人体β-珠蛋白基因5′-旁侧DNA序列内的负调控区域1(NCR1)与HMG蛋白质(1+2)的相互作用

利用分子生物学技术和扫描隧道显微镜方法首次观察到HMG蛋白质(1+2)和人体β-珠蛋白基因的5′-旁侧DNA序列内的一个负调控区域(NCR1)相互作用的构象,这类蛋白质能将线状的DNA片段(～200bp)折叠起来,形成一个环状结构(直径70±6A)和°一条似乎呈现左手螺旋(z-from)的线状DNA尾巴。     

光谱联合电泳法研究双酚A与肿瘤相关DNA的相互作用

研究双酚A与人类肿瘤相关DNA(抑癌基因p53 DNA和癌基因C-myc DNA)的相互作用。分别采用紫外、荧光和圆二色等光谱方法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究了双酚A与人类肿瘤相关DNA(抑癌基因p53 DNA和癌基因C-myc DNA)的相互作用模式。其中紫外、荧光和圆二色滴定实验均表明了嵌插作用的存在,离子强度实验、KI猝灭对比实验和凝胶电泳实验证实了静电和嵌插作用的共同作用,可进一步影响DNA的双螺旋构象。     

抗人血小板单克隆抗体的研究——Ⅱ.抗血小板糖蛋白Ⅰ单克隆抗体——SZ-2

单克隆抗体SZ-2特异作用于人血小板和巨核细胞,测定10例正常人血小板SZ-2结合位点数为15200±4100/血小板,KD值0.66±0.33nM。SZ-2所识别的抗原对糜蛋白酶敏感,但对神经氨酸酶不敏感,亲和层析技术证明其为血小板糖蛋白Ib(GPIb)。SZ-2与其它抗GPIb单克隆抗体不同,它不仅抑制瑞斯托霉素诱导的血小板聚集,而且也抑制Ⅰ型胶原和血小板活化因子诱导的血小板聚集,并抑制上述诱导剂引起的血小板5-HT和βTG释放。     

枯草杆菌信号肽酶Ⅰ的识别序列特异性和信号肽在蛋白质分泌中的作用

本文采用重组体DNA技术使质粒pUB110的β-蛋白质的N-末端编码区与B.licheniformis的α-淀粉酶结构基因融合并产生了信号肽酶Ⅰ识别切割区,从而构建了带有β-信号肽的β AMY基因。该基因借助β-蛋白的可译读码和β-信号肽表达并分泌到胞外,分泌效率约为野生型的10％,通过对不同pβAMY质粒分泌能力的比较、限制性内切酶切点分析和β-信号肽介导下的胞外α-淀粉酶分子量的比较,in vivo证明了B.subtilis信号肽酶Ⅰ的特异识别切割序列为Ala—Ala—Ala Ala,结果还表明B.licheniformis α-淀粉酶在B.subtilis中的分泌作用符合翻译后加工模式。     

原发性肝癌患者血清多种微量元素、铜蓝蛋白、T淋巴细胞测定与分析

应用ＩＣＰ－ＡＥＳ、酶氧化反应、酸性非特异性酯酶方法，对３３例原发性肝癌患者，测定血清多种微量元素、铜蓝蛋白及Ｔ淋巴细胞，分别与１７例、３６例、３４例健康者对照．原发性肝癌组血清铜ｘ±ｓ＝１９．１９±６．７０８μｍｏｌ／Ｌ）高于对照组（ｘ±Ｓ＝１４．８２±４．３７μｍｏｌ／Ｌ），血清钼（０．４３７±０．３１２μｍｏｌ／Ｌ）、锌（１５．５１±８．７７μｍｏｌ／Ｌ）、铁（２０．９７±２６．１３μｍｏｌ／Ｌ）均低于对照组铝（１．１８６±０．３１２μｍｏｌ／Ｌ）、锌（２０．９４±６．３１μｍｏｌ／Ｌ）、铁（４６．７２±２９．８９μｍｏｌ／Ｌ），Ｐ值均＜０．０５；肝癌组铜蓝蛋白（ｘ±Ｓ＝５．３８±２．３５活性单位／ｍＬ）高于对照组ｘ±Ｓ＝３．９２±０．８７活性单位／ｍＬ，Ｐ＜０．０５；Ｔ淋巴细胞（ｘ±Ｓ＝５７．７８±１１．７１活性单位／ｍＬ），低于对照组（ｘ±Ｓ＝６６．８０±１２．８２活性单位／ｍＬ），Ｐ＜０．０５．结果提示原发性肝癌微量元素代谢异常，直接影响酶系统，使自由基失控、机体内促氧化和抗氧化平衡失调，估计这一学说在肝癌的发病中起重要作用。     

