醇脱氢酶在反胶束溶液中的酶学性质研究

以十六烷基三甲基溴化铵(CATB)-辛烷-戊醇反胶束体系对醇脱氢酶(ADH)进行固定化,考察了pH、含水量、表面活性剂和助溶剂浓度对ADH固定化的影响。对游离酶和固定化酶的催化动力学性质研究表明:酶促反应的最适pH值均为9.0,最适温度分别是28℃和20℃,对乙醇的米氏常数分别为8.8mmol/L和5.5mmol/L。25℃时,游离酶存放120min约失活90%,而固定化酶仅失活30%,表明反胶束固定化ADH具有较好的热稳定性。     

反胶束固定化乳酸脱氢酶的催化动力学性质研究

以十六烷基三甲基溴化铵(CATB)-辛烷-己醇反胶束体系对乳酸脱氢酶(LDH)进行固定化,试验了含水量、CTAB和己醇浓度对LDH固定化的影响。对游离酶和固定化酶的催化动力学性质研究表明:酶促反应的最适pH值分别为9.2和9.5,最适温度分别是37℃和43℃,对乳酸的米氏常数Km分别为1.4 mmol/L和2.3mmol/L。30℃时,游离酶存放2 h,约失活50%,而固定化酶仅失活10%,表明反胶束固定化LDH具有较好的热稳定性。     

两种反胶束固定化酶的催化性质研究

探讨十六烷基三甲基氯化铵(CATC)-戊醇-辛烷反胶束体系固定化乳酸脱氢酶(LDH)和醇脱氢酶(ADH)的催化作用。试验了含水量、表面活性剂以及助溶剂浓度对于酶固载量的影响。对游离酶和固定化酶催化性质研究表明:LDH酶促反应的适宜p H值分别为9.2和9.0,适宜温度为51℃和29℃,米氏常数15mmol·L-1和2mmol·L-1;ADH酶促反应的适宜p H值为8.8和8.2,适宜温度为33℃和39℃,米氏常数4mmol·L-1和17mmol·L-1。应用反胶束固定化酶测定了试样中微量组分。     

反胶束固定化醇脱氢酶的制备及应用研究

研究十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)-辛烷-己醇反胶束体系固定化醇脱氢酶(ADH)的制备及应用。考察了含水量、CTAB和己醇用量对于ADH固定化的影响。对游离酶和固定化酶的催化动力学性质研究表明:酶促反应的最适pH值分别为8.2和8.8,最适温度分别为31℃和20℃,米氏常数分别为12mmol/L和7mmol/L。30℃时,游离酶存放150min后失活90%,固定化酶失活50%,表明反胶束固定化ADH有较好的热稳定性。应用此体系测定了试样中乙醇的含量。     

核糖核酸酶A在丁酸十二铵—环己烷反胶束溶液中的催化动力学

研究了核糖核酸酶Ａ（ＲＮａｓｅＡ）在丁酸十二铵（ＤＡＢ）－环己烷反胶束溶液中催化水解胞苷２＇，３＇环单磷酸酯的动力学，数据符合Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ－Ｍｅｎｔｅｎ酶催化机理。以ｋｃａｔ／Ｋｍ表示酶催化活性时，ＲＮａｓｅＡ在反胶束溶液中的催化活性是在水溶液中的１４￣３０倍。无论是固定ＤＡＢ浓度还是固定Ｈ２Ｏ与ＤＡＢ浓度之比，随增溶水量的增加，ｋｃａｔ／Ｋｍ呈下降趋势。     

反胶束中的酶催化研究进展

评述酶在反胶束中的定位和结构、动力学特性、催化活性和稳定性，反胶束作为酶催化反应介质的优点，反胶束中酶催化反应的类型及其应用。     

反胶束萃取醇脱氢酶的研究

本文报道了用反胶束体系萃取醇脱氢酶(ADH)的研究结果。在此萃取体系中,以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)作为表面活性剂,辛烷和己醇作为溶剂及助溶剂。考察了振荡时间、水相pH值和离子强度、表面活性剂及助溶剂浓度等因素对醇脱氢酶萃取率的影响,确定了最佳萃取条件。     

核糖核酸酶A在丁酸十二铵-环己烷反胶束溶液中的催化动力学

研究了核糖核酸酶A(RNaseA)在丁酸十二铵(DAB)-环己烷反胶束溶液中催化水解胞苷2',3'-环单磷酸酯的动力学,数据符合Michaelis-Menten酶催化机理.以k_cat/K_m表示酶催化活性时,Rnase A在反胶束溶液中的催化活性是在水溶液中的14～30倍.无论是固定DAB浓度还是固定H₂O与DAB浓度之比,随增溶水量的增加,k_cat/K_m呈下降趋势.     

