喜树不同部位喜树碱的质量分数比较研究

采用HPLC法测定喜树不同部位喜树碱的含量,并进行比较分析.色谱柱为Diamonsil C18(5 μm,250 mm ×4.6mm),流动相为乙睛:水(30:70),检测波长254nm,流速1.0mL/min.喜树碱在(0.046～0.230mg·mL-1)范围内线性关系良好.幼芽喜树碱含量最高,叶片、果实其次,二年生枝条喜树碱含量高于一年生枝条.     

喜树果中喜树碱和羟基喜树碱的快速分离

采用碱法提取喜树果中的有效成分,提取液经酸化,氯仿、乙酸乙酯分别萃取后,浓缩重结晶,柱层析等步骤得到高纯度的喜树碱和羟基喜树碱。实验表明,此法提取率高,得到的产品收率、纯度高,原料利用度高,生产周期短,设备简单。     

氮素对喜树光合作用、营养元素和 喜树碱含量的影响

以喜树(Camptotheca acuminata)幼林为试验材料,在田间条件下施以不同剂量的氮素,测定了光合速率、叶绿素含量、喜树碱含量等的变化情况,探讨了不同氮素施用量对喜树光合作用、叶片营养元素和喜树碱含量的影响。结果表明:随着氮素施用量的提高,喜树叶片的光合作用、磷元素和喜树碱含量都呈先升高后下降的变化趋势,光合速率和磷元素含量以施用氮素30 g/株处理最高,而喜树碱含量以20 g/株处理最高; 叶绿素及氮元素含量则随着氮素施用量的升高呈逐渐上升的趋势,均在50 g/株处理下最高。钾元素含量则随氮素施用量的提高呈逐渐降低的趋势,且以50 g/株处理最低; 喜树碱单株产量以施用氮素30 g/株处理最高,以对照(N0)处理最低。综合各项指标,认为氮素施用量30 g/株最有利于提高喜树的光合速率,促进叶片对营养元素的积累,进而促进喜树碱的生物合成。     

高温对喜树生长及叶片喜树碱含量的影响

喜树碱是喜树(Camptotheca acuminata)的一种次生代谢物,有良好的抗肿瘤活性,在喜树体内的合成和积累受遗传和环境因子的影响。笔者在人工气候室中研究了温度对当年生喜树苗生长及叶片喜树碱合成的影响。试验设置了3种昼/夜(白天6:00至18:00,夜间18:00至次日6:00)温度处理,分别为30 ℃/25℃(T1)、35 ℃/30 ℃(T2)和40 ℃/35 ℃(T3)。结果表明:T3温度条件下,喜树有最高的生物量,T2处理有利于喜树苗高和地径的生长,而T3处理则有利于喜树根和茎的生物量积累。T2处理促进了喜树叶片内可溶性糖的积累,降低了可溶性蛋白质的含量,而T1和T3处理则提高了叶片色氨酸脱羧酶(TDC)的活性; T2处理下喜树碱含量和单株叶片喜树碱产量最高。试验期间喜树碱含量(产量)的变化趋势与TDC活性的变化不一致。综合认为,适宜的温度条件(T2)有利于喜树体内喜树碱的生物合成与积累,喜树碱在喜树体内的生物合成和积累是多种因素综合作用的结果。     

光强对喜树幼苗生长及喜树碱含量的影响

喜树(Camptotheca acuminata)是我国特有树种,其次生代谢产物喜树碱具有抗肿瘤活性,但喜树碱的生物合成受环境因子的影响较大。笔者在人工气候室中,采用盆栽试验方法,研究了不同光合有效辐射(300、500、800 μmol/(m²·s),对应记为L1、L2、L3)条件下,喜树当年生幼苗的生长及喜树碱生物合成和积累的差异。结果表明,L1条件下,喜树幼苗的苗高增量和地径增量最高。随着光强的增强,根冠比先升高后降低,而生物量总体呈下降趋势。L3条件促进了喜树叶片中可溶性糖及可溶性蛋白质的积累,L1与L3条件则提高了TDC活性。在L1条件下,喜树碱含量和单株产量最高,表明弱光条件有利于喜树碱的合成与积累。     

喜树碱提取方法研究

喜树碱是我国特有植物喜树中所含的具有显著抗癌活性的重要次生代谢产物.采用索氏回流提取、超声提取、碱法提取对喜树叶中喜树碱(CPT)进行研究,结果表明:提取喜树碱的最佳方法为,用95%的乙醇索氏回流提取6 h,样品不做任何处理.     

HPLC法测定喜树果中喜树碱和羟基喜树碱的含量

测定喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的含量,采用高效液相色谱法,色谱柱为DiamonsilC18(5μm,200mm×4.5mm),乙腈:水(25:75)为流动相,检测波长254nm,流速1.0mL·min-1。结果:喜树碱在(0.0644～32.2)μg·mL-1、羟基喜树碱在(0.25～25)μg·mL-1范围内线性关系良好。说明方法分离效果好、专属性强、分析速度快、灵敏度高,可作为喜树果药材含量测定的方法。     

喜树叶中喜树碱和10-羟基喜树碱的HPLC分析(英文)

