超氧化物歧化酶邻苯三酚测活法的研究及改进

对目前国内外普遍采用的超氧化物歧化酶邻苯三酚测活法（Marklund法）进行了系统研究。实验表明,该测活性系中缓冲溶液的介质组成、浓度、PH及所含的EDTA量等均对体系测活灵敏度有显著影响。根据条件优选实验,提出了改进新体系,改良后的新方法的测活灵敏度较经典法提高65．5％。     

流动注射-光度法测定超氧阴离子自由基(O-.2)与超氧化物歧化酶(SOD)活性的研究

合成了4种硫代碳酰腙类化合物双水杨醛硫代碳酰腙(BSTZ)、双对羟基苯甲醛硫代碳酰腙(BHBTZ) 、双香兰素硫代碳酰腙(BMHBTZ)和双邻香兰素硫代碳酰腙(BMSTZ)，其中苯环醛基对位具有羟基的BHBTZ和BMHBTZ能与超氧阴离子自由基(O     

半胱氨酸对1,2,3-苯三酚自氧化的阻断作用——应用于研究微量硒(Ⅵ)锰(Ⅱ)及氟对SOD活力的影响

超氧化物歧化酶（SOD）是一类重要的金属酶,能催化超氧阴离子自由基（O）发生歧化反应：2O2＋2H^＋↑SOD→H2O2＋O2从而将其清除。根据金属辅基的不同,可将其分为铜、锌-SOD、锰-SOD、铁-SOD三类。文献[1,2]证明,SOD活力受微量元素铜、锌、铁的影响较大。本试验用半胱氨酸阻断法测定了不同浓度的硒（Ⅵ）、锰（Ⅱ）、氟（F^-）对SOD活力的影响。     

流动注射-光度法测定超氧阴离子自由基(O-·2)与超氧化物歧化酶(SOD)活性的研究

合成了４种硫代碳酰腙类化合物双水杨醛硫代碳酰腙（ＢＳＴＺ）、双对羟基苯甲醛硫代碳酰腙（ＢＨＢＴＺ）、双香兰素硫代碳酰腙（ＢＭＨＢＴＺ）和双邻香兰素硫代碳酰腙（ＢＭＳＴＺ）,其中苯环醛基对位具有羟基的ＢＨＢＴＺ和ＢＭＨＢＴＺ能与超氧阴离子自由基（Ｏ－·２）、Ｈ２Ｏ２发生显色反应,而且ＢＭＨＢＴＺ与Ｏ－·２的反应灵敏度为最高,由此建立了流动注射－光度法测定超氧阴离子自由基（Ｏ－·２）的方法．此方法的线性范围为４．５×１０－７～１．５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ,线性方程为Ａ６９８＝１．８×１０４ｃ（Ｏ－·２）＋０．００４５,相关系数ｒ＝０．９９８４,检出限为１．０×１０－７ｍｏｌ／Ｌ．相对标准偏差为５．２３％．大多数生物样品中共存物质无干扰     

SDS-Schiff碱铜(Ⅱ)配合物模拟酶催化光度法研究

天然过氧化物酶价格昂贵, 且容易失活, 对催化反应条件要求苛刻, 因此寻求HRP模拟酶显得尤为重要[1]. 但模拟酶仅能模拟辅基结构, 由于处于游离状态, 其催化活性和特异性均不如天然酶. 而创造适宜的微环境可有效提高模拟酶的催化活性[2]. 本文发现Schiff碱铜配合物Cu(Ⅱ)-(HNATS)2模拟酶具有类似辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性, 而阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)的加入改善了模拟酶所处的微环境, 其增溶、增敏的双重作用使模拟酶的催化活性、稳定性和催化显色反应的灵敏度均显著提高. 由此建立了新的测定超氧阴离子自由基(O*-2)的分光光度法. 线性范围为0～9.0×10-4 mol/L, 检出限为6.28×10-6 mol/L. 30种干扰物质试验证明, 大多数生物样品中共存物质无干扰. 此法可望成为测定超氧阴离子自由基(O*-2)与超氧化物歧化酶(SOD)活性的新方法.     

