毛细管电泳同时分离测定阿魏酸、异阿魏酸的研究

建立了同时分离测定阿魏酸、异阿魏酸的毛细管电泳(CZE)新方法。以20 mmol/L硼砂为背景电解质,体积分数15%异丙醇为有机改性剂,分离电压为20 kV,在219 nm波长下紫外检测。对硼砂浓度、有机溶剂体积分数、分离电压等因素对分离的影响做了系统的研究,最后确立了阿魏酸、异阿魏酸的最佳分离条件。阿魏酸、异阿魏酸分别在2.40~24.0μg/mL、1.80~18.0μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9995和r=0.9991),回收率分别为96.61%~101.9%,98.80%~101.8%。方法已用于升麻中阿魏酸、异阿魏酸的测定。     

在线扫集-胶束毛细管电动色谱法测定扛板归中的阿魏酸、咖啡酸和原儿茶酸

采用在线扫集-胶束毛细管电动色谱法(sweeping-MEKC)分离测定扛板归中的阿魏酸、咖啡酸和原儿茶酸。采用未涂层熔融石英毛细管(50 cm×50μm,有效柱长36 cm);环境温度25℃;缓冲体系为20 mmol/L NaH2PO4-80mmol/L十二烷基磺酸钠(SDS)-12.5%乙腈(V/V)(pH 2.20),紫外检测波长为216 nm,运行分离电压-20 kV,进样时间100 s。在优化条件下,3种有机酸均在20 min内出峰,峰面积RSD均小于5%。检出限分别达到98.52,118.73和27.27μg/L。     

在线扫集-胶束毛细管电动色谱法分离测定急支糖浆中阿魏酸、原儿茶醛和原儿茶酸北大核心CSCD

本文采用扫集-胶束毛细管电动色谱法(Sweeping-MEKC)分离测定急支糖浆中的阿魏酸、原儿茶醛和原儿茶酸。采用未涂层熔融石英毛细管(50cm×50μm,有效柱长36cm),环境温度25℃,缓冲体系为20mmol/L NaH2PO4+80mmol/L十二烷基磺酸钠(SDS)+12.5%乙腈(V/V)(pH=2.2),紫外检测波长225nm,运行分离电压-20kV,进样时间60s,达到最佳的分离效果。在优化条件下,阿魏酸、原儿茶醛和原儿茶酸均在15min内出峰,峰面积的相对标准偏差(RSD)均小于5%,检出限分别为109.95μg/L、88.48μg/L和15.96μg/L。     

HPLC法测定浓缩当归丸中阿魏酸的含量

建立了浓缩当归丸中阿魏酸的HPLC测定方法.采用C18色谱柱(TSK-GEL,4.6×150 mm,5μm),以甲醇-水-磷酸(30∶70∶0.3,V/V/V)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长320 nm.结果阿魏酸在0.006~0.15μg范围内线性关系良好,r为0.9999,平均加样回收率为96.91%.本方法可用于浓缩当归丸中阿魏酸的含量监控.     

场放大进样-胶束电动色谱法测定胡黄连中的香草酸、肉桂酸和阿魏酸

利用胶束电动色谱测定胡黄连中的香草酸、肉桂酸和阿魏酸;在联用场放大进样后,富集倍数提高30倍以上,检出限降至3.6μg/L,线性范围向下延伸到14μg/L。胶束扫集电动色谱缓冲体系为100mmol/L十二烷基磺酸钠(SDS)+20mmol/L磷酸钠(pH=2.20)+15%甲醇,分离电压-20kV。进样电压-8kV,进样时间20s,进水时间160s(H=20.0cm),测量波长214nm。考察了SDS浓度、进样长度、进样电压等对分离效果的影响。在优化条件下,3种有机酸在10min内出峰,峰面积相对标准偏差(RSD)≤5.9%。方法检出限、线性范围、相关系数分别为:香草酸3.6μg/L、14～460μg/L、0.9996;肉桂酸9.8μg/L、20～310μg/L、0.9994;阿魏酸11μg/L、22～180μg/L、0.9996。回收率为95.4%～107%。     

微透析与高效液相色谱在线联用技术校正大鼠皮下阿魏酸线性探针

采用微透析与高效液相在线联用技术(MD-HPLC on-line)建立并验证大鼠皮下阿魏酸微透析线性探针体内外校正方法.以磷酸盐缓冲溶液为灌流液,微透析灌注液流速为2 μ L/min,10孔自动进样阀间隔为8 min,在以Hypersil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-水(含0.5％乙酸)(35∶ 65,V/V),流速1 mL/min,检测波长314 nm的HPLC色谱条件下进行在线检测,阿魏酸在0.1～80 mg/L范围内回归方程线性关系良好,A=159044C-2607 (r=1),阿魏酸日内精密度RSD分别为0.8％,0.3％和0.5％(n=5);日间精密度RSD分别为0.2％,0.3％和0.4％(n=5),重现性与稳定性RSD分别为0.7％和1.1％(n=5).增量法和减量法测定阿魏酸线性探针体内外回收率分别为47.23％±0.94％和20.37％±1.37％,阿魏酸适宜进行微透析实验.应用MD-HPLC on-line对中药当归阿魏酸进行测定,使取样、进样和分析监测同时进行.     

