毛细管电泳测定主客分子相互作用的结合常数

在２５℃下,用毛细管区带电泳测定了主管体分子（配体和溶质分子）β－环糊精（β－ＣＤ）和心得舒（ａｌｐｒｅｎｏｌｏ）在ｐＨ值为２．５,浓度为１００ｍｍｏｌ／Ｌ的磷酸盐缓冲溶液下的结合常数,并对４种求解方法既非线性拟合法,双倒数法,ｙ－倒数法和ｘ－倒数法的结果进行了比较,所得值分别是３０７．２、４０８．４、３３１．４和３４３．１Ｌ／ｍｏｌ,同时获得了结合物的迁移率。该方法可用于测定结合比为１：１的各种     

毛细管电泳法测定电离平衡常数

１ 引 言 离解常数（如ｐＫ值）是理解化学现象如反应速率、生物活性、生物吸收等的一个重要参数。离解常数的测定方法有电势滴定法、紫外可见分光光度法和毛细管电泳法（ＣＥ）等，其中ＣＥ法被认为是一种测定ｐＫ的十分方便而有效的方法。近些年，ＣＥ已经广泛地用于测定一级电离平衡常数。对于二级电离平衡常数曾有人作了尝试，但是活度系数的影响并没有给予完全考虑。本文将全面考虑活度系数影响，导出ＣＥ测定ｐＫ值的非线性拟合公式，并应用于一些物质的测定。２ 实验部分２．１ 仪器与试剂 实验仪器是 ＷａｔｅｒｓＱｕａｎｔａ ４０…     

亲和毛细管电泳测定孕酮与其单克隆抗体的结合常数

采用亲和毛细管电泳的配体分离模式,以激光诱导荧光作为检测手段,测定了荧光素标记的孕酮与孕酮我隆抗体之间的结合常数,并研究了温育时间、电泳条件等因素对测定的影响。     

毛细管电泳电化学淌度移动法测定利尿剂和牛血清白蛋白结合常数

采用毛细管电泳淌度移动法研究了利尿剂氢氯噻嗪(HCT),布美他尼(BMTN)与牛血清白蛋白(BSA)的结合常数.使用未涂层的毛细管柱(70 cm×25 μm i.d.),中性H3BO3-Na2B4O7-NaCl(Palitzsch, pH 7.4)缓冲溶液,在800 mV工作电位,分离电压9 kV和电动进样9 kV×8 s的条件下,测得HCT,BMTN与BSA的结合常数分别为2.45×104 L/moL,1.19×104 L/moL.得到的结合常数值与经典紫外分光光度法测定的值相近.实验表明,本方法可以作为研究药物与蛋白相互作用的一种快速、简便的检测方法.     

亲和毛细管电泳法测定牛血清白蛋白和加替沙星的结合常数

利用亲和毛细管电泳法对牛血清白蛋白(BSA)与加替沙星(GT)间的结合反应及其相互作用做了初步探索,并应用淌度比(M)作为指标测定了两者的结合常数。以20 mmol/L pH 7.4的磷酸盐缓冲液作为运行缓冲液,分别以GT和BSA作为添加剂,另一组分为进样样品,内标为二甲基甲酰胺,于214 nm波长下检测。两种测定条件下得到的结合常数分别为4.4×104 L/mol和4.2×104 L/mol,与传统的荧光淬灭法测得的结果基本一致。该方法具有简单、高效的优点。     

蔗糖水解反应速率常数的毛细管电泳测定方法研究

利用具有高分辨率和高灵敏度的毛细管电泳-电化学检测方法直接测定蔗糖及其水解产物的浓度随反应时间变化的规律．在HCI催化下，对不同温度时蔗糖的水解反应速率常数进行了测定，并求得反应活化能Ea为109．8kJ／mol．该方法比经典的旋光度测定方法更直观简便，结果令人满意．     

乙酸和一氯乙酸电离常数的高效毛细管区带电泳法测定

首次建立了测定一氯乙酸和乙酸的电离常数的高效毛细管区带电泳新方法.该方法利用中性标记物和电流突跃两种方法来标记电渗流,通过测定乙酸和一氯乙酸在一定pH的缓冲溶液中的电泳淌度,结合数据回归分析拟合,求得乙酸和一氯乙酸的电离常数;所得数据和文献报道值较为接近.总体而言,毛细管区带电泳法可简单、快速、可靠地用于测定待测化合物的电离常数.     

