Ti T—DNA基因在天仙子+烟草体细胞杂种培养细胞中的导入、表达及再生

携带章鱼碱型Ti质粒和胭脂碱型Ti质粒的根癌农杆菌不同菌株分别与天仙子+烟草体细胞杂种培养细胞经共培养离体转化程序后,Ti T-DNA基因在受体细胞中获得了转移与表达。虽然细菌处理对受体细胞的植板率具有一定的影响,但其激素自主型频率为33.9—76.8％,表现冠瘿碱合成酶活性的频率为9.7—47.5％。从转化细胞克隆再生的苗不易长大、难于生根,且其基部产生大量的次生瘤组织。在这种再生苗的叶组织及次生瘤组织中仍可检测到相应冠瘿碱合成酶的活性。     

小麦原生质体再生细胞直接形成体细胞胚和再生植株

本文用普通小麦品种“济南177”幼胚诱导产生的胚性愈伤组织为材料游离原生质体,培养在附加有1mg/12,4-D和500mg/1水解酪蛋白(CH)的NMB培养基中,原生质体再生细胞直接分裂成为体细胞胚。生长至1.5—2mm大小的体细胞胚在无激素的MB固体培养基上直接发育成为完整再生小植株。     

从棒头草(Polypogon fugax Nees ex Steud)原生质体培养获得再生成熟植株

本文报道从棒头草(Polypogon fugax Nees ex Steud)原生质体培养获得体细胞胚和再生成熟植株的试验结果。从悬浮细胞制备的原生质体,经培养获得了再生小植株;而从胚性愈伤组织直接制备的原生质体,经培养已再生了成熟植株,后一条途径为其他禾本科植物原生质体培养提供了新的线索,本文还对有关的培养方法和培养基进行了研究。     

含T-DNA大豆细胞系的建立

本文报道了由致瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)C58菌株诱发的栽培大豆“四月黄”品种的瘤组织,经过无激素的MS培养基初步筛选和标记基因产物胭脂碱纸上电泳鉴定,筛选出含T-DNA的大豆愈伤组织。经过65代悬浮继代培养以及三次单细胞筛选,成功地获得了含T-DNA的稳定的大豆细胞系。同时还建立了一个含有T-DNA的多倍体细胞系。异源的T-DNA中的胭脂碱合成酶基因在大豆细胞基因组中稳定的整合和表达。为大豆的基因工程研究创造了良好的条件。     

几种含吡啶双酰胺基双Schiff碱对大肠杆菌的抑菌活性研究

使用LKB 2277热活性监测器测定了大肠杆菌在几种含吡啶双酰胺基双Schiff碱作用下的生热曲线,得到了不同Schiff碱在不同浓度下大肠杆菌生长代谢的生热速率常数k、传代时间、半抑制量浓度。结果发现,含有2,4-二羟基苯甲醛双Schiff碱(Ⅱa和Ⅱg)对大肠杆菌生长代谢的抑制活性要明显大于含其他Schiff碱,而杂环Schiff碱对大肠杆菌抑菌活性顺序为吡啶噻吩呋喃。     

大豆原生质体经体细胞胚再生植株

从栽培大豆(Glycine max L)的未成熟子叶游离的原生质体,以Gelrite bead法包埋,培养在大豆根瘤产物(天冬酰胺、谷氨酰胺、尿囊素、尿囊酸等)为主要氮源的ZSP培养基中,形成了胚性愈伤组织。该愈伤组织在体细胞胚分化培养基上直接分化出体细胞胚,并进一步诱导出再生植株,进入正常发育而开花。     

章鱼肉碱标准样品的研制

研制了章鱼肉碱标准样品。以章鱼加工副产物为原料,通过提取、分离纯化制备高纯章鱼肉碱,采用红外光谱(IR)、高分辨质谱(MS)和核磁共振谱(NMR)进行结构确证。样品分装成144瓶,采用离子色谱检测法进行均匀性、稳定性检验和定值分析。从样品中随机抽取15瓶进行均匀性检验,经F检验表明:在95%的置信区间内样品均匀性良好。在0~4℃条件下,经过24个月长期试验稳定性考察,结果表明样品稳定性良好。标准样品经国内8家具有分析资质的实验室进行协同定值,章鱼肉碱标准样品定值结果为99.49%,相对扩展不确定度为0.14%(k=1.96)。该标准样品达到标准样品的技术要求,可用于章鱼肉碱相关产品的质量控制和分析方法校正。     

