蛹虫草及其培养残基中腺苷和虫草素含量的快速测定

建立了以氰基正相色谱柱反相条件下快速分析腺苷和虫草素的方法。以微波辅助提取蛹虫草及其培养残基样品,每次提取1.5 min,共提取2次。采用Eclipse XDB-CN色谱柱测定提取液中腺苷和虫草素的含量,以甲醇-水(7:93, v/v)为流动相进行等度洗脱,检测波长260 nm,并考察和分析了影响分离性能的流动相组成和pH值。结果腺苷和虫草素在4.5 min内实现完全分离且无基质干扰。腺苷和虫草素在线性范围内线性关系良好,线性相关系数r2分别为0.9998和0.9995,定量限(以10倍信噪比计)分别为0.21 mg/L(腺苷)和0.083 mg/L(虫草素)。该方法日内和日间精密度的相对标准偏差(RSD)小于2%;腺苷和虫草素的平均加标回收率为93.8%～102.9%, RSD值不大于3.62%(n=5)。本方法简便、快速、准确、成本低,可用于冬虫夏草、蛹虫草子实体、虫草培养残基及虫草制剂中腺苷和虫草素含量的快速测定。     

高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷和虫草素

在蛹虫草中腺苷和虫草素含量的反相高效液相色谱分析中,所用色谱柱为WatersNOVA-PAK C18(3.9 mm×300 mm,4μm),流动相为0.01 mol.L-1KH2PO4-K2HPO4缓冲溶液(pH 6.86)+1%(体积分数)四氢呋喃,流速为1.0 mL.min-1。紫外检测的波长为260 nm,峰面积与腺苷浓度和虫草素浓度之间的线性范围依次为1.27~50.5 mg.L-1和3.23~129.0 mg.L-1,其检出限依次为0.18 ng和0.25 ng。在腺苷及虫草素的浓度水平依次为5.05 mg.L-1和12.9 mg.L-1时测试方法的精密度,求算得RSD(n=7)值依次为0.094%和0.792%。用标准加入法试验方法的回收率,求得两者的平均回收率依次为103.2%和98.5%。     

毛细管区带电泳检测九州虫草核苷类成分

1　引　　言核苷是参与遗传信息储存、传递与表达的核酸“构件”分子 ,亦是生物氧化、能量代谢中的能源物质和抗病毒、抗肿瘤药物的中间体。虫草素和腺苷作为虫草属重要的核苷活性成分 ,具有显著的药理作用。高效毛细管电泳应用于中药活性组分的分离、鉴定具有极大的优越性 ,是中药现代化的有益探索。本文采用毛细管区带电泳检测虫草素 ,首次报道了九州虫草 (Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｋｙｕｓｈｕｅｎｓｉｓ)子座中虫草素的存在 ,测定了虫草素、腺苷的含量 ,并初步确定了部分核苷及相关碱基的特征峰。2　实验部分2 .1　仪器与试剂　Ｐ ＡＣＥＴＭ…     

Determination of Chlormequat and Mepiquat Residues in Seeding Cultivation Using Accelerated Solvent Extraction- Solid-phase Extraction/Ultraperformance Liquid Chromatography- Tandem Mass Spectrometry

研究建立了一种加速溶剂萃取-固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱法(SPE - UPLC - MS/MS)测定育苗基质中矮壮素和助状素的分析方法.样品采用快速溶剂萃取仪( ASE)提取,经CBA弱阳离子交换柱净化后,在亲水作用色谱柱上用SeQuant ZLC- HILIC MEKCK色谱柱进行分离;电喷雾正离子(ESI+)模式电离,多反应监测(MRM)模式检测.矮壮素和助状素的质量浓度在0.2～ 10 μg/kg范围内线性关系良好(r2＞0.999),在2、5、10 μg/kg加标水平的平均回收率分别为77％～ 106％和97％ ～111％,相对标准偏差(RSD)分别为7.3％ ～ 21.7％和5.6％～1 6.1％,检出限(LOD)均为0.02 μg/kg,定量下限(LOQ)均为0.1 μg/kg.该方法简便、快速、灵敏、准确,适合育苗基质中矮壮素和助状素残留的确证和定量测定.     

