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微波水解衍生高效液相色谱法测定西洋参中的氨基酸 总被引:3,自引:0,他引:3
用微波辅助提取酸水解西洋参中的蛋白质, 对生成的氨基酸进行微波衍生后用高效液相色谱法进行测定.对微波衍生条件和微波水解的条件进行了优化.研究结果表明, 190 ℃, 15 min微波水解得到氨基酸的产率与传统加热水解(110 ℃, 24 h)的结果基本相同.用2,4-二硝基氟苯(DNFB)对氨基酸进行微波衍生, 氨基酸在微波衍生时间大于20 s时, 衍生反应基本完全; 而传统DNFB衍生需在60 ℃水浴加热1 h, 所以微波衍生法明显缩短了氨基酸分析时间.用高效液相色谱法对西洋参根中的氨基酸进行了测定, 结果令人满意. 相似文献
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1前言鱼粉是动物性蛋白质饲料,过去鱼粉中氨基酸测定大多采用氨基酸分析仪以离子交换树酯分离,柱后衍生测定。但氨基酸分析仪价格昂贵,分析时间长。近年来,柱前衍生高效液相色谱法测定氨基酸的技术因其具有衍生步骤简单,速度快,剩余试剂不干扰测定等优点,而有逐渐... 相似文献
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烟草及烟用香精香料中氨基酸的含量对烟草品质有着直接而重要的影响,因此有必要进行准确定性定量分析.氨基酸检测方法可分为直接检测法和间接检测法两大类,间接检测法又可分为柱前衍生法和柱后衍生法.分析了每种方法的优缺点以及常用的衍生化试剂,以期为进行氨基酸分析的研究者提供参考. 相似文献
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氨基酸的分析方法及其应用进展 总被引:35,自引:0,他引:35
从衍生试剂角度,介绍了不同衍生化氨基酸的分析方法,包括离子交换色谱法、高效液相色谱法、气相谱法和毛细管电泳法,以及无需衍生化的直接分析法高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培法,并总结了蛋白质、食品和生理体液样品中的氨基酸分析方法。 相似文献
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葡萄酒中游离氨基酸的高效液相色谱法测定 总被引:5,自引:0,他引:5
采用邻苯二甲醛衍生化法衍生葡萄酒中的游离氨基酸,以反相高效液相色谱法对葡萄酒中18种氨基酸进行了测定,方法简单、迅速,25min即可完成18种氨基酸的分离。精密度及回收率实验结果令人满意。 相似文献
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氨基酸的高效液相色谱分析 总被引:28,自引:0,他引:28
氨基酸的高效液相色谱分析朱曙东,赵皓(徐州医学院生物化学研究室徐州221002)1前言氨基酸分析是生命科学研究中最重要的技术之一。1958年,Spackman等 ̄[1,2]首先介绍了用离子交换色谱与柱后茚三酮衍生结合的方法分析蛋白质水解生成的氨基酸,同时提出了构建氨基酸自动分析仪的细节,建立了传统氨基酸自动分析技术。其后,传统氨基酸分析随着衍生方法、柱载体化学、高效液相色谱(HPLC)仪器学的迅猛发展,分析速度、灵敏度和自动化程度不断提高 ̄[3]。近十年来,反相高效液相色谱(RP-HPLC)与各种柱前衍生... 相似文献
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OPA柱前衍生反相高效液相色谱法测定氨基酸含量 总被引:12,自引:0,他引:12
建立了邻苯二甲醛(OPA)手动柱前衍生反相高效液相色谱法测定样品中氨基酸含量的方法。以邻苯二甲醛(OPA)/3-巯基丙酸(3-MPA)为衍生试剂进行衍生,ODS柱分离,340nm检测,在40min内18种氨基酸全部得到基线分离。测定牛血清白蛋白(BSA)的氨基酸组成和小鼠血清中的游离氨基酸,取得满意的结果。 相似文献
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以3-对羟基苯甲酰喹啉-2-甲醛(CBQCA)为检测痕量氨基酸的柱前衍生试剂,利用高效液相色谱-激光诱导荧光-增强型电荷耦合器件检测器(HPLC-LIF-ICCD)系统,考察了氨基酸衍生和HPLC分离过程中多种因素的影响,建立了HPLC-LIF-ICCD分离检测痕量氨基酸的新方法,并应用于鼠脑微透析液的氨基酸检测.当信噪比为3时,对甘氨酸的质量检出限为5fmol. 相似文献