从三叶半夏(Pinellia ternata Breit)叶肉原生质体再生植株

从三叶半夏叶片分离到大量、具活力的叶肉原生质体,采用无机盐、激素、蔗糖浓度不同的液体和固体双层培养基培养。4—7天内原生质体出现第一次分裂,分裂频率为3—8％,3周后形成80—100个细胞的细胞团,转入液体培养基中振荡培养,1月后将形成1—2mm直径的愈伤组织再转入固体分化培养基中,愈伤组织先增殖、生长,3—4周后分化出绿芽和小苗,再1月后,由原生质体再生的半夏小植株已长至6—10cm高。半夏原生质体再生植株的发生途径有器官型和胚状体型两种方式。比较和讨论了悬浮培养、双层培养和组份浓度差液-固体双层培养对原生质体培养的效果。     

稀土对NaCl胁迫下矮牵牛幼苗生长抑制的缓解效应

以矮牵牛为材料,采用组织培养的方法,探讨硝酸稀土对NaCl胁迫下矮牵牛幼苗生长抑制的缓解效应.结果表明,在试验区间范围内,采用90 mg·L-1硝酸稀土对0.4%的NaCl胁迫下矮牵牛的株高、单株鲜重和根长有明显的缓解效应,分别为:14.5%,19.9%和53.2%,对生根率缓解效应不明显;当NaCl浓度为0.8%,硝酸稀土对株高和单株鲜重缓解效应不明显,对根长和生根率反而有抑制作用,抑制效应分别达到34.6%和48.4%.在一定范围内硝酸稀土对NaCl胁迫矮牵牛根系的POD,SOD和CAT同工酶的活性均有促进作用,表达种类无明显变化.随着硝酸稀土处理浓度的提高,叶片POD同工酶活性呈现低-高-低变化,表达种类无明显变化;SOD同工酶活性增强,表达种类增多;CAT同工酶活性下降,表达种类减少.     

亚硫酸盐无氰电沉积金新工艺及机制

直接以氯金酸作为主盐、 羟基乙叉二膦酸（HEDP）作为镀液稳定剂和镀层细化剂、 结合添加剂, 组成亚硫酸盐无氰镀金新工艺; 研究镀液稳定性、 镀层形态及金电沉积机制。结果表明, HEDP可明显提升镀液稳定性;不含HEDP的亚硫酸盐镀金液中, 镀层呈棒状晶粒并随沉积时间延长而逐渐生长,导致镀层外观随镀层厚度增加由金黄色转变为红棕色。镀液含有HEDP时, 金晶粒形态由棒状转变为棱锥状, 且棱锥状晶粒随沉积时间延长生长速率较小, 镀层厚度为1 μm时仍呈现金外观。电化学实验表明金电沉积不经历成核过程。     

外源稀土La~(3+)对鄂尔多斯高原碱湖钝顶节旋藻生长及生理特性的影响

以鄂尔多斯高原碱湖的钝顶节旋藻(S1)为实验材料,采用生理与生物化学的方法测定了外源稀土元素La3+对S1生长的影响。结果表明:一定浓度的La3+对S1生长繁殖有明显的促进作用。在S1藻体细胞生长的初期La3+对其生长影响不明显;随着培养时间的延长,La3+对S1生长的影响逐渐显著(p<0.05);La3+浓度为38.53～53.94μmo.lL-1时S1的生长较快,其中La3+浓度为53.94μmol.L-1时对S1的生物量、叶绿素含量、胞内多糖和可溶性蛋白质含量促进作用最显著(p<0.01);La3+浓度高于53.94μmol.L-1时对S1的生长产生抑制作用。     

