毛细管电泳法在测定蛋白质或多肽的理化特性中的应用

蛋白质是生命物质的基础,蛋白质性质和功能研究是生命科学现在和将来的研究热点之一。理化特性参数是分离、鉴定多肽或蛋白质的基础,已成为蛋白质组学的重要研究内容之一。毛细管电泳是将电泳和色谱有机地结合在一起的快速分离技术,分离机制涉及到物质的荷电、分子空间结构和大小、扩散特性、相互作用等理化性质。通过对样品的定量分析或不同条件下迁移时间的变化的测定,利用理化参数与浓度或迁移时间的定量关系可以计算出多肽或蛋白质的理化特性参数。本文对近年来毛细管电泳测定蛋白质或多肽理化特性的原理和方法方面的进展进行了综述。     

毛细管电泳法表征多肽及糖蛋白的稳定性

建立了毛细管电泳表征多肽和糖蛋白稳定性的方法。分别以血管紧张素II(Ang II)和植物血球凝集素(PHA)、牛凝血酶(B-Thr)、人凝血酶(H-Thr)、辣根过氧化物酶(HRP)4种糖蛋白为多肽和糖蛋白的模式分子。从样品浓度、电泳缓冲液、样品溶液pH和离子强度等方面优化了血管紧张素II的分离分析条件;从毛细管的选择、样品的电荷状态、电泳缓冲液的选择和分离电压的影响等方面讨论了糖蛋白的分离条件。Ang II和4种糖蛋白的稳定性试验结果表明:Ang II可在pH 7.4的硼酸盐缓冲液(0.02 mol/L)中于4℃下稳定放置48 h; 4种糖蛋白可在pH 7.4硼酸盐缓冲液(0.2 mol/L)中于20,4,-20℃下稳定放置48 h;放置时间大于一周且小于四周时,在-20℃下各蛋白质均保持稳定;放置时间大于两周且小于四周时,只有HRP在上述3个温度下均保持稳定。该方法具有高效、快速、简单、低成本的特点,可广泛应用于多肽和蛋白质的稳定性表征。     

毛细管电泳的原理及应用(第四讲):毛细管电泳在氨基酸、肽及蛋白分析中的应用

毛细管电泳的原理及应用（第四讲）毛细管电泳在氨基酸、肽及蛋白分析中的应用罗国安王义明周国华（清华大学化学系北京１０００８４）１概述毛细管电泳（ＣＥ）的应用包括很多内容。被分析的物质有离子、小分子、生物大分子乃至高分子和粒子的分析;分析对象从无机物、有机物、生物体系乃至活体单个细胞的分析;含量测定范围可从常量到微量乃至几个分子的测定。本文只介绍应用最多的几方面内容,其中首推多肽和蛋白的分析,可以说它是ＣＥ最初的应用之一。     

应用毛细管区带电泳分离分析蛋白质及多肽

生命科学研究的迅速发展对生物大分子的分离分析提出了更高的要求,促使人们不断研究和开发新型的高效、快速、选择性好的分离分析方法。传统的电泳技术是目前生物化学及分子生物学实验室中常用的分离分析和制备手段,但它周期长,操作繁     

毛细管电泳：蛋白质,多肽分离分析的一项新技术

电泳和层析一直是研究蛋白质和多肽的重要方法。毛细管电泳除了具备凝胶电泳的高分辨力外,以其快速、定量、重复性好、灵敏度高及自动化程度高等诸多优点在近几年内成为蛋白质、多肽乃至其它生物分子分离分析的一项崭新且重要的技术。     

高效毛细管电泳在糖分析中的应用

本文评述了近年来毛细管电泳在糖分析中的发展状况和一些常见的分析方法，引用文献５１篇。     

毛细管区带电泳法快速测定食品中的金属硫蛋白

 采用毛细管区带电泳法 (CZE) ,以 5 0cm× 75 μmi d 毛细管柱作为分析柱 ,0 .0 2mol/L磷酸二氢钠 0 .0 2mol/L磷酸氢二钠混合体系 (pH 7.0 )作为背景电解质 ,以紫外检测器在波长 2 0 0nm的条件下检测 ,对具有生物活性的金属硫蛋白 (MT)的两种异构体 (MT1,MT2 )进行了分离。样品经过预处理后 ,采用外标法可对食品中的金属硫蛋白进行定量测定。该方法的最低检测质量浓度为 1mg/L ,相对标准偏差低于 10 % ,加标回收率为 82 .0 %～93.4%。     

毛细管电泳在火炸药研究中的应用

近年来,毛细管电泳以其高效、快速、微量的特点,在火炸药分析领域被广泛应用并迅速发展。本文从毛细管区带电泳、胶束电动毛细管色谱、毛细管电色谱、芯片毛细管电泳、微乳毛细管电动色谱这五种毛细管电泳的模式出发,结合本实验室的最新研究进展,综述毛细管电泳在火炸药研究中的应用。     

毛细管电泳在火炸药分析中的应用

综述了近年来毛细管电泳在火炸药领域的应用现状，包括各种分离模式、检测器以及毛细管电泳芯片的应用，并对该技术在火炸药分析中的应用前景作了展望，提出了新的发展方向。引用文献45篇。     

毛细管电泳在生物大分子分析中的应用研究进展

近年来,毛细管电泳技术以其高效、微量、分离模式多样等优势,在生物大分子分析领域得到了日益广泛的应用.综述了毛细管电泳技术在多糖、蛋白质、核酸和脂质中的应用,并对其相关的样品制备、毛细管内壁吸附、仪器的研制等方面存在的问题进行分析和展望,以期为毛细管电泳技术在生物大分子领域的推广应用提供借鉴.     