X射线荧光光谱定量测定磷酸盐玻璃中铝的配位数

本文以统计试验最优化方法处理商用X射线荧光光谱仪测得的AlKβ谱数据,用高斯和柯西函数的叠加函数拟合AlKβ谱轮廓,依据其非对称因子定量测定了磷酸盐玻璃中铝的配位数丰度,在0～100％范围内,算术平均偏差为±5％。     

示差脉冲极谱法确定镉(Ⅱ)-甘胺酸体系的配合物稳定常数

在镉离子浓度为5.00×10-5~2.00×10-4mol.L-1、甘氨酸与镉离子浓度比为100~400条件下,应用示差脉冲极谱技术测定不同溶液pH值时镉(Ⅱ)-甘氨酸体系的极谱峰电位和峰电流,依据极谱峰电位随溶液pH和自由金属离子浓度的变化关系曲线,建立合适的金属配合物体系模型。通过求解体系的质量平衡方程及拟合试验配合物形成曲线,用计算机分析程序优化得到MHL、ML、ML2、ML3和ML2(OH)五种金属配合物的稳定常数(lgβ)分别为9.67±0.15,4.35±0.02,7.83±0.03,10.04±0.04和11.48±0.13。     

去氢枞酸异丙醇胺衍生物的合成及其细胞毒性评价

为了寻找高效的抗肿瘤活性化合物,设计合成了一系列去氢枞酸异丙醇胺类化合物,利用IR、NMR和MS对其结构进行表征。采用噻唑蓝(MTT)法评价了目标化合物对四种不同肿瘤细胞T24(人膀胱移行癌细胞)、HepG2(人肝癌细胞)、SK-OV-3(人卵巢癌细胞)、A549(人肺癌细胞)和LO2(人正常肝细胞)的抗增殖活性。结果表明,部分化合物对肿瘤细胞的抑制作用优于阳性对照顺铂。其中,化合物3d对四种细胞株表现出最好的抗增殖效果,IC₅₀值分为8.10±0.28,8.65±0.10,13.21±0.35和8.24±0.42 μmol.L_-1^{。初步机理研究表明},化合物3d使A549细胞周期阻滞在G1/G0期,并诱导A549细胞凋亡,且呈浓度依赖性。     

四(β-N-乙酸甲酯)吡啶基卟啉和四(β-N-氰乙基)吡啶基卟啉在水溶液中的酸碱平衡

本文报道了在25±0.1℃,0.5mol·1^-1KCl介质中,水溶性的溴化四(β-N-乙酸甲酯)吡啶基卟啉(H₂T_β-N-ACMS PyPBr₄)和溴化四(β-N-氰乙基)吡啶基卟啉(H₂T_β-N-ECNPyPBr₄)的酸碱平衡。并求得H₂T_β-N-ACMSPyP的pK_a3,4=3.81±0.20,pK_a2=6.39±0.03,pK_a1=13.84±0.08;H₂T_β-N-BCNPyP的pK_a3,4=3.70±0.20,pK/a₂=6.09±0.04.     

广州地区健康儿童及成人发硒含量调查

测定了广州地区52名健康儿童及72名健康成人的发硒含量。儿童平均年龄6.4±3.3岁,儿童男性发硒含量为(0.44±0.14)×10-6,女性为(0.40±0.15)×10-6。成人平均年龄53.3±14.7岁,成人男性发硒含量为(0.49±0.12)×10-6,女性为(0.51±0.12)×10-6。儿童及成人发硒含量男女之间不存在显著性差异,男性儿童与男性成人发硒含量不存在显著性差异,但女性儿童发硒含量显著低于女性成年人。     

偏最小二乘法分光光度同时测定复方扑热息痛片中各组分含量

本文介绍了偏最小二乘法(PLS)用于多组分分光光度分析的基本原理和算法.研究了复方扑热患痛片中扑热息痛、阿司匹林和咖啡因的PLS测定方法,各组分的平均回收率分别为99.88±0.33％、99.99±0.14％和99.92±1.24％(置信度95％).     

