用于磁珠法核酸提取的微流控芯片及自动化平台

基于磁珠法核酸提取原理,设计并制作出旋转驱动式核酸提取微流控芯片及自动化平台。微流控芯片包括裂解腔、清洗腔以及洗脱腔等结构,步进电机带动微流控芯片旋转,通过电磁铁吸附微流控芯片内的磁珠,实现磁珠在各腔室转移,完成核酸提取和纯化。对芯片表面疏水性、磁力大小、磁珠分散程度以及核酸洗脱时间进行优化。结果表明,当磁力大小为250 N时,可实现磁珠转移;磁铁放置于芯片上方1 mm时,腔室内磁珠分散程度最好。洗脱时间为20 min时,芯片上提取大肠杆菌的核酸浓度较高。微流控芯片与磁珠核酸提取技术相结合提取的核酸样本,可直接应用于后续聚合酶链式反应扩增环节,有利于实现核酸自动提取及扩增的一体化。     

微波法提取连翘苷的工艺研究

以连翘叶为原料,连翘苷含量为检测指标,以提取溶剂、液料比、微波功率、提取时间为因素,采用四因素三水平L9(34)正交设计优选出连翘苷的最佳提取条件。结果表明,最佳提取条件为用液料比10∶1的75%乙醇微波(300 W)提取3次,每次120 S,得到连翘苷含量为0.52%。提取工艺合理可行,稳定可靠。     

花生油提取工艺研究

以花生为原料,研究回流法,索式提取法和超声波辅助提取花生粗油脂的工艺条件,结果显示超声波提取在低温短时间内提取率有优势。通过单因素试验和正交试验优化了超声波辅助提取花生粗油脂的工艺条件。结果表明：超声波辅助提取花生粗油脂工艺的最佳条件是：石油醚作为溶剂,料液比1：12（g/mL）,提取温度35℃,提取时间25min,超...     

基于微流控芯片的核酸提取技术研究进展

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的大肆传播对世界各国公共卫生防护能力与医学检测能力发起了严峻的挑战.快速、准确、灵敏的核酸扩增检测成为了当前的研究热点,而如何从复杂的生物样品中提取高纯度的核酸对保证核酸分析检测的灵敏度和准确性起着至关重要的作用.然而传统的核酸提取方法耗时长且通常需要复杂的设备,利用微流控芯片的集成...     

指甲花色素提取工艺研究

以指甲花色素提取量为评价指标,采用可见分光光度法测定指甲花色素的含量,选取甲醇水溶液的浓度、pH、提取时间和温度四个因素对指甲花提取率的影响,并设计了正交实验进行提取工艺优化研究.结果显示指甲花色素最佳提取工艺条件为:甲醇水溶液的浓度为75%;pH为2;提取时间50min;提取温度70℃.该提取方法简单、方便,为指甲花色素的进一步研究提供依据.     

肌苷的离子交换法提取工艺研究

研究了肌苷发酵液不同pH值、树脂预平衡条件、饱和树脂的洗菌、淋洗条件对肌苷离子交换提取和解吸工艺影响情况，并对其离子交换吸附机理进行了详细探讨，旨在确定最佳提取工艺条件。     

酵母来源甘露聚糖的提取纯化及其对水果保鲜

以市售酵母细胞壁为原料,考察不同提取工艺条件下酵母甘露聚糖的得率.结果表明,最佳提取条件为:料液比1∶60,115℃,浸提90 min,此时甘露聚糖最大得率可达到18.71%,影响因素的重要性依次为:料液比浸提温度浸提时间.对甘露聚糖进行初步纯化,结果显示Polar MC 60-Q型预装纯化柱的多糖损失率较低(38.21%),而蛋白去除率最高(90.97%),显示出较好的纯化效果.经初步纯化的甘露聚糖涂膜处理苹果显示出较好的抗褐变性能;保鲜剂组分为0.2%甘露聚糖、0.3%丙酸钙、0.3%抗坏血酸时,对葡萄进行涂膜处理,测得五日失重率为3.95%,较对照组降低19.70%,五日好果率77.78%,该配方保鲜效果明显优于其他测试组.     