场放大进样-胶束扫集法测定升麻中3种有机酸

利用两种在线富集技术,对阿魏酸、异阿魏酸、咖啡酸同时测定的方法进行了研究.在胶束扫集的基础上,联用场放大进样,使富集倍数提高了约100倍;检出限降至4 μg/L,线性范围向下延伸到10 μg/L.胶束扫集电动色谱缓冲体系为90 mmol/L SDS 20 mmol/L Na2PO4(pH=2.20) 10%甲醇,分离电压20 kV.进样电压10 kV,进样时间21 s,进水时间210 s(H=20.0 cm),测量波长214 nm.讨论了SDS浓度、进样长度、进样电压等对分离效果的影响.在优化条件下,3种有机酸在14 min内出峰,峰面积RSD≤3.8%.方法检出限(μg/L)、线性范围(μg/L)、相关系数分别为:阿魏酸4.0、10～400、0.9982;异阿魏酸4.0、10～400、0.9970;咖啡酸5.0、10～400、0.9980.回收率为83.9%～114.3%.     

在线扫集-胶束电动毛细管色谱法对活血通脉片中阿魏酸与原儿茶醛的分离测定

建立了在线扫集-胶束电动毛细管色谱法同时分离测定活血通脉片中阿魏酸和原儿茶醛含量的方法。讨论了pH值、十二烷基磺酸钠(SDS)浓度、电压、有机溶剂、进样时间和背景电解质组成对分离效果的影响。结果表明:采用未涂层熔融石英毛细管,以20 mmol/L磷酸二氢钠、140 mmol/LSDS为电泳缓冲液(含16%甲醇,pH2.2),在优化条件下,阿魏酸和原儿茶醛在19 min内出峰,峰面积RSD均小于5%,其线性范围分别为0.67~21.4、0.72~23 mg/L,回收率分别为94%~108%、91%~106%,检出限(S/N=3)分别达55.5、34.8μg/L。与胶束电动毛细管色谱相比,在线扫集-胶束电动毛细管色谱分离效果稳定,重现性好。该方法用于活血通脉片中阿魏酸、原儿茶醛含量的测定,结果满意。     

毛细管电泳电化学检测法测定胡黄连中香草酸和阿魏酸的含量

采用毛细管电泳电化学检测法测定了胡黄连中香草酸和阿魏酸的含量 ;研究了电极电位、运行缓冲液的浓度和酸度、电泳电压及进样时间等对电泳的影响 ,得到了最优化的测定条件 ;以直径为300μm的碳圆盘电极为检测电极 ,工作电极电位为0.8V(vs.SCE) ,在50mmol/L硼砂(pH8.4)运行缓冲液中 ,上述两组分在8min内完全分离 ;香草酸和阿魏酸线性范围分别为5×10-4～1×10-6 mol/L和1×10-3～1×10-6 mol/L ,检出限分别为4.2×10 -7和3.0×10 -7mol/L ;7次平行进样的相对标准偏差(RSD)为2.2 %和2.8 % ,回收率(n=3)分别为99%和103 % ,该法灵敏可靠 ,结果令人满意。     

高效液相色谱法测定血浆中阿魏酸的含量

建立了一种快速、稳定的高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD),用于测定健康人口服阿魏酸钠片后,血浆中阿魏酸的含量。该方法采用DIONEX C18色谱柱(250×4.6mm i.d.,5μm),流动相为甲醇-磷酸缓冲溶液(0.1%),梯度洗脱,检测波长为322nm。结果显示:人体血浆中的阿魏酸提取回收率大于60%。阿魏酸的含量在0.025～8.0μg/mL范围内线性良好,相关系数r=0.9994。方法检出限(S/N=3)为0.025μg/mL。日内相对标准偏差(RSD)小于1.02%,日间RSD小于2.1%。该法可用于人体血浆中阿魏酸的药代动力学研究。     