金属卟啉白蛋白结合体模拟SOD酶性能研究

将两类水难溶性金属卟啉(MP),meso-四苯基卟啉金属配合物(MTPP,M=ZnII,CoII)和meso-四(p-羟基苯基)卟啉金属配合物(MTpHPP,M=ZnII,CoII)分别与牛血清白蛋白(BSA)结合,制得水溶性金属卟啉白蛋白结合体(MP@BSA).采用UV-vis光谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、圆二色谱进行了表征与分析,发现金属卟啉的水溶性和稳定性得到大幅度提高.采用NBT光还原法测定了MP@BSA结合体清除超氧阴离子自由基(O2·-)的能力,发现结合体MP@BSA具有清除O2·-的性能,与小分子金属卟啉相比,结合体的抗O2·-性能提高了一个数量级.MP@BSA抗氧化活性分别是VC和BSA的600倍和40倍.其中,羟基取代金属卟啉结合体表现出更强的清除O2·-的活性,CoTpHPP@BSA的EC50为1.5μmol/L,对天然Cu,Zn-SOD的模拟度为2.73%.最后提出了生物高分子结合体清除O2·-的可能机理.     

化学发光法测定SOD活性的干扰因素及消除方法

采用黄嘌呤 -黄嘌呤氧化酶及邻苯三酚自氧化作为酶和非酶超氧阴离子自由基发生体系 ,以鲁米诺为发光剂 ,通过 SOD对发光的抑制率以测定 SOD活性。采用加热样品使 SOD失活 ,测得样品发光抑制率本底值 ,扣除本底值以消除干扰。在两种体系中测得结果有高度一致性 ,样品中 SOD活性分别为 1 70± 9.3U/m L和 1 65±2 .0 U/m L。本法用于测定生物制剂中 SOD活性 ,不需有机溶剂萃取 ,可有效地消除干扰 ,是一种实用、可靠测定 SOD活性的方法     

稀土硝酸盐对生成超氧阴离子自由基的抑制作用

用脉冲辐解法研究了稀土硝酸盐对生成超氧阴离子自由基的抑制作用。稀土硝酸盐对脉冲辐解充氧甲酸钠溶液产生．Ｏ２＾－有明显的抑制作用,抑制率在２８％－９２％之间,且稀土硝酸盐浓度与其对．Ｏ２＾－的抑制作用之间存在明显的剂量效应关系。     

meso—四（4—N—取代吡啶基）卟啉铜（Ⅱ）配事物的合成及其对O^—2的清除作用

以Ｃｕ２（ＯＨ）２ＣＯ３为原料通过对非均相金属插入反应合成ｍｅｓｏ－四（４－Ｎ－甲基吡啶基）卟啉合铜和ｍｅｓｏ－四（４－Ｎ－苄基吡啶基）卟啉合铜。方法操作方便产率高。研究表明，在核黄素光照产生Ｏ＾－２的体系中，ＣｕＴＭＰｙＰ和ＣｕＴＢＰｙＰ对Ｏ＾－２具有明显的清除作用，对人红细胞内血红蛋白具有一定保护作用。     

用电化学方法研究红景天和丹参清除超氧阴离子自由基和羟基自由基的 …

利用单扫示波极谱法研究了红景天和丹参对活性氧自由基的清除作用。超氧阴离子自由基通过邻苯三酚自氧化体系产生。羟基自由基由Ｆｅｎｔｏｎ反应生成,用自旋捕集剂苯基叔丁基氮酮（ＰＢＮ）捕捉生成的ＯＨ,以单发示波极谱法检测自旋加合物。     

