的作用机理以及抑制作用的影响因素．在pH8．0和低离子强度条件下，ctDNA与Caleein-ST发生了静电电荷作用，降低了钙黄绿素-藏红T荧光体系的能量转移效率，对荧光体系的能量转移产生了明显的抑制作用．     

萘普生和酵母DNA相互作用的荧光光谱研究

使用紫外和荧光光谱法研究了萘普生和酵母DNA之间的相互作用。酵母DNA对萘普生的荧光存在强烈的猝灭作用，其作用方式随DNA浓度的变化而发生转变。用Stern-Volmer方程与Scatchard方程两种方法得到相同结果：在较低的DNA浓度下，萘普生与DNA间的作用较弱，而在较高DNA浓度时，萘普生与DNA的作用较强，键合位点数也随着酵母DNA浓度的升高而在临界酵母DNA浓度100 mmol/L附近出现转变。紫外光谱、离子强度的影响和I^-猝灭等研究表明，DNA浓度的变化并不改变两者间的作用方式，它们之间始终是一种沟槽作用模式。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定食品中碱性橙、碱性嫩黄O和碱性桃红T

本文建立了同时测定食品中碱性橙、碱性嫩黄O和碱性桃红的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法.样品经碱化甲醇提取、二氯甲烷萃取、浓缩、酸化甲醇溶解和甲醇饱和正己烷溶液萃取净化后进行测定.本方法检出限分别为碱性橙0.6 μg/kg、碱性嫩黄O 0.3 μg/kg、碱性桃红T 0.7 μg/kg.六种食品样品的回收率为72.1%～91.1%,相对标准偏差(RSD)为2.4%～9.1%(n=6),三种染料在0.01～0.5 μg/mL范围内呈良好的线性关系,线性回归系数r均大于0.9950.