肿瘤患者自体CIK细胞治疗及其对患者免疫功能的影响

目的　从恶性肿瘤患者外周血中高效诱导扩增CIK细胞并观察自体CIK过继免疫治疗对患者免疫功能的影响.方法体外利用抗CD3单抗、IL 2、γ IFN等细胞因子从12例肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)中诱导扩增CIK细胞,分3次自体回输;并用流式细胞仪检测回输前后患者T细胞亚群和NK细胞变化.结果　CIK细胞经13d培养后细胞总数和CD3+CD56+T效应细胞均获得大量增殖,分别平均增殖123(46～301)倍和1656(177～5130)倍.肿瘤患者经自体CIK细胞免疫治疗后,CD3、CD4T细胞和NK细胞比例均显著提高(P<0.01).结论　可从不同恶性肿瘤患者PBMC中高效诱导扩增CIK细胞;自体CIK细胞过继免疫治疗可以显著提高患者免疫功能,且副作用小,具有良好的应用前景.     

恶性淋巴瘤的免疫表型与分子遗传学特征

恶性淋巴瘤的病理诊断是临床病理工作者常常遇到的难题。恶性淋巴瘤免疫表型与分子遗传学特征的研究近年发展很快,不仅对恶性淋巴瘤的病理诊断具有主要的帮助,而且对指导临床的治疗也越来越显示出其重要作用。该文重点介绍了美国国家癌症中心(NCCN)2002～2003年恶性淋巴瘤临床实践规约(Practice Guidelines in Oncology)中对病理诊断的要求,尤其是恶性淋巴瘤的病理诊断中免疫表型与分子遗传学特征等方面的内容,并对有关内容进行讨论。希望能够通过熟悉公认的国际标准来规范病理诊断工作,以提高对恶性淋巴瘤病理诊断的水平。     

自体和异体CIK细胞联合树突状细胞治疗原发性肝癌研究

为对癌症患者采用个体化治疗,用患者自体、同种异体外周血进行细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine Induced Killer,CIK)及树突状细胞(Dendritic Cell,DC)扩增,并应用流式细胞术检测其CIK、DC-CIK表型,然后采取静脉回输、皮下淋巴结注射和肝动脉灌注多种方法,对原发性肝癌进行自体和异体的CIK细胞联合DC细胞治疗。结果显示:患者免疫功能提高,生活质量改善。为该类患者提供了一种有效的免疫治疗手段。     

H22实体瘤小鼠的免疫功能指标及环磷酰胺的影响

目的规范化测定H22实体瘤小鼠的免疫功能指标及环磷酰胺的影响。方法将H22肝癌腹水瘤细胞接种于BALB/c小鼠左侧腋窝皮下,第2天随机分成4组:荷瘤小鼠+环磷酰胺组、荷瘤小鼠组、正常小鼠+环磷酰胺组、正常小鼠组。观察小鼠一般临床表现、成瘤情况、体质量、摄食量、肿瘤体积、肿瘤质量、免疫脏器质量、血常规值、血生化值、细胞因子、淋巴细胞转化、NK细胞活性、淋巴细胞亚群分类及组织病理。结果与正常小鼠比较,H22荷瘤小鼠平均摄食量降低,RBC、HGB、HCT显著性降低(P<0.01),WBC、PLT、RDW显著性升高(P<0.01),GOT、GPT显著性升高(P<0.01),CD4-CD8-显著性降低(P<0.01)。荷瘤小鼠给予环磷酰胺后平均摄食量降低,D9-D14体质量显著性降低(P<0.05),D5-D14肿瘤体积显著性降低(P<0.01),肿瘤质量、脾质量、胸腺质量显著性降低(P<0.01),WBC、MCV显著降低(P<0.01),HGB、MCH、MCHC、PLT显著增加(P<0.05),GOT、GPT显著降低(P<0.01),IL-2显著降低(P<0.01),IFN-γ显著增加(P<0.01),CD4+CD8-(%)、CD4+CD8+(%)、CD4-CD8+(%)、CD3+(%)淋巴细胞显著增加(P<0.01),CD4-CD8-(%)淋巴细胞显著降低(P<0.01),脾淋巴细胞转化吸光度差值显著降低(P<0.05),NK细胞活性显著降低(P<0.05)。结论全面测定了H22肝癌实体瘤小鼠的血液指标和免疫功能指标,为生物反应调节剂抗肿瘤药物筛选提供了基础数据。     