山楂叶中熊果酸提取工艺研究

以熊果酸的提取率为指标,采用单因素与正交实验相结合的方法对提取工艺进行了优化,得到最佳提取参数为:乙醇体积分数95%、提取温度85℃、提取时间110min、液固比5:1、提取次数3次。在该条件下,熊果酸提取率为93.47%。该工艺简单合理,为工业生产提供了理论参考。     

黄芪多糖提取分离纯化工艺的优化研究

采用温浸法设计四因素三水平正交试验,对黄芪多糖最佳提取工艺进行了优化,结果表明:四因素对黄芪多糖提取的影响顺序为提取温度>提取次数>料液比>提取时间,提取最佳工艺为:料液比1∶6,提取时间90 min,提取温度100℃时提取3次;采用乙醇沉淀法设计三因素三水平正交实验对其最佳分离工艺进行研究,研究发现:三因素三水平对黄芪多糖分离影响顺序为乙醇浓度>乙醇加入量>沉淀时间,分离的最佳工艺为乙醇浓度为90%,加入量5倍体积,沉淀时间4 h;选用AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺为吸附剂,不同浓度乙醇为洗脱剂对黄芪多糖最佳纯化工艺进行了探索,确定了最佳纯化工艺为:AB-8大孔吸附树脂吸附,30%乙醇洗脱.这些条件的确定为黄芪的大规模开发和应用奠定了基础.     

地锦草总黄酮最佳提取分离工艺的研究

采用四因素三水平的正交实验方法,对地锦草总黄酮的最佳提取工艺进行了探索.采用乙酸乙酯萃取、酸碱沉淀、铅盐沉淀3种方法,对其最佳分离工艺进行了探索.正交实验结果表明:温浸法中四因素对地锦草黄酮的影响顺序为乙醇浓度>样液比>提取温度>提取时间.通过实验得到了地锦草总黄酮的最佳提取工艺:以10倍体积的50%的乙醇水溶液在80℃浸提1 h.地锦草总黄酮的最佳分离方法为酸碱沉淀法.这些数据为中药地锦草的开发和应用提供了科学依据.     

核酸水解产物嘌呤、嘧啶碱基在BDS柱上的分离及测定

 用高效液相色谱法测定了核酸水解的中间产物及最终产物 6种嘌呤、嘧啶碱基 ,探讨了色谱柱、流动相等对其分离的影响 ,确定了最佳色谱条件为 :HypersilBDS C18柱 ,乙腈 0 1mol/LKH2 PO4 (H3 PO4 调节 pH至4 0 5 ) (体积比为 2∶98)作流动相 ,紫外检测器在 2 6 0nm波长下检测。方法的精密度在 3%以内 ,回收率在 82 %～ 114%。方法应用于酵母核酸样品的测定中 ,取得了很好的结果。     

核酸含量的测定

分别用硝酸、高氯酸消化试样与硫酸、过氧化氢水化试样方法对比,采用定磷法测定样品中核酸含量。结果表明,两种试样消化方法不存在显著性差异（Ｐ〈０．０５）。     

多孔磁性硅胶微球的制备及其在基因组脱氧核糖核酸提取中的应用

采用模板法制备了多孔磁性硅胶微球,用于生物样品中基因组脱氧核糖核酸(DNA)的分离纯化。以球形和无定型硅胶为对照,考察了吸附液组成和洗脱时间等实验参数对小牛胸腺基因组DNA在磁性硅胶固相载体上的提取回收率的影响。实验结果表明:20%(W/V)聚乙二醇和2 mol/L氯化钠,洗脱10 m in,DNA的回收率可达80%;采用简单的细胞裂解体系和合适的吸附液组成,磁性微球应用于酿酒酵母中基因组DNA的提取,得到了平均长度约为5 kb、A260/A280大于1.77的高纯度DNA片段。     