电泳毛细管的改性及其在酶和单克隆抗体分离分析中的应用

用壁处理办法对高性能毛细管电泳的毛细管柱进行改性,在Bio-Rad HPE-100中用肽测得组分的平均柱效为200000/m,使用寿命在200次以上。对纤维素酶.尿酶等一系列的样品作了分离和测定,尿酶5次重复测定的相对标准偏差小于1％。在10min内分离并测定了由细胞瘤培养的实际样品中的抗乙肝抗体(HBsAG),反映迁移时间重复性的相对标准偏差为1.87％,并作出了相应校正曲线。     

毛细管电泳在环境分析中的应用

以国内外近年来公开发表的科技文献为信息来源,从现状、发展优势和实际应用等方面就毛细管电泳在环境分析中的应用和发展前景予以综述。     

缠结聚合物溶液毛细管电泳

从缠结聚合物溶液理论及其电泳迁移理论对缠结聚合物溶液毛细管电泳的现状给予综述，并就缠结聚合物溶液毛细和电泳在ＤＮＡ，蛋白质等大分子分离方面的应用进行了概述。     

赖氨酸的毛细管电泳特性及测定

研究了缓冲液pH和操作温度对赖氨酸毛细管区带电泳分离中运行电流、电渗迁移率、峰形等参数的影响,确定了赖氨酸电泳分离的最佳实验条件,建立了毛细管区带电泳测定赖氨酸的方法。线性范围为0．1－3．0g/L,检出限为0．03g/L。该法操作简便迅速,重复性好。用于赖氨酸发酵液中赖氨酸的含量测定,结果令人满意。     

环糊精及其衍生物在毛细管电泳中的应用

十一年前毛细管电泳(CE)出现时,在世界分析化学界引起了少有地关注和积极地效仿。十多年来各国科学家进行了大量的工作,使CE获得了迅速的发展。有人认为,目前CE最活跃的领域是柱工艺和毛细管柱表面化学以及选择性分离介质的研究。后者是为了分离一般情况下难以分离的各种异构体,尤其是对映异构体。在气相色谱(GC)和高效     

低pH毛细管电泳法分离测定菠菜中的甜菜碱

建立了毛细管电泳法快速测定菠菜中甜菜碱的方法。通过与对溴代苯甲酰甲基溴反应,将甜菜碱转化成苯甲酰甲基酯后进行测定。研究了缓冲液的pH、分离电压以及结构相似化合物等因素对分离的影响,优化并确定了分离条件:75μm ID×50/57 cm(分离长度/总长)未涂层石英毛细管,分离电压15 kV,实验温度25℃,缓冲溶液100 mmol/L H3PO4-H3PO4盐,pH 2.91,检测波长262nm。在浓度范围5.8~580μg/mL之间,线性关系良好,y=72221x 4042.5,R2=0.9999,回收率在94.5%~99.8%之间。     

高效毛细管区带电泳法快速测定尿液中的肌酐

建立了一种快速测定尿中肌酐浓度的高效毛细管电泳方法。利用非涂层石英毛细管(64.5 cm×50μm i.d),以pH 2.5,0.1 mmol/L H3PO4作为电泳缓冲液,检测波长191 nm,用0.05 Pa压力进样4 s,在电压16 kV快速分离尿液中的肌酐,采用外标法定量。肌酐的迁移时间约为5.5 min,肌酐浓度在34.5~8840μmol/L范围内呈良好的线性(r2=0.999)。平均日内精密度为2.5%,日间精密度为3.0%。回收率94.1%~99.0%。与全自动生化分析仪碱性苦味酸速率法相比有良好的相关性(r=0.990,n=56)。高效毛细管电泳法测定尿肌酐可应用于临床样品的检测。     

高效毛细管电泳在核酸、蛋白质分析中的新进展

高效毛细管电泳以其分离效率高，分析速度快，样品和试剂用量少，易于实现自动化等优点，在核酸、蛋白质等生物样品的分析方面发挥着重要的作用并具有巨大的潜力。本文介绍了近两年来高效毛细管电泳技术的进展，特别是PCR／CE、CE／MS以及电泳芯片技术等方面的新发展，并综述了高效毛细管电泳在核酸、蛋白质分析方面的应用，同时对其前景进行了展望。     

毛细管电泳法分离测定小麦根中的有机酸

研究了毛细管电泳法分离测定草酸、乌头酸、苹果酸、柠檬酸等有机酸的条件。在pH7．8的磷酸钠缓冲溶液中中加入表面活性剂溴化十六烷基三甲铵作为电泳溶液体系,紫外检测波长214nm,可以有效地分离检测以阴离子形式存在的上述有机酸：将该法应用于铝胁迫下培育的小麦根样品中有机酸的分析,结果表明：随着培养基中铝浓度的增加,苹果酸被诱导增加,与报道的HPLC法的测定结果一致,本法可在植物化学研究中使用。     

糖类的毛细管电泳及芯片毛细管电泳

 糖类化合物在生物体内发挥多方面的作用。糖研究的复杂性在于其结构的复杂多变。高效毛细管电泳作为一种快速、高效的分离分析手段已广泛应用于糖的研究。芯片毛细管电泳是近几年来发展起来的新的分析技术 ,并已经在生命科学的研究中得到较广泛的应用。就各种糖类化合物的毛细管电泳的分析策略、检测条件及糖类化合物的芯片毛细管电泳进行了阐述 ,共 4 8篇。