亲和毛细管电泳激光诱导荧光法测定牛血清白蛋白与其单克隆抗体的结合常数

生物分子之间的特异性相互作用是生物界普遍存在的现象．研究这些现象,对揭示生物化学作用机理、药物研究等具有重要意义．结合常数Ｋｂ是描述生物分子之间特异性相互作用最主要的参数,测定结合常数的传统方法包括平衡透析、凝胶过滤色谱和分光光度法等［１］．亲和毛细管电泳（Ａｆｆｉｎｉｔｙｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ,简称ＡＣＥ）是近几年发展起来的毛细管电泳的一个分支,在研究生物分子之间特异性相互作用等方面有很好的应用前景［２～５］．与上述传统方法相比,ＡＣＥ具有测定速度快,样品用量少,有多…     

阿魏酸转化反应速率常数的毛细管电泳测定方法研究

初步确定了阿魏酸自然转化产物的结构 ,并用毛细管电泳测定了转化反应速率常数。在常温下 ,用毛细管区带电泳法直接测定阿魏酸浓度随时间变化的规律 ,并根据HPLC -MS -MS得到的质谱图及紫外光谱图初步确定了转化产物。在23℃ ,阿魏酸转化反应正向和逆向反应速率常数分别为5.194×10 -6s -1、5.360×10 -6s -1。方法简单、灵敏、快速     

毛细管区带电泳法测定3种香豆素的离解常数

采用毛细管区带电泳法(CZE)测定瑞香苷(DN)、瑞香素(DP)和7-羟基香豆素(7-HC)的离解常数(p Ka).通过测试不同酸度条件下各香豆素的迁移时间,以香豆素在电泳中有效淌度和运行液中OH-浓度的关系,推导了毛细管区带电泳-紫外分光光度(CZE-UV)法测定3种香豆素离解常数(p Ka)的线性模型,并建立了这3种香豆素的p Ka测定方法.测得3种香豆素的p Ka值分别是7.43(7-HC)、6.91(DN)和6.86(DP).同时也采用传统方法 -紫外分光光度法对这些物质的p Ka进行测定以验证CZE的可靠性,两种测定结果相一致,说明CZE-UV法用于3种香豆素的离解常数的测定,快速、简便、结果可靠.     

毛细管电泳测定物质三元相互作用体系的结合系数

毛细管电泳一般只能对二元结合体系的结合常数进行测定。研究了三元相互竞争体系的毛细管电泳测定方法,测定了金属锌离子与酒石酸和半胱氨酸以及锌离子与乳酸和半胱氨酸两个三元结合体系的结合常数,并以此比较了两种锌形态与半胱氨酸结合能力的大小。本法可用于测定两配体相互竞争结合体系的结合常数。     

毛细管区带电泳法测定4种抗HIV-1活性的化合物与牛血清白蛋白的结合常数

采用毛细管区带电泳紫外检测方法,在pH 8.0、浓度50 mmol/L的磷酸盐缓冲溶液及运行电压15 kV的条件下,测定了4种新合成的具有抗HIV-1活性的化合物(IG3,iso-C3,C3,MC3)与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的结合常数。在缓冲溶液中加入不同浓度的BSA,通过测定化合物迁移时间的变化,计算得到了上述4种化合物与BSA的结合常数分别为1.07×104, 1.34×104, 8.51×103和9.45×103 L/mol。该方法简单、快捷,可用于研究结合比为1∶1的小分子与生物大分子的     

亲和毛细管电泳间接紫外检测法测定金属络合物的亲和常数

 采用亲和毛细管电泳间接紫外检测方法 ,根据“峰漂移”模型 ,通过迁移时间的测定 ,可以获得在水体系中有极低亲和常数的金属络合物的亲和常数。将该方法分别应用于镁离子 柠檬酸体系和锰离子 酒石酸体系 ,在 pH为 5 .0 1,运行电压为 2 0kV ,缓冲溶液组成为咪唑和醋酸的条件下 ,测定了缓冲溶液中加入不同浓度配体后金属离子迁移时间的变化 ,经过数据处理后得出它们的亲和常数对数值分别是 3.2 7和 2 .2 8,与文献值较为一致。该方法适用于结合比为 1∶1的金属络合物的亲和常数的测定。     

毛细管电泳技术在天然黄酮类物质测定中的应用评述

综述了近年来毛细管电泳技术在天然黄酮类物质分离中的应用,简要概括了不同分离模式的应用情况,并列举了部分黄酮物质的分离实例.     

Determination of Binding Constants for Basic Drugs with Serum Albumin by Affinity Capillary Electrophoresis with the Partial Filling Technique

A simple, rapid, and accurate method is presented for determination of the binding constants of eight basic drugs with serum albumin by affinity capillary electrophoresis with the partial filling technique. Molecular modeling and multivariate regression analysis were used to investigate the relationship between the binding constants and the physicochemical properties of the drugs. The results show that hydrophobic attraction is responsible for interaction of most of the drugs with HAS, although interaction between sulfamethoxazole and HSA is because of electrostatic attraction.     

毛细管电泳技术分析PDGF-B基因启动子与蛋白质的复合物

 利用 1.0 %T ,0 %C的线性聚丙烯酰胺 (即丙烯酰胺和双丙烯酰胺的总质量分数是 1.0 % ,交联度为 0 % )作为筛分介质 ,对人体血小板长生因子 (PDGF) B基因启动子与核蛋白形成的复合物进行了分析。结果显示主要有两种核蛋白与PDGF B基因启动子具有较强的结合能力 ,能形成DNA蛋白质复合物。所得结论与传统凝胶电泳相似。该方法具有较高的分离度和良好的重现性 ,整个分析可在 5 0min内完成。该方法不失为一种基于PDGF为研究目标、用于PDGF与蛋白质复合物形成及抑制行为分析的快速、准确的实用方法。