毛细管区带电泳分析阿片受体和抗独特型抗羟甲芬太尼抗体

应用毛细管区带电泳（ＣＺＥ）分析测定阿片受体、抗独特型抗羟甲芬太尼抗体等生物大分子样品。熔融石英毛细管柱为６０ｃｍ×１００μｍｉ．ｄ．（从进样到检测器长度为５０ｃｍ）,以硼砂－氢氧化钾为缓冲液。结果表明缓冲液的ｐＨ影响ＣＺＥ对阿片受体的分析,当ｐＨ为９．０时分析效果最理想,重现性良好,测得的两个主峰与同批样品进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析得到的两个条带相符。用ＣＺＥ分析抗独特型抗羟甲芬太尼抗体（ＩｇＧ）,表明用ＰｒＯｔｅｉｎＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和色谱分离得到部分纯化的ＩｇＧ,迁移时间不同于对照豚鼠的ＩｇＧ。     

抗独特型抗体在小分子物质免疫检测中的应用

抗独特型抗体是机体针对抗体可变区所产生的特异性抗体.基于其独有的性质,它在小分子物质免疫检测中可以替代有毒标准品建立无毒化检测技术; 也可以用来建立新的免疫检测模式,特别是非竞争模式,从而提高传统免疫检测技术的特性;还能够在多残留检测中发挥优势.抗独特型抗体制备困难是制约其应用的瓶颈,但噬菌体展示库技术为解决此问题提供了一条有效途径.     

噬菌体展示技术制备甲氧基有机磷农药抗独特型抗体

抗独特性抗体可用于建立针对农药等小分子物质的非竞争免疫检测模式.本研究将甲氧基有机磷农药通用半抗原(S-羧甲基-O,O-二甲基二硫代磷酸酯,CMP)连接至琼脂糖凝胶,进而对甲氧基有机磷农药广谱特异性抗体进行纯化;以纯化抗体为固相抗原,以人源scFv抗体库(Tomlinson I+J)为抗体源,进行抗独特型抗体的筛选;利...     

羟甲芬太尼对映异构体的^1H NMR及立体化学

本文对强效镇痛剂羟甲芬太尼(OMF)八个对映异构体中的其中四个, 即(-)-cis-(3R,4S,2'R)-OMF (1), (+)-cis-(3-R,4S,2'S)-OMF (2),(+)-trans-(3S,4S,2'R)-OMF (3), 和(+)-trans-(3S,4S,2'S)-OMF (4)进行了^1HNMR研究, 归属了所有的共振谱线。对哌啶环质子间偶合常数的分析表明, 所有顺式和反式异构体中的哌啶环都呈现相同的椅式构象。在顺式异构体中3-甲基位于直立键, 而4-N-苯基丙酰胺基位于平伏键, 反式异构体中它们均位于平伏键。讨论了3-甲基和4-N-苯基丙酰胺基的立体取代对NMR的影响, 在顺式异构体中4-N-苯基丙酰胺基的构象相对固定, 而在反式异构体中则较为自由。     

GPC-GC-MS测定动物组织中甲羟孕酮和乙酸甲羟孕酮的残留量

样品用乙酸乙酯提取,提取液过凝胶渗透色谱,溶液浓缩后,再用C18小柱净化,洗脱液吹干后,经七氟丁酸酐衍生,气相色谱-质谱选择离子定量,两组分分离良好。在兔肉、猪肾和鱼肉样品中进行添加试验,添加水平为1~5μg/kg时,回收率为72.7%~113.8%,测定结果的相对标准偏差为3.90%~12.21%(n=10),检测限为1μg/kg。     

磺胺间甲嘧啶单克隆抗体的制备

研究了磺胺间甲嘧啶单克隆抗体的制备。结果表明,得到三株单抗,其中3F7株抗体效价最高,细胞培养上清为1∶5.2×102,腹水为1∶5.5×105。通过交叉反应试验可知,单抗具有较好的特异性。     