Superoxide Dismutase Biosensors for Superoxide Radical Analysis

ABSTRACT

Some basic work has been performed on the development and optimisation of superoxide dismutase (SOD) biosensors for superoxide radical analysis. Initially we studied the possibility of obtaining a SOD biosensor using the Clark electrode as indicating sensor. However, the best results were obtained using as indicator a classical amperometric electrode for H₂O₂. In both cases the superoxide radical was generated in situ using the xanthine/xanthine oxidase (XOD) enzyme system, while the SOD was immobilised in kappa-carrageenan gel. The first application was realised by studying the effects in vitro on the superoxide radical of some molecules commonly accepted as radical scavengers.     

Superoxide Dismutase Administration: A Review of Proposed Human Uses

Superoxide dismutases (SODs) are metalloenzymes that play a major role in antioxidant defense against oxidative stress in the body. SOD supplementation may therefore trigger the endogenous antioxidant machinery for the neutralization of free-radical excess and be used in a variety of pathological settings. This paper aimed to provide an extensive review of the possible uses of SODs in a range of pathological settings, as well as describe the current pitfalls and the delivery strategies that are in development to solve bioavailability issues. We carried out a PubMed query, using the keywords “SOD”, “SOD mimetics”, “SOD supplementation”, which included papers published in the English language, between 2012 and 2020, on the potential therapeutic applications of SODs, including detoxification strategies. As highlighted in this paper, it can be argued that the generic antioxidant effects of SODs are beneficial under all tested conditions, from ocular and cardiovascular diseases to neurodegenerative disorders and metabolic diseases, including diabetes and its complications and obesity. However, it must be underlined that clinical evidence for its efficacy is limited and consequently, this efficacy is currently far from being demonstrated.     

超氧负离子基与槲皮素的反应

氧的浓度超过正常值会引起毒性效应。超氧负离子基(O_2~(?))作为生物体内代谢产生的一种活性中间体,在发现超氧化物歧化酶(SOD)是其专一清除剂后,引起人们广泛的兴趣,并对 O_2~(?)与人类的某些疾病和癌症的关系进行了研究。由于·OH、~1O_2和 HO_2等也是高活性的物质,有人认为在研究 O_2~(?)的毒害效应时,不应忽视这些由 O_2~(?)可衍生出来的活性氧。为阐明 O_2~(?)在生物体内的作用,还需对 O_2~(?)化学作更多更深入的基础工作。黄酮类化合物是一大类重要的有生化意义的化合物,已有许多关于槲皮素氧化反应的报     

七种天然黄酮类化合物对超氧阴离子自由基的清除活性

用单扫描示波极谱法研究了从东紫苏和黑沙蒿中分离出的七种黄酮类化合物对超氧阴离子自由基的清除作用.结果表明:七种黄酮类化合物清除O 2的作用强弱与它们所含酚羟基数目多少有关,羟基数目越多,对O 2清除的效果越好.C2-C3双键对黄酮类化合物清除O 2的活性也有贡献;糖苷因空间位阻效应而导致黄酮类化合物抗氧化能力下降.     

利用高效弱阴离子交换色谱法纯化超氧化物歧化酶

利用高软弱阴离子交换色谱法简化了超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的纯化手续。在丙酮沉淀后,仅用一步色谱分离就能使来自牛血的Ｃｕ,Ｚｎ－ＳＯＤ达到电泳纯,活性回收率为８６．４％,比活为７７１１Ｕ／ｍｇ,纯化倍数提高至５２倍。此外,详尽讨论了色谱分离的条件。     

铁超氧化物歧化酶活性中心结构研究

对氧化型、还原型及非活性形式铁超氧化物歧化酶Fe-SOD活性中心进行了量子化学计算和比较。在HF方法及LANL2DZ基组水平上获得了分子轨道能量、电荷分布以及原子轨道对前沿分子轨道贡献的信息。结果表明, Fe-SOD酶的活性形式的活性中心易于接受超氧自由基(O2- )的进攻而完成其生理功能。     

