偶合标记铜离子催化放大作用的极谱免疫分析法研究

提出了一种基于标记金属离子催化放大底物转化和极谱检测生成产物的极谱免疫分析新体系.在该体系中,用铜离子代替天然酶作底物转化的催化剂,通过双功能螯合剂二乙三胺五乙酸(DTPA)将其标记于模型抗原白喉类毒素(DT).在竞争免疫反应后,标记铜离子催化底物o-邻苯二胺(OPD)的氧化反应,生成电活性产物2,3-二氨基吩嗪(DAP),然后用单扫描极谱法测定DAP.其方法可测定10～1000ng/mL DT,灵敏度比以往直接检测标记金属离子的方法提高了两个数量级,可应用于多种蛋白质的免疫分析测定.     

催化光度法测定痕量铜

痕量铜对生命活动很重要。人体中铜的代谢与铁的代谢有相关性,铜参于造血过程,缺铜会引起贫血病。因此鉴于铜的重要生理作用,各生物样品中痕量铜的测定日益受到重视。已有文献[2,3]报道利用催化光度法测定铜。但高碘酸钾-溴邻苯三酚红体系尚未见报道,铜在乙酸-乙酸钠介质中对上述体系有催化褪色作用。据此建立了测定痕量铜的新方法。本法测定范围为0～5μg/10ml,表观摩尔吸光系数ε=1.26×10~5,用于茶叶中铜的测定得到较好结果。1 试验部分1.1 主要试剂与仪器 Cu（Ⅱ）标液:0.1mg·ml~(-1),准确称取CuSO_4·5H_2O 0.0982g,用去离子水溶解。稀释于50ml量瓶中。工作液稀释为0.1μg·ml~(-1) 溴邻苯三酚红溶液:1.0×10~(-3)mol·L~(-1) 高碘酸钾溶液:5.0×10~(-4)mol·L~(-1) 乙酸-乙酸钠缓冲液:pH=6.0 1,10-菲罗啉溶液:2g·L~(-1) 试剂均为分析纯,水为去离子水     

催化动力学分析法测定痕量铜

研究了在氨性介质中，Ｃｕ（Ⅱ）催化Ｈ２Ｏ２氧化噻嗪红Ｒ的退色反应，据此建立了催化动力学光度测定Ｃｕ（Ⅱ）的新方法，方法的线性范围为０．００５－０．５μｇ／２５ｍｌ。曾应用于水、猪肝和小麦粉标准物质中痕量铜的测定，获得满意结果。     

催化显色反应测定痕量铜

在催化显色体系中引入合适的活化剂能显著地提高其反应灵敏度,通过实验,我们观察到,乙醇对Ｃｕ－邻苯二酚－Ｈ２Ｏ２的催化显色反应有明显的活化增敏作用。研究了该体系的实验条件,并成功应用于食品和发样中痕量铜的测定。１　试剂与仪器７２３０型分光光度计;ｐＨＳ－２型酸度计。铜（Ⅱ）标准贮备液浓度１ｍｇ／ｍＬ,工作液稀释为１μｇ／ｍＬ;邻苯二酚溶液０．２ｍｏｌ／Ｌ;３０％Ｈ２Ｏ２溶液、ｐＨ５．５,ＨＡｃ－ＮＨ４Ａｃ缓冲溶液。试剂均为分析纯,水为去离子水。２　实验方法在２５ｍＬ比色管中分别加入２．５ｍＬ的邻苯…     

新催化光度法测定痕量铜的研究

目前,关于光度法测定痕量铜的方法很多,其中应用催化光度法测定痕量铜也有报道.本文采用具有助发色基团的2,4-二硝基苯肼在氯酸钾的催化作用下,与变色酸偶合,然后与Cu(Ⅱ)配合显色,反应机理如下:(?)试验确定了反应最佳条件,配合物的表现摩尔吸光系数ε=2.43×10~5L·mol~(-1)·cm~(-1),铜量在1     