毛细管气相色谱法测定兰索拉唑中有机溶剂残留量

以N,N-二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂,丁酮为内标,采用PV-101毛细管色谱柱 (30 m×0．22 mm),氢火焰离子化检测器,建立兰索拉唑中五种有机溶剂甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯残留量的定量分析方法。五种有机溶剂检出限分别为0．002 4％,0．002 4％, 0．001 2％,0．000 6％,0．000 6％;在10-1000 mg·L-1浓度范围内,各组分线性关系良好;对应的平均回收率分别为100．8％±3．6％,102．1％±2．3％,99．97％±4．1％,99．63％±2．7％, 102．3％±3．5％。     

青蒿素与DNA作用的电化学机理

在体积分数为20%乙醇的Britton-Robinson缓冲溶液(pH=7.4)中,利用循环伏安法和紫外可见吸收光谱法研究了青蒿素与DNA的相互作用。电化学研究表明,DNA的存在能导致青蒿素在银电极上-0.672 V处的还原峰电流下降,峰电位正移。通过对比双链DNA(dsDNA)和单链(ssDNA)与青蒿素作用,得出青蒿素可嵌插到DNA分子中,形成非电活性的复合物。电化学方法可计算出DNA与青蒿素的结合比为1∶4,结合常数为3.6×104。电极过程的电化学参数表明,DNA作用前后,α、β值变化不明显,进一步证实了该复合物是非电活性;Ks值变小,表明二者作用后受扩散控制。紫外可见吸收光谱法研究表明,青蒿素对DNA分子发生嵌插作用。通过光谱滴定法可计算二者的结合比和结合常数,同样获得1个DNA结合4个青蒿素分子,结合常数为4.0×104,与电化学方法测定结果相吻合。实验数据显示,青蒿素进入细胞内有可能与细胞核中DNA结合,诱导细胞凋亡。     

希土化合物在定向聚合中的催化活性——Ⅱ.希土螯合物与三烷基铝组成的均相体系对丁二烯定向聚合的催化活性

本工作研究了β-二酮类希土螯合物与三烷基铝组成的均相体系对丁二烯定向聚合的催化活性及一些聚合规律。实验结果表明下列希土螯合物与三乙基铝组合时都具有使丁二烯进行顺式-1,4定向聚合的催化活性:NdB_3;NdB;NdBTA;NdTTA;PrB_3;PrB;PrBTA;PrTTA;YB_3;YBTA 以及 LaBTA 等。这些均相催化体系的活性远比非均相希土氯化物体系的高。在一定的催化剂浓度范围内,催化活性随着Al/希土及希土/丁(克分子比)的增高而增大。聚合反应速率对单体浓度呈一级关系,对希土螯合物浓度也近似呈 一级关系,并呈现一诱导期。丁二烯在 NdB_3-Al(C_2H_5)_3体系中聚合的总活化能为 13±0.5千卡/克分子。研究不同希土元素的这些螯合物表明同一元素的不同螯合物体系的聚合反应速率和聚合物链结构都没有显著的差别。但不同希土元素的同一整合物体系的聚合活性相差较大,含有镨和钕螯合物体系的活性比其他体系大。由这些均相催化体系所得聚丁二烯的1,2链节含量不超过1％,都不含或含很少量凝胶,聚合物的[η]随着Al/希土(克分子比)以及希土/丁(克分子比)的增大而降低,[η]可以从 4—5降至 1以下。Al(i-C_4H_9)_3也能与这些螯合物组成活性催化体系,但活性很低。Al(C_2H_5)_2Cl则不能与这些螯合物构成活性催化体系。     