单核细胞免疫表型的表达对肝癌患者免疫功能状况的影响

单核细胞是机体内重要的吞噬细胞和抗原提呈细胞,在机体处理外源性病原微生物和机体内所产生的危险信号等方面发挥着重要作用。单核细胞有多种免疫表型,表型可变性和功能多样性是单核细胞的重要特性,不同免疫表型的表达对肝癌患者的免疫功能状况有着不同的影响,这为我们提供了肝癌免疫治疗的新思路。     

不同来源CIK与DC细胞联合治疗中晚期肺癌的临床研究

为对癌症患者采用个体化治疗,用患者自体、同种异体外周血和脐血进行细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokins Induced Killer,CIK)及树突状细胞《Dendritic Cell,DC)扩增,并应用流式细胞术检测其CIK、DC-CIK表型,然后回输患者,对中晚期肺癌患者进行自体、异体和脐血的CIK细胞联合治疗。结果显示:21例患者中,2例病情得到完全缓解(CR),7例病情部分缓解(PR),与治疗前相比,生活质量明显提高,治疗后患者CD3~ 和CD8~ 明显升高(P<0.05)。结果证明,根据不同病人情况采用个体化治疗,应用不同来源的CIK、DC-CIK治疗中晚期肺癌有一定的临床疗效,该方法为中晚期肺癌患者的治疗提供了一种有效的免疫治疗手段。     

透明细胞性肾细胞癌和肾嫌色细胞癌的临床病理及免疫表型比较

目的 探讨透明细胞性肾细胞癌和肾嫌色细胞癌的临床病理学特征、诊断和鉴别诊断.方法 对手术切除的57例肾透明细胞癌和22例肾嫌色细胞癌进行临床特点、肉眼观、光镜和免疫组织化学染色.结果 透明细胞性肾细胞癌多有血尿或肾区疼痛临床症状,巨检切面呈多彩状多伴出血、坏死及囊变;嫌色细胞癌临床上大多无症状,巨检切面呈淡棕色,出血、坏死罕见.镜下透明细胞性肾细胞癌胞浆透明或嗜酸性;嫌色细胞癌胞膜厚似植物状、部分胞质嗜酸性可见明显核周空晕.免疫组化染色57例透明细胞性肾细胞癌E-cadherin全阴性表达,Vimentin全阳性表达,而22例嫌色细胞癌两者的表达正好相反,有显著性差异（P〈0.01）.结论 透明细胞性肾细胞癌与嫌色细胞癌虽在形态上有一定的交叉,但结合临床病理特征及联合检测E-cadherin和Vimentin的表达可做出正确诊断与鉴别诊断.     

视黄酸对胃癌细胞恶性表型的影响

研究ｔ－ＲＡ对胃癌细胞的作用和探讨其作用机理．结果表明：１）ｔ－ＲＡ能够有效地抑制胃癌细胞的生长．２）ｔ－ＲＡ能够降低胃癌细胞在软琼脂中形成集落的能力．３）ｔ－ＲＡ能够降低胃癌细胞的粘附能力．４）ｔ－ＲＡ能够抑制胃癌细胞在裸鼠中形成肿瘤的能力．４）扫描电镜观察显示,经ｔ－ＲＡ处理后,胃癌细胞表面的微绒毛消失．以上结果表明,ｔ－ＲＡ对胃癌细胞的恶性表型有显著的抑制作用．ｔ－ＲＡ可能作为治疗胃癌的有效药物．     

自体瘤苗的研究进展

恶性肿瘤发病率逐年增高,自体瘤苗的研制在肿瘤治疗领域取得了长足的进展.研究认为,主动特异性免疫治疗是肿瘤治疗的主要发展方向之一.     

