吩噻嗪-Corrole 镓(III)配合物的合成、荧光及其光断裂DNA性质

合成了吩噻嗪(PTZ)-corrole二元体1-3及其镓(III)配合物4-6.采用稳态吸收与稳态发射及时间分辨的瞬态光谱技术研究了这几种化合物的光物理特性.结合荧光量子产率和荧光寿命计算得到它们的辐射和无辐射速率常数.稳态吸收光谱表明:几种二元体中,corrole镓(III)单元表现出更强的Soret带和Q带.化合物1-3的荧光量子产率分别是0.156、0.134和0.139,辐射速率常数分别为4.02′107、3.47′107和2.89′107s-1.化合物4-6的荧光量子产率分别是0.502、0.443和0.494,辐射速率常数分别为20.90′107、16.78′107和21.11′107s-1.可见,化合物4-6的荧光量子产率和辐射速率常数均高于化合物1-3.然而,化合物4-6的荧光寿命分别是2.40、2.64和2.34ns,低于自由corrole1-3.琼脂糖凝胶电泳实验表明:在光照的条件下,这些吩噻嗪-corrole镓(III)二元体化合物能够把超螺旋DNA(formI)切割成缺刻型DNA(formII).     

微孔板发光二极管诱导荧光-表面活性剂增敏法测定盐酸小檗碱

研制了微孔板发光二极管诱导荧光分析仪,以发光二极管为激发光源,Y形光纤束传导激发光和荧光,采用平面型光敏二极管接收荧光.采用二维定位器移动微孔板,可实现对多个样品快速连续的测定.利用弱碱性介质中阴离子表面活性剂十二烷基苯磺酸钠(SDBS)对盐酸小檗碱荧光的增敏作用,在pH 9.0的Britton-Robinson缓冲溶...     

荧光染料探针与脱氧核糖核酸作用机理研究

核酸与各类物质的相互作用与探测核酸的结构与功能密切相关,是揭示核酸的生物功能和一些药物的作用机制的重要途径。本文研究了染料ZR、甲酚红、苏木色精等DNA的作用,给出它们在不同结合数下的生成常数。此外,还求取了它们的能量转移效率,给体－受体之间的距离。     

丹酰基丝氨酸与桥联双环糊精作用机理的时间分辨荧光光谱研究

利用稳态、时间分辨荧光光谱,结合非线性最小二乘法拟合系统研究了手性探针分子丹酰-L-丝氨酸(DLS)与β-环糊精(β-CD)、2-位硒桥联β-CD(1)和2-位碲桥联β-CD(2)的复合及复合机理.对比研究了DLS与三种不同环糊精复合强度及复合方式的差别.结果表明,引入硒桥键不能使化合物1与丹酰基丝氨酸分子很好地复合;而引入碲桥键使化合物2对DLS分子的结合能力相对于β-CD有明显增强.     

时间分辨荧光免疫分析方法检测烟草中菌核净残留

建立了简便、灵敏地检测烟草中菌核净残留的时间分辨荧光免疫分析方法(TRFIA),及配套的无净化的快速前处理技术。采用镧系元素螯合物Eu-N1标记亲和纯化后的羊抗兔IgG示踪抗体。采用间接竞争TRFIA法建立了菌核净标准抑制曲线,方法的检出限I10为2.0μg/L;抑制终浓度I50为32.00μg/L;检测线性范围为4～128μg/L。考察了丙酮提取后33%,10%和1%的烟草基质对菌核净-TRFIA分析方法的影响,表明在1%烟叶基质条件下,建立的菌核净的抑制曲线的线性范围与标准抑制曲线趋于平行,确定烟草样品的前处理稀释倍数为100倍,计算得到基质影响因子(Im)为17.1。对烟叶样品中添加1,7和24mg/L的菌核净标样,连续3d的添加回收实验表明,方法的回收率为73%～128%,相对标准标准偏差(RSD)在4.3%～13.2%之间;烟草中菌核净的实际最低检出限为1mg/L。本方法可望用于烟草中菌核净残留的快速筛选检测。     

DNA Photocleavage by a Cationic BODIPY Dye through Both Singlet Oxygen and Hydroxyl Radical: New Insight into the Photodynamic Mechanism of BODIPYs

Two new NIR‐absorbing BODIPY dyes, each bearing two pyridinium groups, are synthesized and their DNA‐binding affinities and DNA photocleavage abilities examined in depth. While one BODIPY dye photocleaves DNA mainly through singlet oxygen, the other photocleaves DNA through both singlet oxygen and hydroxyl radical. To the best of our knowledge, this is the first example of a hydroxyl radical being involved in the photodynamic behavior of BODIPY‐type dyes. EPR experiments confirm the ability of these and several related BODIPYs to generate superoxide anion radical and hydroxyl radical. This finding may shed light on the mechanism of BODIPY‐based photodynamic therapy (PDT) and open a new avenue for development of more efficient BODIPY‐type PDT agents.     

