介质的物化性质对PstI和PstI^＊活性的影响

利用限制性核酸内切酶PstI在不同的有机介质中的催化反应。研究了水含量、相对粘度，介电常数和渗透压等介质的物化性质对PstI原活性和星号活性的影响。结果表明这4种物化性质对PstI原活性和星号活性的影响恰好相反。     

限制性核酸内切酶PstⅠ星号活力的研究

研究了温度、酶浓度、反应时间、几种有机溶剂等因素对PstⅠ星号活力的影响,并在有利于星号活力的反应条件下测定了星号活力及原活力的Km 分别为1.46×10- 7 m ol/L和1.02×10- 8 m ol/L,Vm ax 分别为2.86×10- 16 m ol/s和3.06×10- 15 m ol/s.     

利用GpC DNA甲基化酶M.CviPI高效表达限制性内切酶Pst Ⅰ

源自原核生物"限制-修饰"系统的限制性内切酶是生命科学研究的重要工具酶.将小球藻Chlorella病毒NYs-1的GpC DNA甲基化酶M.CviPI导入大肠杆菌表达宿主ER2566,高效表达限制酶PstⅠ的基因,再通过简便的Ni亲和、阴离子交换两步层析纯化获得重组限制酶PstⅠ.结果表明,该重组限制酶的蛋白纯度达到90%以上,比活力达到640 000U·mg~(-1),并具有快速酶切性能,能够在15min内完成1μg底物λDNA的消化,达到商业化限制酶PstⅠ的质量标准.     

K、AI对NiCo_2O_4尖晶石复合氧化物催化性能的影响

本文采用共沉淀法合成了NiCo_2O_4尖晶石复合氧化物.考察了掺K、Al对NiCo_2O_4还原性能、电导性能及对乙醇的氧化活性的影响.结果表明,NiCo_2O_4被H_2还原的过程为:掺K使NiCo_2O_4易被还原,掺Al则相反.对乙醇的完全氧化活性顺序为:电子激活能顺序为:     

海洋放线菌XS904活性代谢产物的初步研究

对海洋放线菌XS904活性代谢产物理化性质进行初步研究.以枯草杆菌为指示菌,以抑菌活性为指标,测定发酵液最小抑菌浓度;用不同温度、pH处理,了解活性物质的稳定性;用有机溶剂对活性物质萃取和溶解,并用纸层析对活性物质进行初步分类.发酵液抗菌物质的最小抑菌浓度为0.78%,对温度敏感,在酸性和中性条件下稳定,可被三氯甲烷萃取,能溶于水、甲醇、乙醇、丙酮、乙醚,经纸层析初步鉴定为一类碱性抗生素.     

壳聚糖对番茄叶霉病菌的抑制作用

以番茄叶霉病菌为实验菌种,用含毒介质法系统研究了壳聚糖的脱乙酰度、分子量、浓度、环境pH值及溶剂等因素对壳聚糖抑菌活性的影响.结果表明,壳聚糖对番茄叶霉病菌具有明显抑制作用;在研究范围内,随浓度的增加和环境pH值降低,抑菌活性增强;较理想的溶剂是乳酸和醋酸;脱乙酰度为86%、分子量为213×103的壳聚糖抑菌效果较好;0.2%的壳聚糖与三唑酮等农药抑菌效果相同.     

二环戊二烯基钛(IV)配合物的合成及表征 Ⅰ———水杨酸和阿斯匹林茂钛配合物的合成及表征

选择具有抗菌、抗氧化或抗炎镇痛的药物———水杨酸(HLⅠ)、阿斯匹林(HLⅡ)与具有抗癌活性的二氯二茂钛(Cp2Ti Cl2)在非水介质中反应, 得到两种具有潜在药理活性的茂钛配合物 :Cp2Ti(LⅠ)2,Cp2Ti(LⅡ)2.经过元素分析、摩尔电导、核磁共振氢谱与碳谱、红外及紫外光谱等测试, 表明水杨酸、阿斯匹林均与二氯二茂钛形成含 Ti-O 键的单齿配位的羧酸二取代二茂钛配合物.     

二水一碘羧酸根合铂(Ⅱ)混配配合物的合成及其抗肿瘤活性

首次合成四种二水一碘羧酸根合铂类配合物[Pt(Ⅱ)(H2O)2 Ⅰ(OCOR)](Ⅰ～Ⅳ)(R=-C6H4NO2,-CsH4NH2,-CH2Cl,-CHCl2).用元素分析、摩尔电导、差热热重分析、红外光谱、紫外光谱和核磁共振氢谱对其进行了表征.体外抗肿瘤活性表明,四种配合物对所试的肿瘤细胞表现出较低的活性,只有在10μM浓度下配合物才仅对某些肿瘤细胞有一定的增殖抑制作用.     

