两种荧光探针法研究三种非甾体抗炎药与DNA的相互作用

采用溴化乙锭(EB)和中性红(NR)两种荧光探针分别考察了三种非甾体抗炎药(吲哚美辛、舒林酸和托美丁)与DNA的相互作用, 采用荧光发射光谱和共振散射光谱技术得出了基本一致的结论: 吲哚美辛和舒林酸可以在一定程度上与DNA结合(舒林酸更强), 结合方式可能有嵌插作用, 也可能有药物分子在DNA双链表面的组装, 作用力来源于静电作用. 而托美丁几乎不与DNA作用, 因为其疏水性弱, 与DNA分子结合几率小.     

罗布麻活性成分与人血清白蛋白结合的光谱学研究

应用荧光和紫外光谱研究了人血清白蛋白与罗布麻活性成分槲皮素(QUE)、芸香苷(RUT)和儿茶素(CAT)的结合机理. 在QUE与蛋白质浓度比小于3.5时, 其荧光猝灭机理主要是静态猝灭, 在药物浓度较高时动态猝灭所占的比例增加; RUT在整个实验浓度范围内对蛋白质的荧光猝灭机理为静态猝灭; CAT与蛋白质之间不能形成复合物, 其荧光猝灭主要由动态猝灭产生. QUE和RUT分别与蛋白质形成1∶1的复合物, 结合常数分别为(1.51±0.13)×10⁵和(0.81±0.08)×10⁵ L•mol^－1. 由于激发态质子转移, 与蛋白质的相互作用引起QUE和RUT内源荧光发射峰强度的明显增加, 进一步证实了它们与蛋白质的结合. 与蛋白质的结合也引起了QUE紫外吸收带的明显红移, 说明药物分子中的酚羟基发生了解离, 以离子形式与蛋白质发生作用. RUT的紫外吸收谱带没有明显移动, 说明它主要以中性状态与蛋白质结合. 应用与蛋白质作用后药物分子紫外吸收光谱的二阶导数谱, 对药物与蛋白质的结合模式进行了深入探讨.     

非甾体抗炎药对映体在多糖衍生物手性固定相上的拆分

在共价键合多糖类衍生物的手性固定相(Chiralpak IA,Chiralpak IB,Chiralpak IC)和涂敷型多糖衍生物的手性固定相(Chiralpak AD,Chiralcel OD)上,对非甾体抗炎药物(non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)进行了对映体拆分.色谱条件:流动相为10%异丙醇/正己烷(V/V)含0.1%三氟乙酸(Chiralpak AD,2%异丙醇/正己烷(V/V)含0.1%三氟乙酸(Chiralpak OD),异丙醇(四氢呋喃、乙酸乙酯、二氯甲烷)/正己烷/0.1%三氟乙酸(Chiralpak IA,Chiralpak IB,Chiralpak IC);流速为1.0 mL/min;紫外检测波长为254 nm.比较了非甾体抗炎药在直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)衍生的手性固定相Chiralpak IA和 Chiralcel AD,纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)衍生的手性固定相Chiralpak IB和Chiralcel OD上的对映体拆分.结果表明,非甾体抗炎药在Chiralpak IA和Chiralpak IB上的分离效果普遍低于Chiralpak AD和Chiralcel OD.     

非甾体抗炎药对映体在冠醚手性固定相上的拆分

利用高效液相色谱法,采用从(18-冠-6)-2,3,11,12-四羧((18-crown-6)-2,3,11,12-tetracarboxylic acid,18-C-6-TA)衍生的冠醚类型手性固定相(CSPs),对非甾体抗炎药酰肼衍生物进行手性分离研究.为了手性酸类非甾体抗炎药在冠醚手性固定相上进行手性拆分,采用与肼合成方法导入氨基基团,合成了其酰肼衍生物.色谱条件为:流动相:80%甲醇/水(V/V)含10 mmol/L H2SO4;流速:1.0 mL/min;紫外检测波长:210 nm.结果表明,除酮洛芬之外,其它非甾体抗炎药的酰肼衍生物拆分效果较好(α=1.14～1.26,Rs=0.88～1.43).而且非甾体抗炎药酰肼衍生物在(+)18-C-6-TA衍生的CSP 1和(-)18-C-6-TA衍生的CSP 2上的洗脱顺序得到了相反结果.     