毛细管电泳激光诱导荧光用于DNA定量的研究

通常用于DNA定量的主要方法有聚合物酶链反应(PCR)、紫外光谱法和荧光光谱法等.PCR测定DNA的灵敏度较高,但操作繁琐费时,而且对序列依赖性较强[1].紫外吸收光谱法可直接用于DNA的测定,但它的灵敏度较低且较容易受到DNA样品中的单链核苷酸和其它杂质的干扰.荧光光谱法不但有较高的灵敏度,而且对DNA的选择性也较好.目前已建立了许多荧光测定DNA的方法,这些测定方法一般都是基于DNA对荧光探针的荧光增强的原理而实现的.通常采用荧光光谱仪、荧光测读分析仪、流式细胞仪等测定荧光标记的DNA的荧光信号,但这些仪器均存在样品消耗量较大、仪器价格昂贵、分析时间较长、不易自动化等缺陷.毛细管电泳仪已经成为许多分析实验室中常用的DNA分离检测工具,将其应用于DNA的定量检测有望克服上述仪器的一些缺陷.Landers等以YO-PRO-1和PicoGreen为DNA标记试剂, 在毛细管电泳仪上对DNA含量进行了较好的分析[2].     

过氧亚硝酸根离子诱导DNA断裂机理的研究

在体内NO和超氧阴离子生成的过氧亚硝酸根离子（ONOO^-，peroxynitrite）是一种强氧化性物质，它可以诱导DNA单链断裂使DNA发生损伤。为了探讨ONOO^-断裂DNA的作用机理，以质粒DNA pBR322为研究对象，采用琼脂糖凝胶和硫代巴比妥酸(TBA)显色反应等方法对ONOO^-与DNA的反应进行研究。结果表明ONOO^-能明显使DNA发生断裂，而且随着ONOO^-浓度的增加，DNA断裂的程度增加，在酸性和中性条件下ONOO^-断裂DNA的能力明显高于碱性介质，而CO₂对该反应有显著的抑制作用，TBA显色反应进一步证实该反应为自由基机理，其机理为ONOO^-与H⁺形成ONOOH，然后裂解为二氧化氮自由基（·NO₂）和羟基自由基（·OH），继而对DNA造成损伤。     

甲氨蝶呤与DNA相互作用的荧光光谱研究

在pH 7.4的Tris-HCI介质中,以盐酸小檗碱为荧光探针,研究了甲氨蝶呤与小牛胸腺DNA之间的相互作用.采用荧光光谱、吸收光谱、Scatchard方程、盐效应等手段,对作用机理进行了研究,结果表明甲氨蝶呤与小牛胸腺DNA之间的作用方式为混合方式,嵌入与静电作用是两种主要作用方式.求得25℃和40℃时二者的结合常数分别为5.61 × 104和5.32×104L·mol-1.     

钌(II)多吡啶配合物光断裂DNA的实验研究

研究了一系列钌(II)多吡啶配合物对pBR 322 DNA 的光断裂作用, 并与光谱法和粘度法的研究结果进行了对比. 实验结果表明, 钌(II)多吡啶配合物光断裂DNA的能力不仅与配合物与DNA相互作用的结合模式和结合强度有关, 还与配合物自身的电子结构有关; 钌(II)多吡啶配合物对DNA的光断裂存在立体选择性; 其断裂机理是激发态的配合物与溶液中的氧分子发生能量转移生成单线态氧活性氧化物种, 将鸟嘌呤碱基氧化而导致DNA断裂. 本研究对于遗传工程中的化学核酸酶以及以DNA为靶标的药物设计有重要的意义.     

Enhancement of Two-photon Absorption by Ce^3＋ Sensitization in Organic Dyes

The two-photon absorption(TPA)and TPA-induced frequency upconversion emission properties of the dyes 4-[P-(dicyanoethylamino)crystal]-N-methypyrdinium iodide and the complex of 4-[P-(dicyanoethylamino)crystal]-N-methypyrdinium iodide and Ce(NO3)3 were experimentally studied.It was found that the TPA cross section for the dye sensitized by Ce3 is two factors larger than that of the dye without being sensitized.A three-level system model of the dye molecules was used to analyze the enhancement of TPA by the sensitizer Ce3 ,which indicated that the sensitizer results in the increase of the transition dipole moment from the one-photon allowed excited state(1Bu)to the two-photon allowed excited state(2Ag).     

火焰结构的平面激光诱导荧光技术观测

用平面激光诱导荧光（PLIF）技术测量了烧煤油的酒精喷灯单脉冲激光诱导荧光，由平面荧光图可清晰地看到氢氧基与C2、C3在火焰中的位置，同时，也看到了煤油火焰由发生、发展到熄灭过程中火焰结构的变化；PLIF技术是研究火焰结构的有力工具。     

荧光猝灭法研究氟比洛芬与DNA相互作用

采用荧光光谱法和紫外光谱法, 在生理条件下(pH=7.40)对氟比洛芬(FP)与脱氧核糖核酸(DNA)的作用方式进行了研究.证实了氟比洛芬通过沟槽结合方式与DNA发生相互作用.实验表明, DNA与氟比洛芬的相互作用为静态猝灭过程,测得结合常数为5.53×10~5 L·mol~(-1),结合位点数为1.12.     