芬太尼类化合物与阿片μ受体相互作用的分子对接与分子动力学模拟

采用分子对接和分子动力学(MD)模拟方法研究了芬太尼类化合物与阿片μ受体的相互作用机制.先用AutoDock4.0程序将芬太尼类化合物对接到同源模建的阿片μ受体结构中,再用GROMACS程序包在水溶液体系中分别对12个芬太尼激动剂和阿片μ受体蛋白复合物进行了MD模拟研究,优化对接复合物的结构,最后利用MM-PBSA方法,在APBS程序中计算芬太尼类衍生物与阿片μ受体的结合自由能,计算出的受体配合物结合常数(Ki)与其实验值吻合较好,并预测了化合物的活性排序.结果表明,复合物蛋白结构与空载受体蛋白结构有较大差异,特别是胞内区IL2、IL3和跨膜区段TM4骨架构象变化较大,不同的化合物对受体结构影响也有差异,活性较好的化合物会增加蛋白特定区域结构的柔性.芬太尼类化合物可能是通过和受体结合后诱导阿片μ受体构象转变为活性构象,引起一系列的信号传导激活G蛋白,从而引发生理效应.     

有机化合物的新型极谱催化波 ——KIO3存在下醋酸甲羟孕酮的极谱催化波研究

在水和DMF两种介质中,研究了醋酸甲羟孕酮（MPA）的极谱行为和极谱催化波机理.结果表明,在0.2 mol/L HAc-NaAc(pH=}5.0)缓冲水溶液中,MPA的C=C双键首先经单电子单质子还原产生质子化的中间体自由基HMPA     

根据受体结构进行药物设计研究

计算机辅助药物设计可区分为直接和间接药物设计方法。如果受体蛋白的三维结构已经阐明 ,便可根据与配体的作用位点而设计相应新药结构 ;如果受体的三维结构尚不知 ,则从与受体相作用的一系列配体以推测受体的作用位点。本文介绍本实验室应用这类方法试行设计新药的研究。     

快速伏安免疫法研究地高辛、洋地黄毒甙半抗原和抗地高辛单克隆抗体

在含碘乙酸的氯化铵缓冲液中,地高辛和洋地黄毒甙可用单扫示波极谱法检测。抗地高辛单克隆抗体对地高辛和洋地黄毒甙的特异性免疫化学反应,和与其它甾体化合物的交叉反应,可由同一体系中直接测量此类半抗原峰电流受抑制的程度进行鉴别。建立了研究抗地高辛单克隆抗体特征的快速均相伏安免疫法。     

硼酸根与甲阶酚醛树脂中酚羟基和邻位羟甲基的螯合反应

通过溶液pH值的测定和红外光谱分析,研究硼砂与甲阶酚醛树脂水溶液的反应表明：在水溶液中硼砂能与甲阶酚醛树脂很快地发生反应;硼砂水解产生的B／（OH)4^-,以定量的方式与树脂中酚羟基和邻位羟甲基以共价配键相结合,形成具有四面体结构的螯合物,并放出H^ 离子。     

高效液相色谱法测定盐酸羟甲唑啉滴鼻剂的稳定性

The stability of oxymetazoline hydrochloride nasal solution was determined by HPLC and the initialaverage rate method. The procedure was carripd out on a 250mm×4. 6mm column with 5μm ODS using wa-ter-methanol-sodium acetate solution(lmol/L)-glacil acetic acid-triethylamine as mobile phase,with UV de-tection at 280nm. The elution was performed at the flow rate of lmL/min. The results show that the expirydate of this preparation is about three years at room temperature.     

抗EGF受体的单克隆抗体对人鼻咽癌及其他肿瘤细胞生长的影响

本文报道三种抗EGF受体的单克隆抗体(MoAbs)用于裸鼠移植入肿瘤细胞的生长抑制研究。注射MoAbs 3和176分别抑制了低分化鼻咽癌细胞系CNE-2和上皮样癌细胞系A431的生长,而相同的抗体用于宫颈癌细胞系HeLa时,则无抑制作用.用~(125)I-EGF结合试验测定了CNE-2和A431细胞膜EGF受体的含量分别为1.3×10~5/细胞(Kd 7.7×10~(-8)mol/L),1.4×10~6/细胞(Kd 2.4×10(-9)mol/L)。实验结果亦显示MoAbs 3和176分别可竞争性地抑制EGF与其受体的结合,这两种抗体同时显示良好的抑瘤效应,而不能抑制EGF与其受体结合的MoAb101,则抑瘤效果亦差。上述MoAbs在体外有补体存在时不具备杀伤CNE-2及A431等肿瘤细胞。     

