胶囊固定化辣根过氧化物酶酶促体系引发丙烯酰胺聚合研究

研究了以海藻酸钠／壳聚糖／海藻酸钠为囊壁材料的胶囊固定化辣根过氧化物酶的制备及其影响因素,并将肢囊固定化辣根过氧化物酶／乙酰丙酮／H2O2酶促体系用于引发丙稀酰胺的聚合。结果表明,作为囊壁材料之一的壳聚糖的平均分子量以1万左右为宜,以柠檬三酸钠溶液为溶芯荆的溶芯时间控制在2～4min时,固定化率可达60％,相对于游离酶,其相对活力约为60％。胶囊固定化辣根过氧化物酶／乙酰丙酮／H2O2酶促体系可引发丙稀酰胺的聚合。     

固定化多酶级联反应器

多酶级联反应在生命活动过程中发挥着重要作用。固定化多酶级联反应器是将不同功能的酶通过物理化学或生物手段固定于特定载体上,以之模拟生物体内多种酶协同作用方式促使底物发生降解和转化等反应的新型仿生催化技术。该技术具有固定化酶的稳定性、可重复利用以及酶级联的高效协同催化等优点,近年来在生物传感、模拟生物学以及生物转化等领域得到越来越多的关注。本文从多酶级联反应原理、反应器制备、级联反应的影响因素及应用等方面对近年来固定化多酶级联反应器的进展进行详细评述,并展望其发展前景。     

壳聚糖固定L-天门冬酰胺酶的研究

研究了以壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂，固定化Ｌ－天门冬酰胺酶的最适条件，并对固定化天门冬酰胺酶的理化性质进行了初步探讨。分别从不同固定化程序、缓冲液及保护剂等方面进行了固定化天门冬酰胺酶的条件优化；固定化酶的活力回收可达２０％左右。固定化酶的最适范围变宽，由游离酶的最适ｐＨ＝４～６变为ｐＨ＝６～１０。连续使用６次后仍可基本维持固定化酶的活力。固定化酶对胃蛋白酶的水解性也较游离酶大大提高。     

琼脂固定化过氧化氢酶的催化活性

采用琼脂包埋法对过氧化氢酶进行固定化,考察了固定化过氧化氢酶催化过氧化氢降解的活性,确定了最佳催化反应条件.结果表明,经琼脂包埋法固定化后,过氧化氢酶仍保留较高的催化活性,其催化过氧化氢分解反应的最佳条件为温度35℃、pH 9.0.与此同时,固定化过氧化氢酶具有更强的温度适应能力和更宽的pH作用范围,并具有一定的重复使用性能.     

壳聚糖酶的研究进展

壳聚糖酶是最近发现的一种专一性降解壳聚糖的新酶。本文概述了壳聚糖酶的分布,理化性质和固定化情况,综述了它的催化降解特异性和分子学研究进展,对它在植物抗性方面的应用作了简要介绍。     

甲醛活化壳聚糖制备固定化l—天冬酰胺酶

研究了以甲醛活化的壳聚糖为载体固定化ｌ－天冬酰胺酶，其活力回收可达到１１３％，比用以戊二醛为交联剂进行固定化的活力回收要高出五倍多。分别从缓冲液的ｐＨ值及甲醛用量等方面进行了固定化ｌ－天冬酰胺酶的条件优化，并且对固定化酶的性质作了探讨。     

游离和溶胶-凝胶固定化甲醛脱氢酶酶促反应动力学的研究

采用溶胶-凝胶法对甲醛脱氢酶进行固定化，酶的包埋率超过了98％．在pH7附近、37℃下，以游离酶和固定化酶作催化剂，NADH为电子供体，进行了甲酸转化为甲醛的酶促反应．游离和固定化甲醛脱氢酶酶促反应都遵循Michaelis-Menten反应机理，用Dalziel提出的双底物酶促反应动力学方程进行拟合．固定化酶酶促反应速率为游离酶酶促反应速率的50％左右．固定化酶的动力学常数φ和米氏常数K高于游离酶，估计是凝胶基质孔中存在扩散效应所致．     