稀土化合物对核酸分子完整性的影响

由于稀土元素具有独特的理化性质 ,被广泛应用于工业、农业、医药卫生等领域。1993年日本东京大学研究人员报道了Ｃｅ ,Ｔｍ ,Ｌａ的有机络合催化剂可使核酸水解 ,从而达到对病毒和癌细胞ＲＮＡ和ＤＮＡ的特定切割 ,认为如果稀土元素应用于防治癌症和艾滋病取得成功 ,将具有非常重大的意义[1～ 4 ] 。目前 ,国内外所做研究均为 4 0个核苷酸左右或更短片段的线性人工合成的ＤＮＡ或ＲＮＡ[5～ 7] ,对序列更长的天然ＤＮＡ及ＲＮＡ的研究还有待于进一步深入。本文研究了不同剂量的 3种稀土化合物对微生物、动物及人的ＤＮＡ和ＲＮＡ分子完整性…     

环糊精超分子组装体与核酸的相互作用

环糊精是一类由6～8个D-型葡萄糖连接而成的环聚多糖分子,目前已广泛应用于化学和生物学的许多领域.综述了一些生物活性的环糊精超分子组装体,如环糊精假聚轮烷、环糊精/金纳米粒子组装体、环糊精/富勒烯组装体、环糊精/碳纳米管组装体等的构筑及其与核酸的相互作用,如对核酸的切割、凝聚、传递作用和对核酸酶的抑制作用等方面的研究进展.     

基于SERS技术的核酸检测

表面增强拉曼散射（SERS）技术因其具有超灵敏和非破坏性的检测能力,在生命科学领域已经显示出巨大的应用潜力和研究价值。本文综述了SERS技术在核酸检测方面的最新研究进展,重点介绍了基于SERS技术的非标记型、标记型以及其他一些检测方法的原理及研究成果,并讨论了基于SERS的核酸检测技术有待进一步解决的关键问题。     

Synthesis of Peptoid Nucleic Acid with Thymine as Nucleic Base

The sequence specific bonding of oligonucleotide to RNA or double stranded DNA hasattTacted wide attention as the antisense and antigene strategies for treatment of diseasesat the level of gene expression in medicinal chemistry'. Peptide nucleic acids designedas a chemira of nucleobases and polyamidic backbone bind with high affinity andsequence specifity to both comPlementary RNA and DNA and a number of templatefunctions are inhibited on forming PNAasA and PNA/DNA complex'-'. In the …     

小蘖碱与核酸作用荧光光谱及其分析应用

报道了小蘖碱与核酸（ＤＮＡ）作用的荧光光谱。在ＰＨ值３．０－９．１范围内小蘖碱与ＤＮＡ作用。荧光谱发生了显著变化,λｃｍ－５３１ｎｍ的荧光峰随着ＤＮＡ的浓度增加,荧光强度显著增强,据此奶可达１．１μｇ／Ｌ。确定了最佳条件,方法简便快速,对合成样品中ＤＮＡ测定结果令人满意。     

核酸四碱基体的量子化学计算

应用量子化学半经验ＣＮＤＯＭＯ方法，对核酸碱基间可能形成的四碱基体进行计算．结果显示，除了实验中已确认存在的两种四碱基体Ｇ４和Ｇ·Ｃ·Ｇ·Ｃ外，还有６种以Ｗａｔｓｏｎ－Ｃｒｉｃｋ碱基对形成的四碱基体也能稳定存在．通过对Ｇ４碱基体分子间、离子－分子间相互作用的考查，进一步证实了氢键、四碱基体间的堆积作用、金属离子与四碱基体的相互作用等，对于四螺旋核酸结构的形成是重要的．     

电化学发光分析方法在核酸检测中的应用

电化学发光(electrochemiluminescence, ECL)分析方法具有灵敏、快速、准确、分析适应性广等特点。本文首先介绍了ECL的基本原理和特点、ECL核酸分析方法的分类和核酸的钌标记,随后对2003年以来基于磁性微球的ECL与核酸扩增及纳米技术联用在核酸检测中的应用、直接固定的ECL核酸分析方法及毛细管电泳(CE)-ECL核酸分析方法的应用做出了评述,并对ECL核酸分析方法的发展方向进行了展望。