胶束扫集-电动色谱分离-毛细管电泳法测定升麻中三种有机酸含量

采用电场增强胶束扫集-电动色谱-毛细管电泳法对升麻中异阿魏酸、阿魏酸和咖啡酸的含量进行了测定,电泳缓冲体系为90 mmol·L~(-1)SDS-20 mmol·L~(-1)NaH_2PO_4(pH 2.20)-甲醇(10+90),分离电压为20 kV,检测波长214 nm。在优化的试验条件下,胶束扫集-电动色谱法对异阿魏酸、阿魏酸和咖啡酸富集倍数为4.3,4.8,2.9,3种有机酸均在14 min内出峰,线性范围分别为0.50～20.0,0.50～20.0,1.0～40.0 mg·L~(-1)。应用此方法分析了升麻样品并进行了回收率和精密度试验,测得回收率在93.2%～113.3%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)小于6%。     

毛细管区带电泳法测定四物汤及其配伍组方中川芎嗪和阿魏酸的含量

建立了毛细管区带电泳测定中药复方四物汤及其配伍组方中有效成分 川芎嗪和阿魏酸含量的分析方法,并对配伍规律进行了初步的探索。采用50 mmol/L 硼酸钠溶液(pH 9.00)为缓冲溶液,在电压20 kV、检测波长212 nm和内标为对羟基苯甲酸(p-HBA)的条件下,四物汤及其配伍组方中川芎嗪和阿魏酸在24 min内获得良好的分离。定量分析表明,川芎嗪和阿魏酸的相对峰面积Y(即待测组分与内标的峰面积之比Ai/As)和各自的质量浓度X( mg/L )之间呈良好的线性关系,相关系数分别为 0.999?7     

电堆积大体积进样-在线扫集-胶束毛细管电动色谱法测定胡黄连中的4种有机酸

建立了以电堆积大体积进样-在线扫集-胶束毛细管电动色谱法测定胡黄连中的异阿魏酸、肉桂酸、阿魏酸和香草酸的新方法.考察了pH值、四硼酸钠浓度、SDS浓度、电压、有机溶剂和进样时间对分离效果的影响.以40mmol/L四硼酸钠-80mmol/L十二烷基磺酸钠(SDS)为缓冲液(含10%(V/V)甲醇,pH 9.4),在进样电...     

加压毛细管电色谱分离检测中药厚朴中和厚朴酚与厚朴酚

采用反相加压毛细管电色谱技术,建立了一种快速、简便的中药厚朴中和厚朴酚与厚朴酚的分离分析方法。采用EP-100-20/45-3-C18色谱柱,流动相为20 mmol/L NaH2PO4-乙腈(10∶90,V/V),泵流速为0.035mL/min,分离电压为-2kV,检测波长为254nm。优化条件下和厚朴酚与厚朴酚在7min内可实现快速分离,其峰面积的相对标准偏差(RSD)均小于3%,检出限分别为0.59、0.53μg/mL。该方法样品和试剂用量少、灵敏度高、重现性好,可用于中药材厚朴中和厚朴酚、厚朴酚的分离检测。     

高效液相色谱法同时测定参茸补酒中芍药苷、阿魏酸的含量

建立一种高效液相色谱双波长法同时测定参茸补酒中芍药苷、阿魏酸的含量。该方法采用Symmetry C18色谱柱(150×3.9mm,5μm),流动相为乙腈 水 冰乙酸(12∶88∶1,V/V),检测波长分别为323nm(通道1)、230nm(通道2)。结果显示:芍药苷、阿魏酸分别在21.4～214.0和1.65～16.50μg·mL-1范围内本法有良好的线性关系;平均回收率分别为98.1%(RSD=1.28%)和97.5%(RSD=1.73%)。本法操作简便,快速,重现性好,结果准确,可作为参茸补酒的质量控制方法。     

HPLC/MS测定蒲公英颗粒中绿原酸、咖啡酸和阿魏酸的含量

建立了同时测定蒲公英颗粒中绿原酸、咖啡酸和阿魏酸3种酚酸物质含量的HPLC-MS方法.样品用含5%甲酸的甲醇溶液超声提取后,在Zorbax Eclipse XDB-C18(2.1mm×150mm,5μm)色谱柱上,以含0.2%甲酸的水(A)-乙腈(B)体系为流动相,进行梯度洗脱,线性梯度洗脱程序为:Omin,5%B;1.5min,10%B;10min,40%B;流速:0.25mL/min;在ESI正离子模式下,采用选择性离子监测方法进行检测.结果显示,绿原酸、咖啡酸和阿魏酸的线性范围分别为0.050～20.0、0.030～20.0和0.100～20.0μg/mL,检出限分别为0.010、0.006和0.020μg/mL.平均加标回收率为96.4%～101.6%,相对标准偏差为1.7%～3.3%.样品在10 h内测定基本不变,可用于蒲公英颗粒的质量控制.     