Superoxide dismutase activity of a novel macromolecular manganese porphyrin

The discovery of a novel superoxide dismutase (SOD) mimic which demonstrates SOD activity, chemical stability in H₂O₂ solution and long half‐life in circulation is reported. The SOD mimic consists of a manganese porphyrin (MnP) with SOD activity and a polymer (poly (styrene‐co‐maleic anhydride); SMA) with biological characteristics. The SOD activity of SMA‐MnP at pH = 8.1 measured using the stopped‐flow kinetic analysis technique to monitor the decay of superoxide directly was 1.1 (± 0.1) × 10⁶ M‐1 sec‐1. It is postulated that the reduction by O₂^·− of the oxidized SMA‐Mn(III) is slow, while the oxidation of the reduced SMA‐Mn(II) by O₂^·− is very fast. The retention times of SMA‐MnP in the circulation of rabbits were determined. In vivo, SMA‐MnP that binds to the warfarin site on albumin showed an enhanced half‐life in the circulation. Additionally, in vitro SMA‐MnP indicated an excellent stability to H₂O₂. Copyright © 1999 John Wiley & Sons, Ltd.     

测定超氧化物歧化酶活性的一种新的极谱分析方法

报道一种测定超氧化物歧化酶活生的新极谱分析方法，在０．１２５ｍｏｌ／ＬＮＨ３．Ｈ２Ｏ－０．７５ＭＯＬ／ｌ ｎｈ４ｃＬ－２．５％，Ｎａ２ＳＯ３－０．５％，吐温－８０－的介质中，ＳＯＤ在－０．５２Ｖ处产生一氧极谱催化波。ＳＯＤ在１．０×１０＾３Ｕ／Ｌ－４．０×１０＾３Ｕ／Ｌ的活性含量范围内与催化电流呈线性关系，检出限为８．０×１０＾２Ｕ／Ｌ。     

Expression of a Hybrid Human Superoxide Dismutase with a High Affinity for Heparin

IntroductionCopper,zinc- superoxide dismutases(SODs;EC.1.15 .1.1) are essential plasmic enzymes which cat-alyze the dismutation of highly reactive superoxideradical anions to hydrogen peroxide and oxygen so thatthe generation and clearance of oxygen free radicalsare regulated[1— 3 ] . The studies show that oxygen freeradicals play important roles in aging and the regula-tion of nitrogen monoxide[4,5] .The failure of the prop-er regulation will lead to inflammation,ischemicreperfusion injury…     

基于超氧化物歧化酶/氧化锌的超氧离子传感器

利用物理气相沉积法制备了纳米氧化锌(Nano-ZnO) 膜, 通过扫描电子显微镜(SEM)、紫外-可见分光光度法(UV-Vis)、X 射线衍射(XRD)及电化学等方法测定了其物理化学性质. 实验结果表明, 该Nano-ZnO 膜是具有多晶六边形纤维锌矿结构的多孔纳米膜, 微粒直径在 50～100 nm, 室温禁带宽度3.37 eV. 采用浸渍法将超氧化物歧化酶(SOD)直接修饰于 Nano-ZnO 膜上, 制备了SOD 修饰电极(SOD/ZnO). 通过交流阻抗法(EIS)及循环伏安法(CV)证明了SOD能稳定地吸附在多孔ZnO膜上, 并实现了直接电子传递; 紫外-可见及红外光谱研究证明吸附在ZnO膜上的蛋白质保持了良好的生物催化活性, 并成功地构建了第三代超氧离子(O2-)生物传感器. 这种生物传感器有较宽的线性范围(氧化电流: 0.24~180×10-6 mol/L, 还原电流: 0.12~250×10-6 mol/L)、较低的检测限(氧化电流: 2×10-7 mol/L, 还原电流: 1×10-7 mol/L)、较快的响应时间(4 s)以及较好的稳定性.