过亚硝酸根诱导的DNA损伤及其抑制剂的研究

过亚硝酸根（ONOO^-）具有细胞毒性,能够修饰DNA碱基、造成DNA单链断裂。本文采用HPLC-ECD以及琼脂糖凝胶电泳法分别研究了ONOO^-诱导的DNA碱基修饰以及DNA链断裂。结果表明,在一定ONOO^-浓度范围内,8-OHdG的生成量以及DNA链断裂程度与其浓度有依赖关系。同时还分别研究了槲皮素、黄酮、α-萘基黄酮、咖啡酸以及含有巯基的谷胱甘肽、硫辛酸等天然抗氧化抑制剂对ONOO^-诱导DNA损伤的抑制效果。结果表明,除黄酮、α-萘基黄酮外,其它物质都有明显的抑制作用,其中抑制效果最显著的是槲皮素。     

致癌性卤代醌类消毒副产物造成 DNA 损伤的分子机理研究

卤代醌是一类卤代芳烃类环境污染物的致癌中间体,也是在饮用水中新发现的氯化消毒副产物。我们最近发现卤代醌和 H₂O₂ 或有机氢过氧化物体系可以不依赖过渡金属离子,而产生高活性的羟基/烷氧自由基和醌氧/醌碳自由基。目前尚不清楚这些卤代醌类致癌物和氢过氧化物共存能否诱导 DNA 产生氧化损伤和修饰,以及其潜在的分子机制是什么。我们的研究发现 DNA 在四氯-1,4-苯醌/H₂O₂体系中可被氧化产生 8-氧脱氧鸟苷、DNA 链断裂和三种甲基氧化产物,这些反应不依赖过渡金属离子,且由于卤代醌与 DNA 的嵌入作用而导致其氧化作用增强。其他卤代醌也观察到了类似的现象,而且通常比经典的 Fenton 体系更有效。我们进一步将研究从纯化的 DNA 扩展到了活细胞的基因组 DNA。同时还发现卤代醌和有机氢过氧化物(如叔丁基过氧化氢或在正常生理条件下产生的 13S-过氧羟基-9Z,11E-十八碳二烯酸(13-HPODE))共存时,可通过独特的醌氧自由基介导机制诱导 DNA 氧化生成致突变性更强的咪唑啉酮类产物 dIz。这些发现为解释普遍存在的卤代醌类致癌中间体和消毒副产物的潜在基因毒性、致突变性和致癌性提供了新思路。     

新型单羟基氯代咔咯的合成及其光断裂DNA性质

以五氟苯甲醛和吡咯经缩合反应合成了五氟苯基二吡咯烷烃(1); 1与3-氯-4-羟基苯甲醛经缩合反应合成了一个新的10-位苯环被氯原子取代的单羟基自由咔咯--10-(3-氯-4-羟苯基)-5,15-二(五氟苯基)咔咯(〖STHZ〗2〖STBZ〗),收率12.0%,其结构经UV-Vis, ¹H NMR, ¹⁹F NMR, HR-ESI-MS和X-射线单晶衍射表征。琼脂糖凝胶电泳实验发现：2在光照下能够有效引起超螺旋质粒pBR 322 DNA发生断裂,当浓度为100 μmol·L^-1时,活性最强,断裂百分比为68%。     

表面活性剂对铽-钛铁试剂荧光反应的增敏作用

研究了阳离子表面活性剂溴化十六烷基三甲铵对铽-钛铁试剂荧光反应的增敏作用,确定了最佳反应条件及络合物的组成比,并与测定铽的七个荧光体系做了比较。测定了稀土合成样中的微量铽。结果令人满意。     

飞秒荧光亏蚀光谱技术研究液相体系取向弛豫

溶液中分子的快速弛豫过程直接反映了溶液中溶质和周围溶剂分子间的相互作用[1-3]．在液相体系中分子取向通常是随机分布的．当溶质分子被线偏振光激发至激发态时,其分子取向将由原来各向同性的球形分布瞬间变成各向异性的椭球分布．由于溶质分子周围大量溶剂分子的存在,通过二者之间相互作用,激发态溶质分子在一定方向上的取向优势将很快弛豫掉．这种溶液中的取向弛豫过程通常是几个到几百皮秒[1-3]．     

荧光光谱法研究核黄素与鲱鱼精DNA的相互作用

在B-R缓冲溶液中, 以吖啶橙(AO)作荧光探针研究了核黄素(RF)与DNA的相互作用. 在pH值为7.25时, 荧光光谱研究表明, RF与DNA发生作用生成了复合物, 其结合比为n_RF∶n_DNA＝5∶1, 28 ℃时RF与DNA的结合常数K＝2.53×10⁶ L/mol; 并运用双倒数法求得RF与DNA相互作用的 为－6.06×10⁴ J/mol, 为－78.70 J/(mol•K), 28 ℃时的 为－3.69×10⁴ J/mol. 同时通过粘度法、盐效应和Scatchard法等研究了RF与DNA的作用方式, 确定了在该实验条件下RF与鲱鱼精DNA之间主要为沟面和静电作用方式.