催化褪色光度法测定痕量铜

1　引　　言催化动力学光度法是一种高灵敏度的分析方法 ,用此方法测定铜已有不少报道。但在ｐＨ =1 0的氨性溶液中 ,阳离子表面活性剂氯化十六烷基吡啶 (ＣＰＣ)存在下 ,Ｃｕ2 + 催化Ｈ2 Ｏ2 对间甲酚紫 (ｍ ＣＰ)的褪色反应尚未见报道。研究发现 ,间甲酚紫在ｐＨ =1 0的ＮＨ3 ＮＨ4Ｃｌ溶液中呈紫红色 ,再加入阳离子表面活性剂氯化十六烷基吡啶 ,溶液呈蓝紫色 ,Ｃｕ2 + 对Ｈ2 Ｏ2 氧化这种蓝紫色溶液的褪色反应有催化作用 ,从而建立了催化褪色光度法测定铜的新方法。本方法具有灵敏度高 ,操作简便、重现性好、选择性强等优点 ,直接用于人…     

催化动力学光度法测定痕量铜

研究了在氨水 NH4 Cl介质中 ,铜 (Ⅱ )催化H2 O2 氧化偶氮胭脂红的褪色反应条件 ,测定了反应的级数及表观活化能 ,建立了测定痕量铜的新方法。该方法的线性范围为 0～ 12 0ng·ml- 1,检出限为 0 .4ng·ml- 1。用该方法测定水样及人头发中铜 ,结果与原子吸收光谱法一致     

乙基橙指示催化动力学极谱法测定痕量铜

１　引　言在ＨＡｃ－ＮａＡｃ介质中，邻菲■啉（ｐｈｅｎ）存在下，痕量铜对抗坏血酸还原乙基橙反应具有强烈的催化作用，且在此条件下乙基橙于－０．３０Ｖ（νｓ　ＳＣＥ）处，有一灵敏的极谱波，以此作为监测反应过程中乙基橙的浓度变化，建立了测定铜的催化动力学极谱方法。２　实验部分２．１　仪器与试剂　ＪＰ３－１型示波极谱仪（山东电讯七厂），ＣＳ５０１型超级恒温器（重庆试验设备厂）。０．５０ｍｇ／ＬＣＵ（Ⅱ）标准溶液；７．０ｘ１０－４ｍｏｌ／Ｌ乙基橙溶液；０．５ｍｏｌ／Ｌ　ＨＡｃ－ＮａＡＣ缓冲溶液（ｐＨ＝４．…     

Polarographic immunoassay coupled with catalytic amplification of labeled copper ions

A new approach of polarographlc immunoassay based on the catalytic amplification of the labeled metal ions and the polarographlc detection of the catalytic product was developed.In this approach,the copper ions used as the catalyst for substrate conversion instead of natural enzyme were labeled to model antigen diphtheria toxoid (DT) through the bifunctional chelating reagent diethylenetriamine pentaacetic acid (DTPA).After heterogeneous competitive imrnunoreaction,the oxidation of substrate o-phenylenediatnine (OPD) was catalyzed by the labeled copper ions to generate an electroactive product 2,3-diammophenazine (DAP); subsequently,the product DAP was detected with linear-sweep polarography The proposed assay can determine the concentration in the range of 10-1 000 ng/mL of DT,two orders of magnitude more sensitive than those based on the direct detection of the metal ion labels The proposed immunoassay can be applied to detecting various proteins of interest.     

过硫酸钾存在下极谱催化波法测定芬布芬

过硫酸钾存在下极谱催化波法测定芬布芬;芬布芬;过硫酸盐;平行催化波;线性扫描极谱法     

Polarographic immunoassay coupled with catalysis of non-radioactive multiple iodine label

A now polarographic immunoassay was developed In this assay,human serum albumin (HSA) as the model antigen was covalently labeled with organic compound erythrosin B(EB) containing four non-radioactive iodides through Ⅰ step chemical reaction The labeling procedure is simple and the conditions needed are moderate.The molar labeling ratio of KB HSA was 12 Ⅰ The content of iodine in the conjugate obtained by the proposed procedure is ninth higher than that by the other existing methods.A heterogeneous competitive immunoassay was established by compling the catalysis of the conjugate to substrate As(Ⅲ)-Ce(Ⅳ) reaction with the linear-sweep polarographic detec-tion of As(Ⅲ) amount HSA can be determined in the HSA concentration range from 1 to 200μg/mL,with the de-tection hum of 0 66μg/ml.     