猪树突状细胞的体外扩增

树突状细胞(DC)是一类专职的抗原提呈细胞,在激发机体初始免疫反应和调节T细胞介导的免疫反应中都发挥十分重要的作用,但至今对猪DC的了解较少.本研究从猪外周血中分离获得单核细胞,分别加入150ng/mLpGM-CSF和100U/mL pIL-4,体外培养6 d后诱导出大量DC,通过显微镜观察可见其细胞表面具有典型的树突状突起,呈毛刺状.猪DC的体外获得将为进一步研究许多病毒性疾病的致病机理奠定坚实的基础.     

细胞因子诱导的NK细胞过继免疫治疗恶性肿瘤的初步应用

目的　采集不同类型恶性肿瘤患者外周血,扩增CINK细胞,并观察自体CINK细胞过继免疫治疗的疗效和安全性.方法　利用抗CD3 单抗、IL-2、PHA从9 例肿瘤患者PBMC中诱导扩增CINK细胞,2 周左右开始自体回输.结果　CINK细胞经培养后细胞总数和CD3- CD56+NK细胞均获大量增殖.肿瘤患者经自体CINK 细胞免疫治疗后, CD3、CD4 T 细胞、NK 细胞、CD4/CD8的比例均显著提高(P<0.01),睡眠、食欲等指标也有相应改善,治疗过程中未见副作用. 结论　自体CINK细胞过继免疫治疗可以显著提高患者免疫功能,改善患者生活质量,且副作用小.     

恶性肿瘤患者血清微量元素分析

为探讨恶性肿瘤患者内微量元素变化,本文采用电感耦合等离子体发射光谱法测定了４１例恶性肿瘤病人血清中锌、铜、铁、硒、锰５种元素含量及铜／锌比值,并以３８例正常人为对照。结果表明：恶性肿瘤患者血清中锌、硒、锰低于正常人,铜、铁及铜／锌比值明显增高,与正常组比较有显著意义（Ｐ＜００５）。提示：血清低锌、低硒、低锰、高铜、高铁与恶性肿瘤有一定关系     

微囊化转CEA基因细胞诱导小鼠抗肿瘤免疫的研究

为发展癌胚抗原(CEA)阳性肿瘤的治疗性疫苗,应用基因工程和静电液滴技术制备出微囊化转CEA基因细胞,经腹腔免疫实验小鼠,再分别应用CEA基因转染的H 2 2 细胞小鼠皮下及腹腔接种,观察微囊化转CEA基因细胞对小鼠肿瘤的抑制作用及其诱导小鼠细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异性杀伤CEA 阳性肿瘤细胞的能力,并用流式细胞术检测了小鼠肿瘤细胞的生长周期和各实验组脾脏T淋巴细胞亚群的分布情况. 结果显示,微囊化转CEA 基因细胞可以有效抑制CEA阳性肿瘤的生长,诱导小鼠CTL对CEA阳性肿瘤细胞的特异性杀伤 ,并能改善荷瘤小鼠的免疫功能,延长腹水瘤小鼠的生存期.     

血小板对NK细胞杀伤K562细胞的影响

目的　探讨血小板对外周血纯化、扩增的NK细胞杀伤作用的影响.方法　使血小板与K562细胞在体外共孵育,以相差显微镜和流氏细胞仪检测血小板与K562细胞的粘附.从外周血单个核细胞(PBMC)中分离纯化、扩增NK细胞,以MTT法研究血小板对NK细胞杀伤活性的影响.结果　K562细胞体外能结合血小板,粘附率达到(25.0±4.3)%.血小板与K562细胞的粘附可抑制NK细胞对K562细胞的杀伤作用,且血小板对NK细胞杀伤活性的抑制呈数量依赖性.结论　血小板能粘附肿瘤细胞并能抑制NK细胞对K562细胞的杀伤作用.     