非甾体抗炎药洛索洛芬钠的合成

以1-苯基-2-氯-1-酮为原料,经缩酮保护、重排、水解、酯化及氯甲基化等反应制得关键中间体2-（4-氯甲基苯基）丙酸甲酯（7）; 7与2-乙氧羰基环戊酮缩合后,再经脱羧及成盐反应合成了洛索洛芬钠,总收率36%,其结构经¹H NMR和MS(ESI)确证。     

混合模式固相萃取-高效液相色谱法测定牛奶中4种非甾体抗炎药残留

制备了咪唑离子液体功能化的混合模式硅胶吸附剂（Sil-IL）,将其作为固相萃取（SPE）吸附剂,结合高效液相色谱-紫外检测方法（HPLC-UV）,建立了测定牛奶中酮洛芬、萘普生、吲哚美辛和托芬那酸4种非甾体类抗炎药物（NSAIDs）的分析方法。通过红外光谱、拉曼光谱和元素分析对Sil-IL进行了表征,初步探索了Sil-IL对目标物的保留作用机理,考察了样品溶液的pH值、上样流速、淋洗液及洗脱溶剂体积等因素对SPE效率的影响。结果表明,Sil-IL对4种NSAIDs的保留主要通过疏水作用和阴离子交换作用,Sil-IL吸附剂对4种NSAIDs具有较好的萃取选择性和萃取效率。在优化的SPE条件下,托芬那酸的线性检测范围为4～1000μg/L,其它3种NSAIDs的线性范围为3～1000μg/L,相关系数（R2）为0.9996～0.9998,检出限为1.2～1.9μg/kg(S/N=3),日内和日间精密度分别为1.0%～3.0%和1.9%～6.3%,加标回收率为90.8%～105.3%。本方法准确可靠、灵敏度高、背景干扰低小、操作简便,可用于奶制品中4种NSAIDs残留的同时检测。     

导数—同步荧光光谱法同时测定三种B族维生素的研究

研究了维生素Ｂ１的氧化产物（硫色素）、维生素Ｂ２和Ｂ６混合物体系的导数－同步荧光光度谱，提出了混合物体系荧光光谱被分辨开的同时测定方法，该法可不经分离直接测定复合维生素片剂中维生素Ｂ１，Ｂ２及Ｂ６，其线性范围均为０－１．０μｇ／ｍＬ，检出限分别为０．５、１．５及４．０ｎｇ／ｍＬ。     

离子交换固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定动物组织中的8类非甾体抗炎药残留

采用离子交换固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定了动物组织中的8类14种非甾体抗炎药(Non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)残留。动物组织样品经乙腈-乙酸乙酯(1∶1,V/V)提取、乙腈饱和正己烷除脂、Oasis MCX阳离子交换固相萃取柱除杂后,用液相色谱-质谱联用仪电喷雾电离,多反应监测模式检测。本方法的检出限为3.0～10.0μg/kg;定量限为10.0～25.0μg/kg;添加浓度在10.0～1000.0μg/kg范围内,牛肉组织中的回收率为62.9%～108.4%,相对标准偏差小于10%;猪肉组织中的回收率为63.4%～117.0%,相对标准偏差小于9%。     