碘酸钾存在下萘丁美酮的极谱催化波法测定

本文报道了灵敏、快速测定萘丁美酮的新方法。在0.10 mol.L-1HAc-NaAc(pH 4.7)支持电解质中,萘丁美酮产生一极谱波,峰电位Ep=-1.12 V(vs.SCE)。加入KIO3后,该极谱波被催化,峰电流增加约30倍,峰电位基本不变,产生一灵敏的极谱催化波。其二阶导数峰峰电流ip″与萘丁美酮浓度在2.0×10-7~4.0×10-5mol.L-1范围内呈线性关系(r=0.9970,n=8),检出限为1.0×10-7mol.L-1。该方法可用于药物制剂中萘丁美酮含量的测定。     

平行催化氢波法测定双氯酚酸钾

双氯酚酸钾(d iclofenac potassium,DK),化学名称为[邻-(2,6-二氯苯胺)]苯乙酸钾(见图1),是图1双氯酚酸钾结构式F ig·1 Structural formu la ofd ic lofenac potassium一种有效的非甾体抗炎药物,具有显著的消炎、镇痛及解热作用,广泛地用于风湿性或类风湿性关节炎和其它关节疾     

铜离子标记免疫法测定甲胎蛋白

本文报道了用铜离子标记一催化放大一免疫分析法测定甲胎蛋白(AFP)。该方法用铜离子代替天然酶标记甲胎蛋白,与其抗体发生异相竞争免疫反应后,采用酸化法释放出标记物中铜离子,利用铜离子对过硫酸铵一邻甲氧基酚一硼酸缓冲液显色体系的催化作用,以催化光度法检测铜,并由此间接测定甲胎蛋白的含量。新建方法可检测10～1000ng／mL的甲胎蛋白,操作方便,成本低。该法用于血清样品AFP测定,相对标准偏差小于5．1％,样品加标回收率为87．0％～96．7％,结果满意。     

Fluorescent Immunoassay with a Copper Polymer as the Signal Label for Catalytic Oxidation of O-Phenylenediamine

This work suggested that Cu²⁺ ion coordinated by the peptide with a histidine (His or H) residue in the first position from the free N-terminal reveals oxidase-mimicking activity. A biotinylated polymer was prepared by modifying His residues on the side chain amino groups of lysine residues (denoted as K_H) to chelate multiple Cu²⁺ ions. The resulting biotin-poly-(K_H-Cu)₂₀ polymer with multiple catalytic sites was employed as the signal label for immunoassay. Prostate specific antigen (PSA) was determined as the model target. The captured biotin-poly-(K_H-Cu)₂₀ polymer could catalyze the oxidation of o-phenylenediamine (OPD) to produce fluorescent 2,3-diaminophenazine (OPDox). The signal was proportional to PSA concentration from 0.01 to 2 ng/mL, and the detection limit was found to be eight pg/mL. The high sensitivity of the method enabled the assays of PSA in real serum samples. The work should be valuable for the design of novel biosensors for clinical diagnosis.     

极谱催化波法测定黄连素

基于黄连素在过氧化氢存在下产生的极谱催化波,拟定了测定黄连素的新方法。在８．０×１０－２ｍｏｌ／ＬＮａ２Ｂ４Ｏ７－Ｎａ２ＣＯ３（ｐＨ９．４±０．４）－４．０×１０－３ｍｏｌ／ＬＨ２Ｏ２底液中,催化波峰电流与黄连素浓度在 １．０ × １０－８～ ３．０ × １０－７ｍｏｌ／Ｌ范围内呈线性关系。催化波的灵敏度比相应黄连素还原波高２５倍。     

催化动力学光度法测定痕量铜的研究进展

综述了近年来国内外催化动力学光度法测定痕量铜的进展情况。对催化氧化动力学光度法、催化还原动力学光度法、催化荧光光度法、阻抑动力学光度法等几个类别，从反应介质、灵敏度、线性范围等方面介绍了对不同反应体系的研究情况，并对催化动力学光度法测定痕量铜的发展趋势做出预测。