Ni／sepiolite催化剂的改性研究——Ⅰ.助剂的改性

以海泡石为载体,镍为活性组分,用浸渍法制备了一系列含不同助剂的Ni/sepiolite催化剂。以苯加氢为探针反应,用二硫化碳中毒法系统地考察了助剂对镍催化剂的改性机制。结果表明,助剂的加入使镍催化剂苯加氢活性提高,活性中心原子数增加,活化络合物的活化焓和活化熵发生变化,助剂的影响既有电子效应又有几何效应,但以电子效应为主。     

Cu-Ag /Y-A120催化剂上苯和丙酮的完全氧化

本文考察了Y-AI刃:负载Cu-Ag双金属及其单金属催化剂对笨和丙酮的氧化活性以及热处理沮度对其结构和催化氧化活性的影响.结果表明，少全Ag的添加能明显提高催化剂对苯和丙酮的完全氧化活性，其活性大小次序为:Cu-Ag/Y-A1必3> Cu /Y-A1z0, > Ag /Y-A1刃，.同时还发现，热处理温度对催化剂的结构和氧化活性有明显的影响，Ag的存在，在一定程度上提高了催化剂的热稳定性.     

乌骨鸡活性肽对体外非酶糖基化的抑制作用

采用正交实验优化了体外非酶糖基化反应体系,体系中加入不同浓度的乌骨鸡活性肽I、Ⅱ37 ℃孵育,同时以肌肽为阳性对照,观察乌骨鸡活性肽对非酶糖基化反应的影响.通过测定预定时间体外非酶糖基化体系的吸光度和荧光值计算乌骨鸡活性肽对非酶糖基化反应的抑制率和对非酶糖基化终产物生成的抑制率.结果表明乌骨鸡活性肽Ⅱ对体外非酶糖基化反应和非酶糖基化终产物的生成均具有较强的抑制作用.     

莲子心多糖的提取、分离和抗氧化活性研究

干燥的莲子心经机械粉碎、乙醇脱脂、沸水提取、乙醇沉淀及中性酶和Sevag法除蛋白得其粗多糖,经DEAE-Cellulose-32阴离子交换和SephacrylTM S-200凝胶过滤层析得组份ELPS-Ⅰ和混合物Ⅱ,Ⅱ再经过DEAE-Cellulose-32柱层析得组份ELPS-Ⅱ.GC-MS法测定粗多糖、ELPS-Ⅰ和ELPS-Ⅱ的中性糖组成.凝胶过滤色谱(GPC)法测得ELPS-Ⅰ和ELPS-Ⅱ的重均分子量分别为4.97×104 Da和2.96×106 Da.β-胡萝卜素漂白实验结果显示莲子心粗多糖具有显著的抗氧化活性(维生素C作为阳性对照).     

二环戊二烯基钛(IV)配合物的合成及表征Ⅰ——水杨酸和阿斯匹林茂钛配合物的合成及表征

选择具有抗菌、抗氧化或抗炎镇痛的药物———水杨酸（ＨＬⅠ）、阿斯匹林（ＨＬⅡ）与具有抗癌活性的二氯二茂钛（Ｃｐ２ＴｉＣｌ２）在非水介质中反应,得到两种具有潜在药理活性的茂钛配合物：Ｃｐ２Ｔｉ（ＬⅠ）２,Ｃｐ２Ｔｉ（ＬⅡ）２．经过元素分析、摩尔电导、核磁共振氢谱与碳谱、红外及紫外光谱等测试,表明水杨酸、阿斯匹林均与二氯二茂钛形成含ＴｉＯ键的单齿配位的羧酸二取代二茂钛配合物     

二甲基亚砜对羊软骨细胞存活率和SDH活性的影响

以羊软骨为实验材料,用不同体积分数的二甲基亚砜（Me2SO）作为保护剂,在4、-20、-30、-70℃温度下研究对羊软骨细胞存活率和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响.实验结果表明,Me2SO对细胞的存活率和SDH活性的影响受温度和体积分数的影响较大.在4~20℃时,Me2SO作为单独冷冻保护剂的最佳初始体积分数为10%~20%.在-20~-70℃时,Me2SO作为羊软骨细胞保护剂的最佳应用体积分数为10%~45%.     