3′-末端氧化的tRNA~(Leu)对大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶的亲和标记

本文用3′-末端氧化的tRNA~(Leu)(tRNA_(ox)~(Leu))专一地标记了大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)。合成酶标记上等摩尔tRNA_(ox)~(Leu)后,氨酰化活力完全丧失,同时氨基酸活化活力也失去80％。这样失活反应是通过tRNA_(ox)~(Leu)的3′-末端羰基与亮氨酰-tRNA合成酶活性中心或其附近的赖氨酸残基的ε-氨基形成Schiff碱实现的。Schiff碱经硼氢氰化钠还原后稳定。酶与tRNA_(ox)~(Leu)的共价复合物经牛胰核糖核酸酶充分水解后,其活化氨基酸的活力及动力学常数基本恢复到原来水平,而氨基酰化活力未恢复。表明了该合成酶的两种活性中心相互关联又有区别。     

高等植物根原生质体的分离和培养

本文由12种植物,其中包括8种豆科植物(绿豆、黑绿豆、大豆、豌豆、木豆、蚕豆、苜蓿和胡卢巴)和4种十字花科植物(油菜、本油菜、甘兰和白芥)的萌发种子的幼根分离得到了根原生质体.根原生质体在培养中表现出活跃的分裂能力.除了在木豆和蚕豆中仅观察到细胞分裂外,其余10种植物的根原生质体均形成了愈伤组织。其中苜蓿根原生质体通过形成胚状体再生了植株,而油菜和甘兰的根原生质体通过愈伤组织诱导成芽也再生了植株,由此证明了根原生质体的全能性.这为那些在分离或培养原生质体方面仍存在困难的植物种提供了另一可供选择的系统.本文还讨论了这一系统的优点以及存在的问题。     

新型水溶性青蒿素衍生物的合成和抗疟作用

青蒿琥酯的钠盐(2)是最早的水溶性青蒿素衍生物,它用于静脉或肌肉注射以抢救危重的疟疾病人[1].但它的水溶液放置不久,就水解、析出二氢青蒿素(1),引起注射困难.因此为寻找稳定的水溶性青蒿素衍生物,我们曾合成化合物3,它们的有机酸盐的抗鼠疟效果高于青蒿琥酯,但在猴疟试验中不如青蒿琥酯而被淘汰[2].考虑到不少抗疟药(如Amopyroquine 4)含有曼尼希碱[3],因此,我们又合成了一种含有曼尼希碱的衍生物5.它由二氢青蒿素在酸性催化剂存在下,与乙酰氧基苄醇缩合,然后硷性水解得到含有酚基的青蒿素衍生物.经曼尼希反应生成目标物5.有时,粗产品中含有曼尼希碱一取代和二取代的二种衍生物,经仔细柱层析可分得纯品.这些游离碱与有机酸结合生成水溶性的青蒿素衍生物.所有化合物的化学结构都经元素分析和光谱分析(核磁共振,红外光谱)确证.     

微量热研究几种新型吡啶酰胺希夫碱对大肠杆菌的抑制作用

用微量热研究一系列新型吡啶酰胺希夫碱对大肠杆菌的抑制作用, 不同的吡啶酰胺希夫碱衍生物对大肠杆菌生长的抑制作用不同. 通过热动力学模型计算得到生长速率常数(k)和抑制率(I), 我们获得了吡啶酰胺希夫碱衍生物的抗菌作用效果. 通过药物作用于细菌处于生长对数期的实验发现, 有两种化合物(F和G)对大肠杆菌生长有非常好的抑制作用, 他们的半抑制浓度(IC50)分别是0. 106 和0. 113 g/L, 但是药物对大肠杆菌的无氧发酵过程抑制作用比较差. 通过进一步分析药物结构与药物半抑制浓度, 我们发现: 希夫碱衍生物的亲水性对其抗菌活性有很大的影响, 这主要是由细菌的细胞膜结构不同所致. 对希夫碱及其碱衍物的结构与抗菌活性关系进行了初步探讨, 它们对大肠杆菌的抗菌活性顺序为: F＞G＞C＞D＞E＞B＞A.     