基于中空纤维-固相微萃取-高效液相色谱法测定环境水样中4种非甾体抗炎药残留

建立了氧化石墨烯/中空纤维-固相微萃取(GO/HF-SPME)结合高效液相色谱法(HPLC),用于分析环境水样中美洛昔康、吡罗昔康、吲哚美辛、双氯芬酸钠4种非甾体抗炎药的残留。对氧化石墨烯(GO)进行了结构表征,并考察了GO质量、中空纤维长度、萃取时间、搅拌速度、pH值、解吸条件以及重复利用次数对GO/HF-SPME萃取效率的影响。结果表明：美洛昔康、吡罗昔康、吲哚美辛和双氯芬酸钠在10～1 000 ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,检出限分别为0.6、0.2、0.5、0.8 ng/mL,相对回收率范围为95.4%～102.5%,富集倍数分别为55、20、103、50倍。由此可见,GO/HF-SPME HPLC适用于环境水样中4种非甾体抗炎药痕量残留的分析。     

脂质体对细胞色素C结构的稳定作用

采用同步荧光光谱考察细胞色素C(CytC)在脂质体环境中分子内基团微环境的变化,推测分子的空间构象。结果表明:CytC结合到脂质体上引起分子内基团重新组装和排布,氨基酸残基所处的微环境发生明显变化,体现在荧光光谱上,酪氨酸和色氨酸的光活性增强,色氨酸在水溶液中的分子内电荷转移得到抑制,此过程不涉及化学键的断裂。在脂质体环境中,尿素引起的CytC解聚变性效应得到明显抑制,脂质体与尿素在促进CytC分子内氨基酸残基发光上有协同效应。     

高效液相色谱法直接拆分非甾体解热镇痛药物对映体

使用Kromasil CHI-TBB手性固定相,分离了非甾体解热镇痛药卡洛芬,氟吡洛芬,非诺洛芬,酮洛芬,吡咯芬和萘普生等对映体。结果表明,这种以酒石酸二酰胺为手性中心的商业化手性固定相,适合于在正相条件下分离上述药物对映体,对映体分离因子和分析时间可以通过向流动相中添加极性物质如异丙醇,甲基叔丁醚等来进行调节。     

阳离子共价有机框架对水中非甾体药物的强化去除

以三醛基间苯三酚(TFP)和溴化乙锭(EB)为单体, 在溶剂热条件下合成了一种二维β-酮烯胺类阳离子型共价有机框架(COF)材料. 所得TFP-EB COF呈现出良好的结晶度、 高的比表面积和丰富的溴化乙锭单元, 故可将其应用于水中非甾体抗炎药(NSAIDs)的去除.阳离子TFP-EB COF对双氯芬酸钠(DCF-S)和对氨基水杨酸钠(PAS-S)两种非甾体抗炎药表现出高的吸附能力和快的吸附动力学, 其饱和吸附容量分别可达350.4和145.3 mg/g. 而采用TFP与4,4'-二氨基联苯(BND)在类似条件下合成的中性TFP-BND COF则表现出较差的吸附性能, 其对DCF-S和PAS-S的饱和吸附容量分别仅有59.7和13.6 mg/g. TFP-EB COF的吸附性能比TFP-BND COF更优异, 这主要归因于TFP-EB COF孔道中存在的大量阳离子EB单元与NSAIDs中的羧基间存在强烈的静电作用. 此外, 竞争离子干扰和循环再生实验表明阳离子型TFP-EB COF在NSAIDs污染物的去除方面具有良好的应用前景.     

Breast Cancer Stem Cell Potency of Nickel(II)-Polypyridyl Complexes Containing Non-steroidal Anti-inflammatory Drugs