光谱法研究三氯生与人类肿瘤相关DNA的相互作用

采用紫外光谱、荧光光谱和圆二色谱等多种光谱方法研究了三氯生与人类肿瘤相关DNA(抑癌基因p53 DNA和癌基因C-myc DNA)的相互作用,以期为从分子水平上评价三氯生与人类肿瘤发生的危害性提供科学依据。紫外减色效应、KI猝灭受到抑制及圆二色谱正负峰强度减弱等结果表明三氯生以弱嵌插模式与两种DNA发生作用,三氯生与DNA的结合位点数均小于1,以及DNA解链温度小幅升高等结果证实三氯生部分嵌插入DNA的沟区,影响了DNA的双螺旋结构。     

化学发光法测定SOD活性的干扰因素及消除方法

采用黄嘌呤 -黄嘌呤氧化酶及邻苯三酚自氧化作为酶和非酶超氧阴离子自由基发生体系 ,以鲁米诺为发光剂 ,通过 SOD对发光的抑制率以测定 SOD活性。采用加热样品使 SOD失活 ,测得样品发光抑制率本底值 ,扣除本底值以消除干扰。在两种体系中测得结果有高度一致性 ,样品中 SOD活性分别为 1 70± 9.3U/m L和 1 65±2 .0 U/m L。本法用于测定生物制剂中 SOD活性 ,不需有机溶剂萃取 ,可有效地消除干扰 ,是一种实用、可靠测定 SOD活性的方法     

β-CD对纳米TiO2引发DNA损伤的抑制效应及其机理

在波长为365 nm的紫外灯催化下, 纳米TiO₂引发了Teasy plasmid DNA解旋损伤反应, 应用凝胶电泳检测DNA氧化损伤程度和β-CD的抑制作用, 同时用傅里叶红外吸收光谱技术和紫外分光光度计研究了抑制作用的机理. 在反应体系中加入不同浓度的β-CD, DNA解旋反应得到了抑制, 当两者质量比为4︰1时, 损伤抑制率高达97%. 通过紫外和红外检测分析, 在水溶液中, 纳米TiO₂的Ti—O键和β-CD空腔内的—OH发生键合反应, 并且纳米TiO₂表面的—OH消失, 从而阻止了·OH的生成, 抑制了氧化损伤反应. 纳米TiO₂应用广泛, 但有研究表明其具有致癌性, 在分子水平上β-CD对DNA的保护作用为纳米TiO₂的表面修饰以降低毒副作用提供新的思路, 同时也是一条利用高分子特性减小无机纳米材料生物毒性的新途径.     

牛心线粒体F_1-ATP酶亚基的相互作用和化学计量关系

本文证明牛心线粒体F_1与[~(14)C]-NBD-Cl在黑暗中保温,生成O-NBD-F_1,其NBD/F_1标记率为1;ATP酶活力抑制率为98％,但可被2mmol/L DTT恢复,提示F_1酪氨酸残基被标记。O-NBD-F_1经光照后NBD基团转移到氨基上,生成N-NBD-F_1;其NBD/F_1标记率为0.825,酶活力抑制率为83％。N-NRD-F_1脲聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,63.4％放射活性标记在F_1的β亚基,但纯化的β基中放射活性为20％。结果证明F_1含3个β亚基,亚基之间和位点之间有相互调控作用,从而支持F_1酶催化反应中三位点模型(Boyer,1977年)。     

非晶硅钆合金薄膜的ESR研究

用ESR研究了电子束蒸发的非晶硅钆半导体合金薄膜a-Si_1-_xGd_x。其钆组分x的范围为0～10at％。薄膜的ESR信号的g因子在(2.0043±0.0001)到(2.0054±0.0001)内变化,谱线的线型因子l在(2.77±0.01)到(3.10±0.01)内变化,谱线的线宽ΔBpp在6.40×10~(-4)T到7.00×10~(-4)T内变化。用Barnes S.E.的ESR动力学理论,对薄膜的ESR信号参数随组分x的变化关系进行了分析。结果表明,Gd~(3+)离子对a-Si薄膜中悬挂键的部分补偿作用以及基质材料中的传导电子与局域自旋系统的交换互作用是薄膜的ESR谱线参数变化的原因。