邻香兰素氨基酸Schiff碱化合物的合成及构象研究

Schiff碱是指含有亚甲氨基－PC＝N－的化合物,这类化合物因Schiff于1864年首先发现而得名。一些Schiff碱及其过渡金属配合物对肿瘤和病菌有一定的抑制作用^[1-3]。1970年,Hodnett^[4,5]制得几种Schiff碱,实验发现它们对老鼠肌肉内的Walker206瘤有抑制生长的作用,它们和某些金属形成的螯合物效果更好。Schiff碱配体可以作为螯合剂、生物活性剂、分析试剂和催化剂等,在科学研究和化工生产中有着广泛应用^[6,7]。本文报道一类新型的Schiff碱－邻香兰素氨基酸化合物的合成和构象研究,采用分子动力学模拟退火搜索方法对4人邻香兰素Schiff碱化合物的不同构型分子进行了构象研究,在搜索出的系列低能构象中分别找出全局最低能量构象,以此为初始构象进行了PM3量子化学计算。4个化合物的分子骨架结构如图1所示。     

镧钐铕及镱对体外培养人二倍体细胞的作用

本文报道镧、钐、铕和镱的氯化物对体外培养人二倍体细胞的作用。实验结果表明小剂量的LaCl_3,SmCl_3,EuCl_3及YbCl_3对人二倍体细胞无毒性作用,对细胞的生长有一定的促进作用;剂量为1mmol/L的四种化合物对人二倍体细胞的毒性与对照相比无明显差异。表明小剂量的四种稀土氯化物对体外培养人二倍体细胞和人癌细胞之间的反应性存在着差异,这种差异主要与两种细胞膜及表面结构不同有关。     

乌头类双酯型生物碱对嗜热四膜虫生长的毒性效应微量热学研究

建立灵敏表征乌头类双酯型生物碱(DDA)对嗜热四膜虫生长代谢影响的评价方法.采用微量热法,在不同给药条件下,以表达功率-时间曲线(热谱曲线)的特征参数生长速率常数(k)、半数抑制浓度(IC50)、最大输出功率(Pmax)及达峰时间(tp)和总产热量(Qt)为指标,对嗜热四膜虫生长代谢程度进行客观地量化评价.结果表明,随着3种DDA浓度的增加,达峰时间tp延长,生长速率常数k、最大输出功率Pmax等随之降低,且生长速率常数k与相应的浓度间呈现良好的线性关系:r乌头碱=0.9910(IC50=207.7μg·mL-1);r新乌头碱=0.9923(IC50=412.5μg·mL-1);r次乌头碱=0.9977(IC50=1497μg·mL-1).同时由半抑制浓度IC50得到3种DDA毒性的大小顺序:乌头碱新乌头碱次乌头碱.初步构效关系研究表明,在化合物C(3)上引入羟基(OH)以及N原子上引入乙基(CH2CH3)均可明显增加双酯型生物碱对嗜热四膜虫的毒性作用.     

季铵盐阴离子交换膜研究进展

近年来,阴离子交换膜燃料电池的发展受到了广泛关注.开发具有碱稳定性能优异,电导率高的阴离子交换膜(AEMs)材料成为了研究的热点.AEMs主要由聚合物骨架和阳离子基团组成,这两者是影响膜碱稳定性和电导率的重要因素.本文综述了季铵盐类阴离子交换膜聚合物骨架结构中含有醚氧键和不含醚氧键的烷基季铵盐AEMs、N-螺环季铵盐A...     

以松木为模板研制高比表面积MgO固体强碱

以松木为模板, 乙酸镁为前驱物, 通过外模板法制备了一系列的MgO固体碱材料, 并用XRD、SEM、正己烷吸附、低温液氮吸附、Hammett指示剂法、ICP、IR和TG-DSC等手段对其进行了表征. 结果表明, 用该方法制备出来的MgO样品具有松木的生物形态, 由横截面积比较均一的棒状纳米颗粒构成, 不同于乙酸镁直接焙烧得到的MgO样品. 松木模板的使用有助于降低形成MgO样品的晶粒直径并明显提高了其比表面积, 与此同时, 这些具有生物形态的MgO样品仍保持了较高的碱强度, 可望用作优良的碱催化剂或催化剂载体.