青霉素酰化酶在甲基丙烯酸缩水甘油酯共聚物上的固定化

 用共价键合法将青霉素酰化酶固定化在珠状多孔的甲基丙烯酸缩水甘油酯（GM）共聚物上，研究了固定化反应时间、温度、pH值和酶液用量对固定化青霉素酰化酶的表观活性、表观偶联效率、活性回收及稳定性的影响．将GM共聚物载体加入到磷酸缓冲液（0．1mol／L，pH10．8）与青霉素酰化酶液（每克干载体用酶液1ml）的混合溶液中，在30℃下反应72h，单位质量（干重）固定化酶的表观活性为348U／g，表观偶联效率为66．7％，活性回收为31．7％．     

钛氯活化纤维素固定5’-磷酸二酯酶的研究 Ⅰ.固定化酶的制备和性质

以纤维素为载体,通过四氯化钛活化,可赋予纤维素较好的固酶功能。本文研究了固定化酶的制备条件和性质。当溶液5’-磷酸二酯酶的活力为200—300单位/毫升,经最佳条件固定化后,固定化5’-磷酸二酯酶的活力可达每克3000—3500单位(干基),酶的话力回收可达70—75％,固定化5’-磷酸二酯酶的热稳定性和贮藏稳定性与溶液酶相比有所提高。采用本法固定5’-磷酸二酯溶液酶具有载体制备简单易行、成本低廉、效果好、所用化工原料无毒等特点。     

漆树酶固定化及其性质研究

本文介绍了用过渡金属水合氧化物固定化漆树漆酶的方法。考察了整合法固定漆树酶的最适条件。对固定化前后漆酶的性质进行了比较,并分析了造成固定化酶与游离酶性质差异的原因。     

功能基化聚丙烯酸甲酯固定化青霉素酰化酶

合成了一系列大孔丙烯酸甲酯－二乙烯苯交联共聚物,经酰肼化、叠氨后固定青霉素酰化酶,考察了反应条件对固定化酶的影响,当交联剂用量为３０％,至孔剂量为１３０％,混合致孔剂（正庚烷与乙酸乙酯）中正庚烷的质量分数为５５％时,所制的载体经活化后得到的固定化酶酶活较高,为９５ｕ／ｇ（湿）,用分批式反应器连续水解青霉素Ｇ钾盐,使用６３批次后仍保留酶活７９．４％。     

蜗牛酶在聚(N-异丙基丙烯酰胺)中的固定化及应用

将蜗牛酶固定到聚(N—异丙基丙烯酰胺)上得到一种热可逆的固定化酶。研究了固定化酶的性能和对几种不同底物的作用情况。结果表明蜗中酶对羧甲基纤维素钠、甲壳胺和可溶性棉花都有较好的降解活性。     

基于多级孔金属有机骨架构筑HRP固定化酶反应器及其染料降解应用

以不稳定的Cu-金属有机骨架(Cu-MOF)为模板剂, 利用自组装模板法制备多级孔Zr-MOF, 再通过物理吸附法在多级孔Zr-MOF的介孔孔道中负载辣根过氧化物酶(HRP)构筑了HRP@Zr-MOF固定化酶反应器. 通过改变孔径调节剂苯甲酸(HBC)的浓度调控孔径大小, 研究了孔径对固定化酶反应器催化活性的影响; 考察了固定化体系缓冲溶液pH值、 固定化时间及温度对固定效果的影响. 以HRP催化降解结晶紫染料为模型反应, 探讨了HRP@Zr-MOF的操作稳定性和重复使用性. 结果表明, pH=3.0、 固定化时间为60 min、 固定化温度为30 ℃是固定化HRP的最佳条件, 固载量最高可达61.6 mg/g. 与游离酶相比, HRP@Zr-MOF固定化酶反应器表现出更好的热稳定性、 酸碱稳定性、 H₂O₂稳定性和储存稳定性; 重复使用10次后, HRP@Zr-MOF的催化活性仍能保持62.3%. 将HRP@Zr-MOF应用于实际水样中结晶紫染料的催化降解, 在5 min内降解率高达90%以上, 表现出非常高效的催化效率.     

