聚(苯乙烯-二乙烯基苯)反相高效液相色谱填料在胸腺素α1分离中的应用

采用高聚物型苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)麦科菲反相高效液相色谱柱(MKF-RP-MH)分离胸腺素α1,优化色谱条件为:流动相A:0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0或8.0),流动相B:乙腈,梯度洗脱条件0~20 min,0%~10%乙腈,20~40 min,10%~30%乙腈;温度:30℃;流速:0.8 mL/min;检测波长:214 nm。在优化条件下分离了胸腺素α1标准品和样品。样品浓度在0.05~4 g/L时,线性方程为C=0.0099A-0.0798(r=0.9994),胸腺素α1最大载样量为120μg(6 g/L)。     

反相高效液相色谱法测定烤烟叶片发育过程中的类胡萝卜素类物质

建立了采用反相高效液相色谱测定烤烟叶片中类胡萝卜素的方法。烤烟叶片先用含0.1%丁基羟基甲苯（BHT）的90%丙酮水溶液萃取,然后加入0.1 g醋酸铅,于4 ℃下以10000 r/min离心5 min以去除蛋白质。色谱柱为 C18反相柱(3.9 mm i.d.×150 mm, 5 μm)。流动相:A,甲醇-异丙醇(体积比为1∶1）;B,超纯水。洗脱程序:0~10 min,70%A+30%B;10~17 min,100%A;17~30 min(90%A+10%B)。流速：0.5 mL/min。进样量:10 μL。检测波长:450 nm。该方法简化了样品的前处理过程,4种类胡萝卜素物质的加标回收率为91.77%~97.42%,相对标准偏差为 3.46%~0.98%。用该方法研究了烤烟发育过程中类胡萝卜素含量的变化规律,获得了与文献较为一致的结果。     

高效液相色谱法测定保健食品和饮料中的阿斯巴甜

建立了保健食品和饮料中的甜味剂阿斯巴甜的高效液相色谱快速测定方法.固体样品用纯水超声提取;饮料样品超声脱气.取适量提取液或饮料样品,经0.45 μm滤膜过滤后,取20 μL进样色谱柱分析.色谱条件:分离柱为C18柱(250mm×4.6 mm i.d.,10μm),柱温35℃,流动相为V(10 mmol/L KH2PO4,pH 3.50):V(乙腈)=80:20,流速1 mL/min,检测波长210 nm.本法线性范围为0～16 μg,最低检出量为0.0024 μg,回收率为92.3%～102%.相对标准差小于1.6%.本法准确度和精密度均能满足保健食品和饮料中阿斯巴甜测定的要求.     

李晶1,2, 徐济仓1, 李雪梅1, 周建光2, 朱岩3, 缪明明1*超高效液相色谱法同时测定香精香料中14种禁限用物质

建立了超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA)同时测定香精香料中14种禁限用物质的方法。样品经10%(v/v)甲醇水溶液(含1%(v/v)氨水)提取后进行UPLC测定。采用的色谱柱为Waters BEH C18柱(50 mm×2.1 mm, 1.7 μm),流动相为10 mmol/L乙酸铵(含0.1%乙酸)和乙腈,梯度洗脱,流速为0.2 mL/min,柱温为35 ℃,在200～500 nm范围内进行扫描检测。结果表明,该方法在12 min内可实现14种禁限用物质的分离和检测,在0.10～50 mg/L范围内具有较好的线性关系,各待测物的线性相关系数均大于0.995,检出限(以信噪比为3计)为0.32～2.51 mg/kg。在5、10、20 mg/L添加水平下待测物的平均回收率为93.0%～121.0%,相对标准偏差为0.51%～4.50%。该方法操作简易,灵敏度高,线性相关性好,重复性佳,可以满足国内对于香精香料样品中禁限用物质的检测要求。     