建立了同时测定喜树叶片中喜树碱含量的高效液相色谱分析方法.采用sinochrom ODS C18分析柱(250 mm×4.6 mm BP,5.0μm),以甲醇/水为流动相,检测波长为266 nm,梯度洗脱程序为:在前6 min流动相甲醇-水的体积比由40%线性增加至50%,并保持恒定2 min,在随后的32 min甲醇-水的体积比线性增至70%,在40 min时停止该程序.喜树碱在低、中、高3个量的平均加样回收率分别为99.66%,100.3%,99.97%。10-羟基喜树碱在低、中、高3个量的平均加样回收率分别为99.87%,99.88%,100.4%。对不同季节的喜树嫩叶和成熟叶进行了喜树碱和10-羟基喜树碱含量分析,结果表明喜树碱和10-羟基喜树碱的含量变化呈现明显的相关性。     

当年生喜树不同发育阶段叶中喜树碱和10-羟基喜树碱含量变化

采用改变检测波长的反相高效液相色谱法,测定当年生苗不同发育阶段喜树叶中喜树碱和10-羟基喜树碱的含量.结果表明当年生喜树苗的喜树碱含量与喜树的发育阶段有关,6、7月份,喜树的各项生理活动旺盛,各种生态因素如光照、水分等适宜喜树生长时含量最高,此后逐渐减少,但在8～9月之间喜树碱含量略有增加,可能是成熟叶片对持续干旱天气的一种适应;不同高度喜树叶片中喜树碱含量从顶端到基部逐渐减少.而10-羟基喜树碱的含量一直保持在较低水平,表明其在成熟组织中受发育调控不明显.     

喜树愈伤组织诱导及喜树碱的产生

喜树碱是继紫杉醇后又一很有发展前途的植物性抗癌药。利用喜树的幼叶为外植体诱导出喜树愈伤组织，在SH培养基上（附加5mg/L的NAA及0．2mg/L的6－BA，30g/L的蔗糖）诱导出的愈伤组织有根的分化，用TLC法能鉴定其中含有喜树碱，用HPLC法确定其喜树碱的含量最高可达到0．00245％，为原植株的1／20。在Hela细胞的抗癌实验中，喜树愈伤组织乙醇提取物表现出较强的抗癌活性。     

喜树生长过程中叶内喜树碱及10-羟基喜树碱的含量变化

建立了同时测定喜树叶片中喜树碱含量的高效液相色谱分析方法.对不同生长季节喜树嫩叶和成熟叶中喜树碱及10-羟基喜树碱含量的动态变化进行测定,结果表明：在一年的生长期内,喜树嫩叶中喜树碱的含量变化为一双峰曲线,分别在7月和9月达到峰值,其中7月的含量最高;成熟叶中喜树碱的含量持续下降;在生长过程中,喜树叶片中喜树碱和10-羟基喜树碱的含量变化呈现出明显的相关性.     

喜树叶表皮结构

通过光学显微镜和扫描电子显微镜，观察了喜树成熟叶的表皮细胞、气孔器、表皮毛形态，以及上、下表皮细胞外壁上的角质膜和蜡质纹饰．结果表明，上、下表皮层的形态结构差异较大．仅下表皮有气孔分布，气孔类型属不规则类型，常可观察到两个气孔着生在一起．上、下表皮均分布有非腺性单细胞毛     

喜树嫩叶中喜树碱的HPLC提取方法的选择

建立一种从喜树嫩叶中喜树碱的高相液相测定提取方法.采用Waters Symmetry C18(150×3.9 mm,5μm)高效液相色谱.乙腈∶水=35∶65(V/V)为流动相,1.0 mL/min的流速,检测波长254 nm,柱温:25℃,进样量10μl.以不同浓度的甲醇提取法与不同浓度的碱法作对比,结论:以80%甲醇为溶剂于50℃下超声提取1 h为最佳提取法.     

喜树的种子休眠及更新

对喜树种子的休眠与更新进行了研究．结果表明,喜树种子成熟后有约４个月的休眠期．种子内部生物钟节律与所处环境的气候年变化节律相似,使种子处于周期性休眠状态．喜树种子的天然寿命约２年．大树和中树种子的天然更新能力优于小树和枯梢树．天然环境通过抑制已萌发种子的成苗和幼苗的生长发育而限制喜树利用种子进行自然更新,适当的人为干扰可大大促进自然更新．     

中国喜树资源及可持续开发对策

对抗癌植物喜树资源的现状和存在的问题、分布、别名、价值进行了讨论和研究,并对喜树资源的保护和开发提出一些对策和建议。     

不同光照对喜树细胞培养生长和生理生化特性的影响

以喜树（Camptotheca acuminata Decsne.)幼嫩叶片为材料，在附加0.5mg/L 2,4-D、1.0mg/L NAA和0.5mg/L KT的B5培养基上诱导形成愈伤组织，在愈伤组织培养过程中，用5种不同光质处理（黑暗为对照），结果表明，不同光质对生长有不同效应，绿光对愈伤组织生长有促进作用，而蓝光则有抑制作用；在光照和黑暗两种培养条件下，可溶性蛋白质含量、过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）、酯酶（ES）的活性变化均出现两个峰值；同时，电泳分析结果表明，酸性蛋白质组分、过氧化物同工酶谱均有明显的变化，与愈伤组织生长呈正相关。     

喜树果内生真菌的分离与鉴定

从喜树(CamptothecaacuminataDecne.)果实中分离、纯化得到5株内生真菌,经初步鉴定,分别属于半知菌亚门的匙孢霉属(MystrosporiumCda.)、鲜壳孢属(ZythiaFr.)及无孢类群(MyceliaSterilia)。其内生真菌经摇瓶培养后,采用薄层层析(TLC)法对其菌丝体提取物进行分析,初步表明WZ001菌株可能产生喜树碱(Camptothecin,CPT)的类似物。