胶束介质在动力学分析中的应用

评述了胶束介质在动力学分析测定中的作用和应用状况，讨论了胶束催化的动力学特征，胶束对反应物理化学性质的修饰及其在动力学多组份测定和酶催化动力学分析中的应用。     

β-CD衍生物的反胶束微型反应器模拟酶催化氧化研究

利用我们设计的反胶束微型反应器，对两种β-环糊精（β-Cyclodextrin,简写β-CD）衍生物，在不同溶剂中催化苯甲醇氧化成苯甲醛和苯甲酸的反应动力学进行了研究，结果表明，该反应器的催化效率均相催化反应高，反应的后处理较简单，且较少污染物产生。     

壳聚糖固定化醇脱氢酶的制备及其酶学性质研究

报道了醇脱氢酶(ADH)的固定化和酶学性质研究。以壳聚糖作为载体,戊二醛作为交联剂。固定化ADH的最适条件为:以6%戊二醛将壳聚糖交联2 h,与ADH反应2.5 h。对游离和固定化ADH酶学性质的研究表明:酶促反应的最适pH均为8.2,最适温度分别为37℃和40℃,对乙醇的表观米氏常数Km分别为33.9 mmol/L和46.2 mmol/L。与游离酶相比,固定化酶具有良好的操作稳定性。     

AEOT反胶束中脂肪酶的催化活性

反胶束已广泛应用于膜模拟化学和蛋白质的液 液萃取中[1～ 3] ,反胶束酶反应作为实现有机相酶催化的方法之一 ,具有许多独特的优点 ,反胶束独特的结构特征使表面活性剂分子组成的膜将油水相隔开 ,从而有利于保持酶的活性和稳定性。酶在反胶束的微水环境中比在水溶液中更接近天然的细胞内环境 ,在这里酶和底物分子均可得到有效的分散 ,接触几率大大提高 ,因而催化效率也得到很大提高。反胶束可以适用于各种类型的 (亲水的、疏水的和双亲的 )底物[4] ,已逐步形成“胶束酶学”的研究分支 ,研究胶束酶学的Martinek等[3] 曾预言 :反胶束体系有可…     

壳聚糖固定化乳酸脱氢酶的制备及酶学性质研究

以磁性壳聚糖作为载体,戊二醛作为交联剂,对乳酸脱氢酶(LDH)进行固定化.固定化的最适条件为:戊二醛浓度6%,pH值7.5,酶的偶联时间2 h.对游离及固定化LDH酶学性质的研究表明,酶促反应的最适pH值为9.2,最适温度分别为37℃和50℃,对乳酸的表观米氏常数分别为1.6 mmol/L和0.9 mmol/L.游离酶和固定化酶在40℃放置150 min后,其活力分别为最初的56.5%和76.1%.固定化酶在4℃贮存4周后,活力仍保留50%以上.固定化酶在室温下与底物重复反应6次后,活力仍保留60%以上,说明固定化酶具有较好的热稳定性、贮存稳定性和复用性.     

游离和溶胶-凝胶固定化甲醛脱氢酶酶促反应动力学的研究

采用溶胶-凝胶法对甲醛脱氢酶进行固定化，酶的包埋率超过了98％．在pH7附近、37℃下，以游离酶和固定化酶作催化剂，NADH为电子供体，进行了甲酸转化为甲醛的酶促反应．游离和固定化甲醛脱氢酶酶促反应都遵循Michaelis-Menten反应机理，用Dalziel提出的双底物酶促反应动力学方程进行拟合．固定化酶酶促反应速率为游离酶酶促反应速率的50％左右．固定化酶的动力学常数φ和米氏常数K高于游离酶，估计是凝胶基质孔中存在扩散效应所致．     

Gas Hydrate Formation in Reversed Micelles

We describe a technique to modify protein solubility and optimize enzyme activity in reversed micellar solutions. The technique is based on the ability of hydrates of natural gas to form in the micro-aqueous phase. Clathrate hydrates are crystalline inclusions of water and gas, and their formation in bulk water has traditionally been studied with relevance to natural gas recovery. We have found that hydrates can form in the environment of the microaqueous pools of reversed micelles, and that their extent of formation can be well controlled through the thermodynamic variables of temperature and pressure. Additionally, formation of hydrates affects the size and aggregation number of the micelles, and thus influences the solubility and conformation of encapsulated proteins. We demonstrate how the concept can be used in two applications: (i) protein extraction into reversed micelles and subsequent recovery, and (ii) optimization of enzyme activity in reversed micelles.