反相离子对高效液相色谱法测定SD大鼠血浆中河豚毒素的含量

建立了大鼠血浆中河豚毒素(TTX)反相离子对高效液相色谱测定方法。血浆样品加水涡漩,再加沉淀剂V(乙腈)∶V(含0.5%HAc的甲醇液)=3∶1),旋涡离心后取上清液进样测定。色谱柱为Agilent ZorbaxSB C18柱(150 mm×4.6 mm×5μm);流动相为10?N-90%的8 mmol/L庚烷磺酸钠与0.005%TFA混合溶液,配好后调到pH5.0;紫外检测波长196 nm;流速1.0 mL/min;柱温为室温。本方法TTX标准品检出限为1.055 mg/L,血浆中TTX的检出限为0.1055 mg/L。血浆中TTX的线性范围为21.1~211 mg/L,r=0.9989。日内和日间精密度RSD均小于3%。本方该法准确、专属性强,适用于血浆中TTX的浓度测定。     

反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定安宫牛黄胶囊中的胆酸

应用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法对安宫牛黄胶囊中的胆酸含量进行了测定。色谱柱用JASCO C18柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm),流动相为甲醇-0.1%(体积分数)醋酸水溶液(体积比为9∶1),流速1.0 mL/min,柱温为室温;蒸发光散射检测器漂移管温度40 ℃,载气（N2)流速4.0 L/min。在上述条件下测得胆酸的进样量为0.50-5.02 μg时线性关系良好(r=0.999?3),最低检测限达到0.05 μg,平均加样回收率为97.1%。该方法快速简捷,精密度高,重现     

固相萃取/反相高效液相色谱法对血清中胰岛素的测定

采用固相萃取纯化血清样品,荧光胺柱前衍生,建立了反相高效液相色谱/荧光检测血清中胰岛素的方法.色谱条件:LunaC5柱(100 mm×4.6 mm,5 μm)分离,流动相为乙腈-Tris缓冲溶液(10 mmol/L,pH 8.5)梯度洗脱,流速:1 mL/min.激发波长(λex)273 nm,发射波长(λem)476 nm,进样量20 μL.结果表明:胰岛素在10 ～800 μg/L范围内峰面积和质量浓度呈良好的线性关系,相关系数r为0.997 1;检出限为5 μg/L.日内、日间精密度分别为1.5%、1.0%,回收率为92%.     

羧甲基-β-环糊精手性流动相添加剂法拆分帕罗西汀及其中间体对映体

建立了帕罗西汀及其中间体的高效液相色谱手性拆分分析方法。选用C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为0.1%磷酸-甲醇(体积比为65∶35,含0.38 g/L羧甲基-β-环糊精,以三乙胺调pH 7.2),柱温25 ℃,检测波长210 nm。结果表明,帕罗西汀及其中间体HFP的对映异构体在30 min内同时得到了基线分离,该法与手性固定相法相比具有分离效果更好的优势。     

新型除草剂2.5%稻杰的有效成分测定-高效液相色谱法

采用高效液相色谱测定了新型除草剂2.5%稻杰(FENCER)的有效成分,用外标法进行定量分析.条件为:Waters Symmetry C8色谱柱;流动相包括V(乙腈)∶V(水)∶V(1% H3PO4=60∶40∶0.1;检测波长为285 nm;流速为1.0 mL/min,柱温为室温;进样量为10 μL;实验结果表明,样品平均回收率为98%,精密度为0.13%.     

高效液相色谱-荧光检测法测定罂粟籽和火锅汤料中的罂粟碱

用所建立的高效液相色谱-荧光检测法测定了罂粟籽和火锅汤料中的罂粟碱。采用的色谱柱为RP-C18柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm);检测激发波长为285 nm,发射波长为355 nm;流动相为甲醇-0.02 mol/L乙酸铵(体积比为70∶30),流速0.8 mL/min。实验结果表明,罂粟碱的进样量为1×10-4~0.1 μg时其质量浓度与相应峰面积有良好的线性关系,最低检测限(以信噪比大于3计)达到0.02 ng。罂粟籽中罂粟碱的回收率为99.0%～100.8%。方法快速准确,简便灵敏,分离度高,能够满足有关食品中罂粟碱的检测要求。     

反相HPLC测定钒、铌、钽的2-(2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基苯酚配合物

以2-(2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基苯酚(PADAP)为柱前衍生试剂,在含0.1%酒石酸的10mmo1/L(pH3.5)HAc-NaAc缓冲溶液的甲醇/水(50:50,V/V)中(580nm检测),在C₁₈柱上于11min内实现了V、Nb、Ta的同时分离及测定,检出限(S/N=3)为0.34、0.29、7.30ng/mL.该法灵敏度高,用于矿样分析所得结果与推荐值相符,标准加入回收率为99.0%～101.1%.     