有机化合物的新型极谱催化波--KIO3存在下醋酸甲羟孕酮的极谱催化波研究

在水和DMF两种介质中 ,研究了醋酸甲羟孕酮 (MPA)的极谱行为和极谱催化波机理 .结果表明 ,在 0 .2mol/LHAc_NaAc (pH =5 .0 )缓冲水溶液中 ,MPA的CC双键首先经单电子单质子还原产生质子化的中间体自由基HMPA·;HMPA·继续以单电子单质子方式进一步还原 ,同时伴随有HMPA·与中性MPA分子生成二聚体自由基HMPA·MPA·的化学反应 .在 0 .1mol/LTBA·BF4的DMF溶液中 ,MPA的CC双键还原是连续的 2步单电子还原 ,2步分别为MPA和中间体自由基MPA· -的还原 ,没有二聚化反应发生 .上述过程产生的均是MPA的还原波 .在氧化剂KIO3 存在下 ,MPA还原的中间体自由基HMPA·或MPA· -被KIO3 及其中间氧化态质点化学氧化再生MPA ,产生了极谱催化波 .这种由有机化合物在电极上自身还原、通过化学反应氧化有机中间体自由基再生原有机化合物的催化波是一种新型极谱催化波 .在上述条件下 ,MPA催化波的灵敏度比其还原波高一个数量级 ,可用于分析目的 .求得催化反应的表观速率常数Kf=1 .7× 1 0 3 mol·L-1·s-1.     

不同相对分子质量羟乙基纤维素对甲维盐微胶囊制备的影响

采用原位聚合法以三聚氰胺-甲醛树脂为壁材制备了甲维盐微胶囊。 探讨了不同黏均相对分子质量羟乙基纤维素作为乳化剂对微胶囊表面形貌、粒径及其分布、包覆率与载药量的影响,对使用不同黏均相对分子质量羟乙基纤维素作为乳化剂制备的微胶囊的释放性能进行了表征。 结果表明,以相对分子质量较小的羟乙基纤维素制备的微胶囊外形规则、致密且无黏连现象。 随羟乙基纤维素黏均相对分子质量的增加所得微胶囊的平均粒径及粒径分布逐渐增大,包覆率与载药量逐渐减小。 释放性能的研究表明,采用相对分子质量较小的羟乙基纤维素制备的微胶囊的释放性能较好。     

羟甲香豆素在刚果红功能化水溶性多壁碳纳米管膜电极上的电化学行为

水溶性多壁碳纳米管膜;羟甲香豆素;化学修饰电极;表面活性剂     

毛细管区带电泳检测抗EGFR抗体的电荷异质性

建立了抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体电荷异质性的检测方法。采用毛细管区带电泳(CZE)模式,考察了分离缓冲液浓度和pH值、添加剂、分离电压、毛细管温度对主峰与酸碱性变体分离度的影响。以380mmol?L-16-氨基己酸(EACA,pH6.0)为分离缓冲液,0.1%羟丙基甲基纤维素(HPMC)和1.9mmol?L-1三亚乙基四胺(TETA)作为添加剂,分离电压25kV,分离时间8min,毛细管温度20℃条件下,电荷变体能够得到良好分离,且在0.1~1mg?mL-1范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,主成分、酸、碱变体1和碱变体2的定量下限(LOQ)分别为30.0,150.2,125.2,93.3μg?L-1,重复性和中间精密度RSD值小于2%,回收率为95.4%~105.4%。该方法简单、快速、成本低,可以满足抗EGFR抗体的电荷异质性检测要求。     

满江红鱼腥藻单克隆抗体的制备和应用研究

建立了40株分泌抗满江红鱼腥藻特异性单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。 根据免疫荧光抗体试验,40个McAb分为8个类型。这8类McAb将采自世界名地的195个品种(系)满江红的体内鱼腥藻分为8个抗原群。 McAb对人工萍藻共生体和杂交满江红体内鱼腥藻的鉴定结果表明,人工萍藻共生体的鱼腥藻保持其在供体满江红叶腔中的抗原性,杂交满江红体内鱼腥藻保持其母本满江红体内鱼腥藻的抗原性,二者都不因蕨体遗传性状的改变而发生抗原结构变异。