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使用疏水作用色谱研究蛋白质的构象变化 总被引:2,自引:0,他引:2
研究了高效疏水作用液相色谱中(HIC)色谱条件改变对蛋白质构象的影响。发现固定相配体的疏水性、温度及流动相中盐的阴离子、阳离子和pH值都影响蛋白质的构象。 相似文献
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使用高效液相色谱-电喷雾四级杆飞行时间质谱(HPLC-ESI-Q-TOF MS)联用技术对八硝基苯基硅倍半氧烷(ONPS)纯度进行分析, 从而判定ONPS产物峰及杂质峰的位置, 根据ONPS峰和杂质峰的面积比计算ONPS的纯度. 通过改变HPLC的洗脱梯度和测试时间, 将ONPS产物中的杂质峰完全分开, 测得硝基苯基硅倍半氧烷(NPS)质量分数为97.55%, 其中ONPS的纯度约为92.42%, 产物中含有九硝基八苯基硅倍半氧烷(9-NPS)约5.13%, 其它杂质含量约为2.45%. 通过对ONPS高效液相色谱图峰形和同分异构体极性情况分析, 进一步证明ONPS分子中硝基取代发生于对位和间位. 使用超高效液相色谱(UPLC)对ONPS进行分析, 以更高的分离效率验证了HPLC的结果. 该方法可作为ONPS纯度的分析方法. 相似文献
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卟啉是一组环状四吡咯化合物(图1),环周围的八个取代位置带有各种不同的基团。这些取代基的相对位置不同将形成多种异构体。典型的卟啉化合物结构列于表1。 相似文献
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高效液相色谱法测定邻苯二酚纯度 总被引:8,自引:0,他引:8
王桂丽 《分析测试技术与仪器》2000,6(1):39-41
采用反相高效液相色谱法测定邻苯二酚纯度 ,以C18为固定相 ,甲醇∶0 .2 %乙酸 =5 0∶5 0 (V/V)为流动相 ,检测波长为 2 77nm。回收率为 94.6 %~ 10 1.8% ,标准偏差为 0 .19~ 0 .2 4(n =8)。 相似文献
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本文介绍一种用快速蛋白质液相色谱仪(FPLC)和高效凝胶色谱预装柱(Superose~(TM) 6HR,10/30)测定蛋白质分子最的方法,实验结果表明:本方法不仅快速、简便,而且经测定后,仍能保持其天然结构和生物活性。 相似文献
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氟苯尼考对映异构体手性拆分及其光学纯度的测定 总被引:1,自引:0,他引:1
采用Chiralpak AD-H(4.6μm×250 mm,5μm)手性色谱柱,建立了氟苯尼考对映体的正相高效液相色谱拆分方法。考察了流动相中碱性添加剂、醇类改性剂种类及浓度对分离度、保留时间、理论塔板数、拖尾因子的影响。结果表明:以正己烷-异丙醇-甲醇(70∶15∶15)为流动相,流速为1 mL/min,柱温为30℃,检测波长为224 nm条件下,氟苯尼考与其光学异构体获得满意的分离效果。氟苯尼考在0.05~0.5g/L质量浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系,相关系数r为0.999 7;氟苯尼考的检出限为0.1μg/L;日内精密度RSD小于1.8%,日间精密度RSD小于2.3%;加标回收率为109%~112%,RSD不大于3.0%。该方法快速、方便,可用于工业生产中氟苯尼考光学纯度的控制。 相似文献
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建立了同时分离和测定牦牛乳中4种酪蛋白和4种乳清蛋白的反相高效液相色谱方法。脱脂牦牛乳经分散剂处理后,采用C4色谱柱(250 mm×4.6 mm,300,5μm i.d.)进行分离,以0.1%的三氟乙酸水溶液和0.1%的三氟乙酸乙腈溶液为流动相,流速为0.8 mL/min,梯度洗脱,二极管阵列检测器(DAD)在220nm波长下检测,外标法定量。结果表明,牦牛乳中8种主要蛋白质在40 min内完全分离,在各自的线性范围内呈良好线性,除α-乳白蛋白外,其余7种蛋白的相关系数均大于0.99。8种蛋白质的回收率为86%~103%,相对标准偏差(RSDs)为1.7%~8.7%;检出限(LODs)为10.7~39.2 mg/L,定量下限(LOQs)为35.7~130.7 mg/L。该方法的准确度和精密度均较高,能够满足实际检测的要求。 相似文献
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用苯胺将乳酸衍生化,得到的对映体衍生物在DNB-Leucine柱上进行了拆分,建立了一种用柱前手性衍生化结合手性固定相正相高效液相色谱法检测乳酸光学纯度的方法,并考察了流动相组成和柱温对其分离的影响。分离结果经二极管阵列紫外检测器检测,以及与对照品比较得到确认。当流动相为V(正己烷)∶V(乙醇)=90∶10,温度为25℃,流速为1.5 mL/min时,乳酸达到基线分离,分离因子达1.30以上。将此法测定乳酸光学纯度的结果与旋光仪方法测定的结果进行比较,相对偏差不超过2%。本方法可用于乳酸对映体的光学纯度准确检测。 相似文献
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甲壳素纯度的高效液相色谱法测定 总被引:9,自引:0,他引:9
由于生物材料中甲壳素或壳聚糖是大分子,不溶于水,以及与蛋白质等结合在一起而难以定量测定,工业生产中尚无甲壳素或壳聚糖纯度的标准测定方法;采用甲壳素水解生成氨基葡萄糖,再用氯甲酸芴甲酯(FMOC—C1)进行衍生,利用液相色谱技术对衍生产物进行分析;结果表明,HPLC法是生物材料中甲壳素的一种灵敏的、特有的定性定量分析方法,为生物材料及工业化生产中甲壳素纯度的测定提供了一个方便的手段。 相似文献