超高速液相色谱测定奶粉中的三聚氰胺

使用超高速液相色谱仪(LCU),在LaChromUltra C18柱(50×2.0 mm i.d.,2 μm)上,以10 mol/L柠檬酸-10 mol/L辛烷磺酸钠/CH3CN为流动相,紫外240 nm检测,2.2 min内快速检测出奶粉中的三聚氰胺.结果表明,三聚氰胺浓度在0.25～100 μg/mL范围内线性关系良好(R2>0.999),平均回收率为87%～95%,保留时间的相对标准偏差为0.26%～0.38%,峰面积的相对标准偏差为0.91%～1.82%.该方法适用于大批量样品的常规分析.     

固相萃取/高效液相色谱法对卷烟主流烟气中丙烯酰胺及其滤咀截留的测定

建立了一种用固相萃取/高效液相色谱法(SPE/HPLC)快速检测主流烟气中丙烯酰胺及其滤咀截留的方法.使用剑桥滤片和吸收瓶捕集主流烟气中的丙烯酰胺,蒸馏水为萃取溶剂,采用C18固相萃取小柱对样品液进行纯化,外标法定量.采用Waters Nova-Pak C18柱(3.9 mm×150 mm×4 μm),柱温30 ℃,流动相为乙腈-水(体积比3 ∶ 47),流速为0.6 mL/min,DAD检测器检测波长为202 nm对丙烯酰胺进行分离测定,外标法定量.方法的线性范围为0.1 ～10 mg/L,线性相关系数为0.999 9;回收率为93% ～102%,检出限(S/N=3)为0.01 mg/L.测试了8种烤烟型香烟主流烟气中丙烯酰胺的含量为6.89 ～15.82 μg/cig;丙烯酰胺在8种烤烟型香烟滤咀中的截留范围为0.94 ～1.10 μg/cig.     

高效液相色谱法测定水中硝基苯和苯胺含量

建立了高效液相色谱直接进样快速分析水样中苯胺和硝基苯的方法.操作条件为:进样量5 μL;流速1 mL/min;流动相为V(乙腈)∶ V(3.85 g/L乙酸铵+3 g/L乙酸)=65∶ 35混合液;苯胺用荧光分析,λex/λem =280/340 nm;硝基苯用紫外分析,波长为262 nm;分离柱为Eclipse XDB2-C8 柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm);测试时间为3.2 min;样品前处理方法:1.0 mL水样与1.0 mL甲醇混匀,用微孔滤膜(0.45 μm, 有机系)过滤.苯胺和硝基苯标准曲线的线性相关系数均 >0.999.测试苯胺、硝基苯时,仪器精密度分别为1.56%和0.13%.方法的回收率在89%～110%之间.仪器对苯胺和硝基苯的检出上限分别是50和200 mg/L; 苯胺和硝基苯的方法检出限分别是18和21 μg/L.     

柱前衍生高效液相色谱-荧光检测法测定水稻中7种巯基化合物

建立了水稻中半胱氨酸(Cys)、谷胱甘肽(GSH)和植物螯合肽(phytochelatin, PC:PC₂、PC₃、PC₄、PC₅、PC₆)7种巯基化合物的柱前衍生高效液相色谱-荧光检测分析方法.样品经0.1%三氟乙酸(TFA)(含6.3 mmol/L二乙烯三胺五乙酸(DTPA))超声提取,然后以单溴二胺(mBrB)为衍生剂在pH 8.0的4-羟乙基哌嗪丙磺酸(HEPPS)缓冲溶液中衍生化.采用的色谱分离柱为Agilent Eclipse plus C_l8柱,流动相为0.1%TFA(pH 2.5)和100%乙腈(ACN),梯度洗脱,流速为0.8 mL/min.荧光检测的激发波长和发射波长分别为380 nm和470 nm.结果表明,7种巯基化合物在0.7~100.0 mg/L范围内,峰面积与质量浓度之间的线性关系良好(r²≥0.9991);检出限为0.03~0.20 mg/L;加标回收率为89.26%~99.42%,相对标准偏差为2.05%~5.87%.该方法准确、灵敏度高、重现性好,为水稻中巯基化合物的研究提供了检测手段.     