氨基酰化酶的固定化及其对D,L—蛋氨酸的光学拆分

本文用大孔网高分子载体对氨基酰化酶进行固定化,并系统地研究了温度、pH值、离子浓度、底物浓度、激活离子及蛋白质变性剂对固定化酶活力的影响。由于载体的物理性质和功能基较适宜,因而吸附蛋白质的容量大,使固定化酶的活力和活力回收率都高。用固定化酶柱对D,L—蛋氨酸进行连续拆分,酶柱使用周期长,稳定性高。拆分的产物用离子交换法进行分离与精制后,可制得纯度高,产率理想的L—蛋氨酸盐酸盐。     

超顺磁性氧化石墨烯复合材料固定辣根过氧化物酶催化去除氯酚

采用超声辅助共沉淀法成功地将磁性Fe3O4纳米颗粒沉积在氧化石墨烯表面,利用透射电镜、磁滞回归曲线和X射线光电子能谱对材料进行了表征。将该材料作为载体固定辣根过氧化物酶,考察了固定化酶催化2-氯酚、4-氯酚和2,4-二氯酚降解反应,研究了溶液pH值、反应温度、反应时间、H2O2和氯酚浓度以及固定化酶用量对酚类物质去除率的影响。基于取代基数量和位置不同,去除率排序为2-氯酚<4-氯酚<2,4-二氯酚。另外,采用GC-MS研究了降解过程中的氧化产物。固定化酶的生化性质研究表明,固定化酶比游离酶具有更好的储存稳定性、pH稳定性和热稳定性。经过4次循环利用,固定化酶仍保留66%的活性,说明磁性纳米材料可以分离回收并重复利用,在污水处理领域具有应用前景。     

固定化酶树脂进行酶固定化反应条件的研究

本文通过研究固定化青霉素酰化酶的酶活力,考察了固定化酶反应条件即缓冲溶液浓度、pH值、酶浓度以及反应时间等对固定化酶活力的影响。研究了反应条件与固定化酶活性之间的影响规律,从而为进一步优化固定化酶条件、提高固定化酶活性提供了实验依据与参考。     

降解萘的黄杆菌ND3菌株的固定化研究

用海藻酸盐做载体，用包埋法将降解萘的黄杆菌ＮＤ３菌株固定化，对固定化菌的制备条件及固定化菌降解萘的条件作了筛选，在适宜条件下，固定化黄杆菌连续培养４８ｈ后，对萘的降解率可达９８％以上。     

介孔材料及其改性材料中酶的固定化研究进展

介孔材料具有高的比表面积、高的孔体积、均一可调的孔径、有序的孔道结构以及易于表面功能化等优点,可广泛用于酶的固定化.介孔材料中酶的固定化方法主要包括物理吸附、物理包埋和化学吸附.综述了介孔材料中不同固定化酶方法的优缺点、酶的固定化影响因素及固定化酶的应用,并对固定化酶的发展前景进行了展望.     

纳米花型酶-无机杂化固定化酶研究进展

酶是一种绿色高效的生物催化剂,被广泛地应用于工业生产中,为了更好的提升游离酶的性能,酶固定化技术应运而生。然而,与游离酶相比,固定化酶活性下降以及传质受限一直是酶固定化技术亟待解决的关键问题。作为一种新型酶固定化技术,纳米花型酶-无机杂化固定化酶因具有高比表面积、高酶活性和高催化效率,且制备简单,绿色无污染受到广泛关注。本文综述了近年来纳米花型酶-无机杂化固定化酶的研究进展,根据纳米花型酶-无机杂化固定化酶的形成特点,将其分为单酶纳米花、双酶纳米花和负载型纳米花。阐述了纳米花型酶-无机杂化固定化酶的制备过程和形成机理并对纳米花型酶-无机杂化固定化酶在食品工业和检测领域的应用进展做出总结。最后,对纳米花型酶-无机杂化固定化酶的发展前景做出展望。     

酶生物传感器中酶的固定化技术

综述了近年来国内外酶生物传感器的进展,介绍了制作酶生物传感器的关键技术——酶的固定化。固定化方法主要有吸附法、包埋法、共价键合法和交联法。固定化材料分为无机材料、有机聚合物材料、凝胶以及生物材料等。探讨了固定化方法和固定化材料对酶的固定化及酶生物传感器性能的影响,并结合自己的工作展望了酶生物传感器的发展方向和趋势。