Cu-Ag/γ-Al_2O_3催化剂上苯和丙酮的完全氧化

本文考察了γ-Al_2O_3负载Cu-Ag的双金属及其单金属催化剂对苯和丙酮的氧化活性以及热处理温度对其结构和催化氧化活性的影响.结果表明,少量Ag的添加能明显提高催化剂对苯和丙酮的完全氧化活性,其活性大小次序为:Cu-Ag/γ-Al_2O_3>Cu/γ-Al_2O_3>Ag/γ-Al_2O_3.同时还发现,热处理温度对催化剂的结构和氧化活性有明显的影响,Ag的存在,在一定程度上提高了催化剂的热稳定性.     

人t-PA P区在大肠杆菌中表达及其活性研究

用PCR方法获得编码人组织型纤溶酶原激活物（tissure-typeplasminogenactivator,t-PA）C端P区肽段的DNA,并经测序证实,长810bp,含有全部的t-PA的丝氨酸蛋白酶编码序列.将这段序列克隆到表达载体pQE30中转化大肠杆菌JM109菌株,经SDS-PAGE检测转化菌株中表达出分子量约29×103的蛋白,用纤维平板法测定激活纤溶活性,结果表明表达的t-PA蛋白C端P区具有很强的激活纤溶蛋白酶原的活性.证实t-PA蛋白C端P区的酶结构区的功能是独立的,其生物活性不受其它区域影响．     

昆虫细胞凋亡蛋白酶caspase-1的表达纯化及活性分析

依赖于天冬氨酸的半胱氨酸蛋白酶(caspase)在细胞凋亡途径中起着不可替代的关键酶作用.本研究采用原核表达载体pET32a表达和纯化了家蚕细胞Bm-caspase-1及粉纹夜蛾细胞Tni-caspase-1蛋白酶,序列分析表明二者具有相同的内部剪切识别序列,且酶活性位点均为QACQ↓G.纯化获得大量可溶性蛋白酶,Western-blotting分析表明Bm-caspase-1在大肠杆菌中已自我剪切活化,而Tni-caspase-1没有自我剪切,无酶活性;活性Bm-caspase-1蛋白酶对caspase-3特异性底物Ac-DEVD-AMC的降解酶活性可被Z-VAD-FMK呈剂量依赖性抑制,半抑制浓度约20nmol/L.此外,活性Bm-caspase-1蛋白酶能够转活化无活性的Tni-caspase-1蛋白酶原.结果揭示了昆虫细胞caspase同样具有与哺乳动物细胞caspase相似的底物降解活性并可相互剪切激活,为进一步研究昆虫细胞凋亡的分子途径奠定了基础.     

基于CdS光电活性材料的无标记凝血酶生物传感器的制备及其性能

基于凝血酶(thrombin,TB)对纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)分子中特异性位点的剪切作用,采用光寻址电化学策略,构建了基于CdS光电活性材料的无标记凝血酶生物传感器,实现对凝血酶无标记、简便、快速的检测.通过扫描电子显微镜(SEM)、紫外-可见分光光度法(UV-Vis)、X 射线衍射(XRD)及X射线...     

乌药提取物的抗肿瘤及抗氧化活性

使用不同极性的有机溶剂分离得到了5种（石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水）乌药提取物,并采用多种实验方法研究了其抗肿瘤及抗氧化活性.抗肿瘤活性研究结果显示：乌药石油醚萃取物对供试4种人癌细胞的细胞毒性最强;而HepG2细胞对乌药石油醚部位的细胞毒性最为敏感,半数抑制率（IC50）为（71.9±1.1）mg·L-1;乌药石油醚萃取物是通过诱发细胞凋亡来达到其体外抗HepG2作用的.抗氧化活性研究结果显示：乌药乙酸乙酯萃取物具有最强的体外抗氧化能力.     

利用共振镜生物传感器研究牛胰脱氧核糖核酸酶Ⅰ与DNA的相互作用

利用IAsys共振镜生物传感器研究了牛胰脱氧核糖核酸酶Ⅰ(Bp DNase Ⅰ)与DNA的相互作用.求出了不同温度下,Bp DNase Ⅰ与DNA相互作用的结合和解离的动力学速率常数(Kass,Kdiss)和平衡常数(KA,KD),并且计算出了该过程的热力学参数(ΔH和TΔS).在298 K时该结合过程的KA=(3.521 2±0.232 4)×105(mol/L)-1,KD=(2. 852 4±0. 188 3)×10-6 mol/L,TΔS 为(84. 860±3. 712) kJ/mol,该结合过程的ΔH 为(53.222±3.548) kJ/mol,是一个熵驱动的过程.本文还对Mg2 浓度对Bp DNase Ⅰ与DNA的相互作用的影响进行了研究.在相同温度下,Bp DNase Ⅰ与DNA的结合作用在有Mg2 存在时较无Mg2 存在时高约30.5 倍,表明Mg2 能极大地提高Bp DNase Ⅰ与DNA的结合能力.