循环肿瘤细胞富集和鉴定技术在乳腺癌患者中的临床验证

 临床验证了一种有效的循环肿瘤细胞富集和鉴定方法,并探讨了该方法应用于乳腺癌循环肿瘤细胞(CTC)的临床检测。分别取10名健康志愿者外周抗凝静脉血7.5mL,加入经标记的培养乳腺癌细胞SKBR-3,抗白细胞抗体偶联的纳米磁珠阴性富集后在荧光显微镜下读取细胞并计数,通过细胞的回收率对富集方法予以评价;分别取20名健康志愿者、15名临床诊断为浸润性乳腺癌患者外周抗凝静脉血7.5mL,对所取血液进行编盲处理,经富集、免疫荧光加免疫细胞化学染色后在显微镜下读取并判定循环肿瘤细胞,通过两组间检测到的循环肿瘤细胞的差异对该研究方法的特异性和敏感性进行评价。研究结果表明,10名健康志愿者血液中加入培养细胞的平均回收率为75%;加入的培养细胞抗角化蛋白(CK18)染色阳性、抗Her2染色阳性、抗CD45染色阴性,符合乳腺癌细胞的特征;揭盲后结果显示,20名健康志愿者血液均未报告有循环肿瘤细胞,而在乳腺癌患者中,CTC数目小于3个(0—2)者占所检测患者的33.3%,大于3个者占66.7%。由此得出结论：该循环肿瘤细胞富集和鉴定方法对外周血CTC具有较好的回收率,且对于CTC的临床诊断具有很好的特异性和灵敏度。     

体外培养肿瘤细胞生长的微量量热法研究

应用 2 2 77热活性检测仪测定了MKN 4 5细胞和SMMC 772 1细胞的热功率 时间曲线 ,通过观测化疗药物卡铂对曲线的影响 ,进一步研究了该药物对癌细胞增殖的抑制作用 .本实验所用的微量热测定的方法对于癌细胞生物学的研究有重要意义     

二去水卫矛醇对四种肿瘤细胞的体外抑制作用

采用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度二去水卫矛醇(DAG)对人胃癌细胞SGC-7901、人肺癌细胞H460、人鼻咽癌细胞CNE和人肝癌细胞BEL-7404的抑制率研究DAT对4种肿瘤细胞的体外抑制作用.结果表明,DAG对4种癌细胞:CNE、H460、SGC-7901和BEL-7404有较强的抑制作用,作用72h后半数抑制浓度(72h-IC50)分别为4.12μg· ml-1,15.98μg·ml-1,16.00μg· ml-1和16.73μg·ml-1.显微镜下可见经药物作用后细胞圆缩、胞质浓缩、胞浆内颗粒集中边缘化甚至细胞溶解等损伤现象.DAG在体外对上述4种癌细胞有明显的抑制生长作用.     

抗坏血酸和亚硒酸钠对肝癌细胞逆转的研究

采用细胞倍增时间、分裂指数、生化变化和软琼脂克隆形成率等指标测定分化,研究了抗坏血酸和亚硒酸钠对人肝癌细胞逆转的作用.结果表明用抗坏血酸4mmol*L-1联合亚硒酸钠2μmol*L-1处理细胞后,细胞的生长率和有丝分裂指数都显著下降.一些与细胞恶性表型有关的指标,如细胞表面电荷明显下降,电泳率从1.74μm*s-1*V-1*cm-1下降到0.91μm*s-1*V-1*un－1,甲胎蛋白含量从331μg*g-1(蛋白)下降到90μg*g-1,γ-谷氨酰转肽酶活性从0.74U*g-1(蛋白)下降到0.19U*g-1.与细胞分化有关的指标,如酪氨酸-α-酮戊二酸转氨酶（TAT）的活性从14.7μmol*g-1(蛋白)升高至42.6μmol*g-1,软琼脂克隆形成能力下降94.7%.由此可见,抗坏血酸和亚硒酸钠联合能诱导肝癌细胞在分化,逆转肿瘤细胞的恶性表型.     

癌症患者化疗期间的整体护理

目的：探讨整体护理在癌症患者化疗期间的重要性．方法：详述对癌症患者在化疗期间采取的各种护理措施的注意事项．结果：实施有效的整体护理后病人能愉快接受治疗，满意出院．结论：通过对癌症患者实施有效的整体护理，使病人的生活质量和生命时间得以延长。