高效液相色谱法测定化妆品中α-、β-熊果苷及烟酰胺

建立了美白类化妆品中熊果苷的两种光学异构体α-熊果苷和β-熊果苷及烟酰胺的高效液相色谱检测方法。样品用氯化钠水溶液-氯仿(2:1, v/v)进行萃取。固定相为依利特ODS-BP柱(200 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为甲醇-水(10:90, v/v),柱温为25 ℃,检测波长为220 nm,流速为0.5 mL/min,进样量为20 μL。在上述条件下α-熊果苷、β-熊果苷和烟酰胺的质量浓度依次在0.07~50, 0.06~50, 0.05~50 mg/L时与色谱峰面积之间的线性关系良好,相对标准偏差(n=7)分别为1.65%、1.73%和1.33%。将该方法用于化妆品的检测,回收率为91.7%～109.6%。该法简便、快速、准确,可用于化妆品美白成分的测定。     

凝胶柱净化-高效液相色谱检测食品中的苏丹红

建立了凝胶柱净化-高效液相色谱同时检测食品中苏丹红Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ的方法。样品用乙醇提取,提取液经Bio-Beads SX3凝胶柱(200 mm×10 mm i.d.)净化,用环己烷-乙酸乙酯(体积比为1∶1)洗脱。采用Symmetry Shield RP18柱(250 mm×4.6 mm i.d.,　5　μm)分离,以100%甲醇为流动相,流速1.5 mL/min;用二极管阵列检测器检测,检测波长478 nm。上述4种苏丹红组分在其质量浓度为0.1~10.0 mg/L时有良好的线性关系(r>0.999),方法的检测限为7~14 μg/kg;平均加标回收率为80.7%~96.3%(添加水平为0.25,2.5 mg/kg),相对标准偏差为2.4%~5.9%。方法灵敏可靠,能满足食品中苏丹红检测的需要。     

反相高效液相色谱法测定藜芦混碱中藜芦定的含量

建立测定藜芦混碱中藜芦定的反相高效液相色谱方法.方法:采用Di-amonsil-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.1 mol/L乙酸铵(60:40)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长220 nm;柱温30℃.藜芦定在0.96～9.6μg线形关系良好,r=0.9999,藜芦定平均加样回收率为96.4%,RSD为1.6%(n=3).试验结果表明,该方法准确、简便,重现性好.     

中药滴水珠中Neoechinulin A的分离及测定

采用柱色谱法对中药滴水珠中的有效成分Neoechinulin A进行分离纯化,运用现代波谱技术进行结构鉴定,采用反相高效液相色谱法测定其含量。色谱条件: Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(体积比为63:37),流速为1.0 mL/min,柱温为30 ℃,检测波长为225 nm,进样量为10 μL。结果表明,Neoechinulin A的质量浓度在2.0～40.0 mg/L范围内与其峰面积有良好的线性关系(r0.9995);方法的加样回收率为98.3%～101.1%。该方法简便、快速、准确,可作为中药滴水珠质量控制的一个有效方法。     

川西獐牙菜与抱茎獐牙菜中(口山)酮的高效液相色谱分析

采用反相高效液相色谱法同时分离和测定了龙胆科獐牙菜属的川西獐牙菜和抱茎獐牙菜中几种(口山)酮的含量.色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.60 mm i.d., 5 μm),流动相为甲醇-0.1%的磷酸水溶液(体积比为73∶27),流速1 mL/min,检测波长260 nm,柱温20 ℃.实验结果表明,该方法具有很好的线性关系与精密度,方法简单、准确、实用性强.