We report the breast cancer stem cell (CSC) potency of two nickel(II)-3,4,7,8-tetramethyl-1,10-phenanthroline complexes, 1 and 3 , containing the non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs), naproxen and indomethacin, respectively. The nickel(II) complexes, 1 and 3 kill breast CSCs and bulk breast cancer cells in the micromolar range. Notably, 1 and 3 display comparable or better potency towards breast CSCs than salinomycin, an established CSC-active agent. The complexes, 1 and 3 also display significantly lower toxicity towards non-cancerous epithelial breast cells than breast CSCs or bulk breast cancer cells (up to 4.6-fold). Mechanistic studies suggest that 1 and 3 downregulate cyclooxygenase-2 (COX-2) in breast CSCs and kill breast CSCs in a COX-2 dependent manner. Furthermore, the potency of 1 and 3 towards breast CSCs decreased upon co-treatment with necroptosis inhibitors (necrostatin-1 and dabrafenib), implying that 1 and 3 induce necroptosis, an ordered form of necrosis, in breast CSCs. As apoptosis resistance is a hallmark of CSCs, compounds like 1 and 3 , which potentially provide access to alternative (non-apoptotic) cell death pathways could hold the key to overcoming hard-to-kill CSCs. To the best of our knowledge, 1 and 3 are the first compounds to be associated to COX-2 inhibition and necroptosis induction in CSCs.     

Size Dependence of Protein-Induced Flocculation of Phosphatidylcholine Liposomes

The adsorption of lysozyme and cytochrome C on phosphatidylcholine liposomes essentially changes the physical properties of the phospholipid membranes and under certain circumstances greatly affects the stability of the colloid dispersion by inducing bridging liposome flocculation. This study was designed to examine experimentally the influence of liposome size on two kinetic parameters of the flocculation, its rate constant and activation energy. As the liposome radius increased in the range 50-500 nm, the activation energy tended to decrease, resulting in an increased flocculation rate, except for the flocculation of 400-nm liposomes, which was greatly impeded. The pronounced influence of the liposome size on the flocculation rate constant was evident, since a well-defined minimum in the kinetic rate of flocculation of 400-nm liposomes was detected experimentally. The obtained nonlinear radius dependencies of the flocculation rates and activation energies are interpreted in terms of the bridging mechanism of the protein-induced liposome flocculation and the supplementary concept of the stability of thin liquid films formed between approaching protein-adsorbed liposomes. Copyright 2000 Academic Press.     

Complexation of the Non-steroidal Anti-inflammatory Drug Nabumetone with Modified and Unmodified Cyclodextrins

The inclusion of the anti-inflammatory drug, Nabumetone, in -, - and hydroxypropyl--cyclodextrin (CDs) is studied using UV-VIS absorption and steady-state fluorescence emission. Binding constants and thermodynamic parameters of complex formation are determined by spectrofluorimetry. The inclusion phenomena of Nabumetone with the three cyclodextrins is compared with that of the well known similar anti-inflammatory drug Naproxen. In the case of Nabumetone pronounced differences are observed in the complexation process with each cyclodextrin whereas the respective Naproxen complexes are nearly identical. ¹H-NMR experiments show that the inclusion process in Nabumetone can occur either through the substituents in the -2 (butanone) or -6 (methoxy) positions in the naphthalene ring.     

超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法同时测定猪肝中非甾体类抗炎药残留

采用超高效液相色谱-四极杆串联质谱仪(UPLC-MS/MS)同时测定了猪肝中18种非甾体类抗炎药(NSAIDs)的残留量.对NSAIDs多残留同时提取、净化技术进行了研究,对UPLC-MS/MS检测参数进行了优化.均质后的猪肝样品采用酸化乙腈提取,正己烷液-液分配(LLP)脱脂,经硅胶固相萃取(SPE)柱净化后,采用UPLC-MS/MS电喷雾电离(ESI),多反应监测(MRM)模式检测,以保留时间和子离子比定性,外标法定量.方法检出限(LOD)为0.2～10 μg/kg;定量限(LOQ)为1.0～50 μg/kg.在添加浓度在1.0～200 μg/kg范围内,NSAIDs的回收率在53.8%～92.7%之间,相对标准偏差(RSD)小于10.3%.方法操作简便,对动物肌肉、内脏、鸡蛋及牛奶中NSAIDs残留的检测具有普遍适用性.