反向模式-强阳离子交换-反向模式二维色谱法测定人血浆中甲氨蝶呤浓度

建立了反向模式-强阳离子交换-反向模式(Reversed phase-strong cation exchange-reversed phase)二维色谱平台测定人血浆中甲氨蝶呤浓度的方法。样品经三氯醋酸沉淀蛋白后,在ASTON C8一级柱(100 mm×4.6 mm,5μm)上完成初分离,通过六通阀切换,经ASTON SCX中间级(20 mm×4.6 mm,5μm)二次分离和储存,在SAC C8二级柱(100 mm×4.6 mm,5μm)上完成最后分离,并测定。一级柱流动相为10 mmol/L醋酸铵-乙腈(90∶10,V/V,以醋酸调至p H 3.8),流速为1.0 m L/min;中间级流动相为10 mmol/L H3PO4溶液(p H 3.0);二级柱流动相为50 mmol/L醋酸铵-乙腈(87∶13,V/V,以醋酸调至p H 5.2),流速为1.2 m L/min,检测波长306 nm。单次分析时间4 min,线性范围0.09~5.1μmol/L,检出限为0.005μmol/L,日内RSD小于1.8%,日间RSD小于3.5%,相对回收率99.1%~101.25%,绝对回收率85.7%~86.4%。本方法简便、准确,适合日常血药浓度监测和药代动力学研究。     

Luminol-H2O2-纳米银化学发光体系测定阿魏酸

碱性条件下,阿魏酸对Luminol-H2O2-纳米银化学发光体系有较强的抑制作用,基于此,结合流动注射技术,建立了测定阿魏酸的新方法。研究了影响化学发光强度的各种因素,并初步探讨了可能的发光机理。在最佳实验条件下,阿魏酸浓度在1.0×10-8～4.0×10-5mol/L范围内与相对发光强度呈线性关系,检出限(3σ)为2.0×10-9mol/L。对2.0×10-7mol/L的阿魏酸平行测定9次,相对标准偏差(RSD)为2.3%。将该法应用于太太美容口服液中阿魏酸的测定,结果满意。     

加压毛细管电色谱在芎菊上清片中栀子苷及黄芩苷分离检测中的应用

采用加压毛细管反相电色谱技术,建立了一种用于分离检测芎菊上清片中栀子苷和黄芩苷的高效简便新方法。色谱柱为EP-100-20/45-3 C18毛细管柱(总长度45 cm,有效长度20 cm,直径为100μm,ODS填料内径3μm),柱温为25℃,流动相采用20 mmol/L Na H2PO4-乙腈(71∶29),流动相的总流速为0.035m L/min,分离电压为+2.0 k V,检测波长为240 nm。经等度洗脱,栀子苷和黄芩苷可实现快速分离,峰面积的相对标准偏差(RSD)不大于2.8%,回收率为91.9%~101.2%,测得该芎菊上清片中栀子苷的含量为2.616 mg/g,黄芩苷的含量为11.220 mg/g。该方法的选择性好、柱效高、试剂用量少,用于芎菊上清片中黄芩苷和栀子苷的分离检测,结果满意。     

全自动在线固相萃取-二维高效液相色谱与质谱联用测定辣椒油中苏丹红

建立了全自动在线固相萃取-二维高效液相色谱与质谱联用快速测定辣椒油中的苏丹红Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ的方法。样品经乙腈和二氯甲烷萃取后,在一维色谱柱(Acclaim PAⅡ,150 mm×3.0 mm×3μm)上分离出苏丹红,通过阀的分段切换,依次富集在SPE柱(Acclaim 120 C18,10 mm×4.6 mm×5μm)上,在线完成净化和萃取富集;再通过阀切换将它们转移至二维色谱流路,在Acclaim 120 C18色谱柱(100 mm×2.1 mm×2.2μm)上分离检测。一维色谱以水-乙腈-甲醇/四氢呋喃(1∶1,V/V)为流动相,进样体积20μL,0.6 mL/min流速梯度洗脱和紫外-可见检测器(λ=254 nm)监测分离状况;二维色谱以水-乙腈-甲酸/乙腈(1∶1000,V/V)为流动相,0.3 mL/min流速梯度洗脱,采用单四极质谱仪,选择离子方式检测。整个分析流程27 min即可完成。4种苏丹红的保留时间的相对标准偏差均小于0.1%,色谱峰面积的相对标准偏差均小于2%(n=7);在0.6～60μg/L范围内峰面积与进样质量浓度的线性相关系数均大于0.9958;加标回收率为50%～97%;方法检出限均小于0.2μg/L(S/N=3)。测定结果令人满意。