La(NO3)3对蛹虫草活性物质含量的影响EI北大核心CSCD

蛹虫草是一种著名的药用和食用真菌,研究者们常在培养基中添加亚硒酸钠、Fe SO4等无机物来提高蛹虫草活性物质的含量。本文采用高效液相色谱法和紫外分光光度法测定了La(NO3)3处理后蛹虫草活性物质的含量,探究La(NO3)3对蛹虫草活性物质含量的影响。结果表明,在实验浓度范围内,10,50和200 mg·L-1这3个浓度对蛹虫草的活性物质含量影响较大。La(NO3)3浓度为10 mg·L-1时,对喷司他丁、虫草酸和多糖合成具有促进作用,其含量分别为空白组的6.2倍、2.4倍和1.3倍,La(NO3)3对蛹虫草的腺苷和N6-2-羟乙基腺苷合成具有抑制作用,其含量仅为空白组的24.29%和16.87%。La(NO3)3浓度为50 mg·L-1时,对虫草素合成具有显著促进作用,其含量为空白组的8.2倍,La(NO3)3对多糖合成具有抑制作用,其含量仅为空白组的73.14%。La(NO3)3浓度为200 mg·L-1时,对腺苷和N6-2-羟乙基腺苷合成具有促进作用,其含量分别为空白组的1.5倍和2.6倍。La(NO3)3对麦角甾醇和蛋白质的含量未产生显著影响(P>0.05)。     

毛细管电泳高频电导法测定虫草中的有效成份

建立了毛细管电泳高频电导法同时测定腺苷和虫草素的方法。实验对电泳介质的种类、浓度以及操作电压和进样时间等因素进行了优化,在4mmol／L乳酸＋10％异丙醇＋80μg／mL羟甲基纤维素钠（pH=4．0）,分离电压20．OkV的条下测定了天然虫草和人工虫草菌丝制品中的腺苷和虫草素的含量,线性范围分别为2．0μg／mL～120μg／mL和3．0μg／mL～110μg／mL,检出限分别为0．5μg／mL和1．0μg／mL。     

高效液相色谱法测定地顶孢霉培养物中的腺苷

建立测定虫草源饲料添加剂地顶孢霉培养物中腺苷含量的高效液相色谱方法。样品经过研碎、超声处理,离心、过滤后上机测定。腺苷的最佳提取条件:以超纯水为浸提液,用超声波浸提,浸提温度为40℃,浸提时间为55 min。使用Waters Spherisorb ODS2柱(150 mm×3.9 mm,5μm),以甲醇-0.01 mol/L磷酸二氢钾混合液(10∶90)为流动相,流量为1.0 mL/min,进样体积为20μL,检测波长为254 nm。腺苷的质量浓度在0.5~100μg/mL范围内与色谱峰面积成良好的线性关系,相关系数为0.9990。样品测定结果的相对标准偏差为1.65%(n=6),3水平加标的平均回收率为98.19%。该方法简便、快捷,可准确测定虫草饲料添加剂地顶孢霉培养物中腺苷的含量。     

多孔石墨化碳柱分析强极性化合物三七素

建立了强极性的非蛋白氨基酸三七素在石墨化碳色谱柱上的反相高效液相色谱分析方法。以Thermo Hypercarb石墨化碳柱(100 mm×4.6 mm,5 μm)为分离柱,以0.05 mol/L NaH2PO4(H3PO4调pH 2.2)为流动相,流速为1 mL/min,于柱温80 ℃、检测波长220 nm条件下分离检测。对三七素在石墨化碳柱上的保留及其影响因素的研究结果表明:三七素在石墨化碳柱上的保留机理仍主要是疏水相互作用。将建立的色谱条件用于三七药材中三七素的测定,进样量在0.22～4.4 μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加标回收率为99.5%(n=9),相对标准偏差不高于2.2%,分析速度快(三七素的保留时间不到3 min)。     

高效液相色谱法测定营养品中的虫草素

采用高效液相色谱法测定营养品中的虫草素。样品10.00g加水至50.00g溶解后,取溶液2.50g,加水30mL混匀后,加入30.0g·L~(-1)偏磷酸溶液1.0mL沉淀干扰物质,上清液在Phenomenex Gemini C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)上分离,以乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,紫外检测波长为260nm。虫草素的质量浓度在0.05~1.00mg·L~(-1)内与峰面积呈线性关系,测定下限(10S/N)为5.0mg·kg~(-1)。加标回收率在100%~102%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)小于5.0%。     

基于生物发光的高灵敏度三磷酸腺苷检测研究

在微生物检测和食品安全控制中需要对低浓度的三磷酸腺苷(ATP)做出快速准确的测定,基于ATP光学反应原理,设计了一种微量光学反应池,结合萤火虫素-萤火虫素酶发光技术,构建了一种用于现场检测的高灵敏度ATP光学传感器系统.传感器响应波长为550 nm,ATP生物发光反应适宜pH为7.8,在优化实验条件下,发光强度和ATP浓度在对数坐标下呈线性相关,检出限可达1×10-16 mol/L ATP,检测样品仅需30 μL,测量时间60 s.这种检测方法具有响应范围宽,测试简便,快速可靠等特点,适用于ATP现场快速检测,具有很好的应用前景.