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以3-对羧基苯甲酰喹啉-2-甲醛为检测痕量氨基酸的柱前衍生试剂,利用高效液相色谱-激光诱导荧光-增强型电荷耦合器件检测器系统,考究了氨基酸衍生和HPLC分离过程中多种因素的影响,建立了HPLC-LIF-ICCD分离检测痕量氨基酸的新方法,并应用于鼠脑微透析液的氨基酸检测。 相似文献
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氨基酸的定量分析在现代食品、饲料、医学等领域都是具有重要意义,较复杂的分析项目。PICO-TAG氨基酸分析法是美国1984年首创的,它采用柱前衍生,反相色谱分离,紫外检测。传统的分析法是采用离子交换分离,柱后衍生,氨基酸专用分析仪检测。两种方法相比,前者 相似文献
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柱前衍生反相高效液相色谱法测定七种中药补养药中氨基酸 总被引:2,自引:0,他引:2
首次分离并测定了七神中药补养药中氨基酸,为其补益作用提供了科学依据.并建立了中药补养药的FMOC-氨基酸色谱测定方法。以FMOC-Cl(9-芴基甲氧基羰酰氯)为柱前衍生试剂,用反相高教液相色谱法测定氨基酸是国内报道甚少的新方法。该法衍生操作简单,衍生反应迅速.衍生物稳定,方法的灵敏度高、分辨率好,整个分析过程简捷,耗用时间短,优于用氨基酸分析仪分析氨基酸。常用的OPA(邻苯二甲醛)柱前衍生法不能直接测定二级胺类的氨基酸,该法则可直接测定一级及二级胺类的氨基酸.同时,该法受样品基质干扰少,从而为衍生物样品的氨基酸分析开辟了广阔前景。本文用该法测定了七种氨基酸,获得了较满意结果,并认为该法对中草药及重要天然植物资源的研究是一个简捷,准确且极其实用的新方法。 相似文献
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建立了以12种同位素标记氨基酸做内标,采用衍生化方法,LC-MS/MS采用MRM方式同时定量30种氨基酸的检测方法。生物样本加入含有同位素内标的甲醇溶液,沉淀蛋白后氮气吹干加入衍生试剂,样本氨基酸与同位素氨基酸内标同步衍生,减小实验误差。选用TC-C18色谱柱,以水-乙腈(均含有0.01%七氟丁酸和0.1%甲酸)为流动相,采用梯度洗脱进行分离,30种氨基酸及其中的同分异构体都能基线分离。选用3200QTRAP型质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测。本方法用于实时监测恶性血液病患者血浆氨基酸谱的变化,可以直接反映机体的代谢及营养状况,对患者的移植成功率及改善移植后患者的生存质量均有重要意义。 相似文献
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新型衍生试剂柱前衍生氨基酸的高效液相色谱分析 总被引:1,自引:1,他引:0
以邻硝基苯磺酰氯为标记试剂,RP-HPLC为分析模式,建立了一种新的氨基酸衍生化方法.通过液质联用对产物进行定性,研究并确定了最佳衍生化条件:衍生温度25 ℃,缓冲液pH9.0,衍生时间10 min.实验建立了20种氨基酸的HPLC分离方法:选用Kromasil C18柱,流动相A为30 mmol/L的NH4Ac溶液(pH 7.5),B相为乙腈;采用梯度洗脱,检测波长275 nm,室温.20种氨基酸在0.025 ~6.4 mmol/L范围内线性关系良好,相关系数在0.998 0 ~0.999 8之间,检出限为0.01 ~0.113 nmol. 相似文献
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将荧光试剂2,3-二甲醛基喹喔啉首次应用到氨基酸的高效液相色谱分离分析中。考察了该荧光试剂与伯胺氨基酸衍生反应的pH值、比例、反应时间等影响因素,确定衍生反应的最佳条件为:100 mmol/L硼砂缓冲液(pH 9.5),二巯基乙醇、衍生试剂与氨基酸的比例为9∶3∶1,室温下反应5 min。采用C18色谱柱,经二元梯度洗脱,荧光检测,17种伯胺蛋白氨基酸得到较好分离。氨基酸的浓度在0.01~1.00 mmol/L范围内与其衍生物峰面积呈较好的线性关系,氨基酸衍生物的检出限为0.02~0.07μg/L。应用该方法对麦冬中游离氨基酸的含量进行测定,结果满意。此方法快速,高效,灵敏度高,精密度好。 相似文献