糖尿病大鼠肝细胞膜中胰岛素受体巯基的检测

采用四氧嘧啶腹腔注射法建立糖尿病大鼠实验模型,用巯基试剂盒紫外可见分光光度法研究四氧嘧啶所致糖尿病模型大鼠肝脏细胞膜中胰岛素受体的性质变化.实验结果表明,糖尿病大鼠肝脏组织细胞膜胰岛素受体的自由巯基含量明显低于正常大鼠,每克蛋白质降低了22%(P＜0.05),提示糖尿病大鼠肝细胞膜胰岛素受体存在氧化损伤.     

带肝细胞受体结合区的乙型肝炎病毒表面抗原蛋白性质的研究——形成表面抗原颗粒和在不同细胞中的分泌

我们用定向缺失突变和体外重组法构建了含有肝细胞受体结合区的乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原主蛋白(S蛋白)基因。该基因在猴肾细胞COS-M6中的表达产物(S309蛋白)能形成表面抗原(HBsAg)颗粒并分泌出细胞。它在细胞和培养液中稳定,并能分别被抗HBsAg和抗preSl区的抗血清所沉淀。CsCl密度梯度分析显示S309蛋白形成颗粒的密度比S蛋白略大(1.25g/ml)。S309蛋白在肝癌细胞株中容易分泌,分泌量和S蛋白相近。但它在COS-M6细胞中的分泌和肝细胞株相差悬殊,分泌量只有10％左右,而且在培养液中出现较迟。和S蛋白的同时表达则能明显地提高它的分泌效率。     

人工调控细胞表面受体聚集状态及功能

从利用物理刺激和生物大分子诱导两个方面综述了人工调控细胞表面受体聚集状态的策略.前者是利用相应的纳米材料在光、磁场、温度等物理刺激作用下实现人工调控受体聚集;后者则利用包括蛋白/多肽类分子、核酸在内的生物分子的自组装对其靶向识别的受体进行人工调控.系统介绍了相关研究领域取得的最新进展,并阐述和展望了该领域现存的挑战和发展方向.     

稀土离子对H2O2诱导的大鼠肝细胞核脂质过氧化的作用研究

用比色法测定丙二醛(MDA)研究1×10-6 mol*L-1浓度的La3+, Ce3+, Eu3+对H2O2引起的大鼠肝细胞核脂质过氧化的影响.结果表明 细胞核与稀土离子温育10 min后,加入H2O2,稀土离子对大鼠肝细胞核脂质过氧化的抑制率较高,随着稀土离子与大鼠肝细胞核作用时间的进一步延长, 稀土离子的抑制率逐渐减小, 甚至表现为促进作用.     

糖皮质激素对糖皮质激素受体的调节——Ⅱ.大鼠肝、脑、脾的研究

将氢化可的松(F)混合在聚乙烯醇(PVA)内,给大鼠皮下注射,将血浆糖皮质激素(GC)维持在应激浓度,20—40μg/dl 3天,结果发现肝胞液糖皮质激素受体(GR)的结合容量(R_0)和脾细胞GR的结合量(R_s)于注射后1h已明显减少,并维持于低水平。注射后7天,血浆GC已下降到正常水平,但GR恢复得较慢,直到11天脾细胞GR尚未完全恢复。GR的Kd不变,脑胞液GR的变化不明显。实验结果表明,在整体动物GC对GR和在培养细胞一样也存在着负调节,但对不同的靶器官,GR的负调节可能具有不同的特点。     

大豆多糖对尿石矿物草酸钙形成的调控作用

采用水提法从大豆中提取了大豆多糖(SPS),其多糖百分含量为97.38%;平均相对分子质量为115,200,羧基百分含量为13.8%。采用X射线衍射法(XRD)、红外光谱(FTIR)、扫描电子显微镜(SEM)和电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP)研究了水溶性大豆多糖(SPS)对草酸钙晶体生长的调控作用。SPS大豆多糖不但可以抑制一水草酸钙(COM)晶体的聚集,而且可以诱导二水草酸钙(COD)晶体形成。当SPS浓度由0增大到0.50g·L-1时,草酸钙晶体由COM完全转变为COD晶体;并且随着多糖浓度的增大,溶解在溶液中的钙离子(可溶性钙)浓度显著增加,草酸钙沉淀的物质的量逐渐减少。这些结果表明,SPS有望成为预防草酸钙结石的一种绿色药物。     

一种高灵敏的压电免疫传感器用于高密度脂蛋白的测定

采用自组装单层膜(SAMs)技术在压电石英晶体的金电极表面组装巯基丙酸SAMs,以盐酸1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)作偶联剂,以共价键合方式固定高密度脂蛋白抗体,研制成一种高灵敏的压电免疫传感器用于检测人血清中低含量的高密度脂蛋白。利用压电装置的实时监测功能,考察了巯基丙酸在金电极表面的自组装成膜过程与机制;研究了晶振固定抗体及其反应结合抗原的液相振荡行为和传感特性。传感器采用初始速率法测定高密度脂蛋白的线性浓度范围为1.63~18.8 mg.L-1,检出限为0.82 mg.L-1。     

微载体糖基化修饰及培养基中添加果糖对大鼠原代肝细胞体外培养的影响

采用对大孔壳聚糖微载体进行糖基化修饰和培养基中添加果糖两种方式考察了果糖对原代大鼠肝细胞体外培养的影响。结果显示,肝细胞在果糖修饰大孔微载体上聚集生长,形态良好,保持了较高的白蛋白分泌和尿素合成活性,表明果糖修饰大孔壳聚糖微载体是较理想的细胞培养支架材料。培养基中加入果糖,肝细胞乳酸脱氢酶泄漏明显降低,白蛋白分泌与尿素合成活性进一步提高,显示有利于受损细胞功能的恢复。     

双吲哚烯类受体对氨基酸的比色识别作用

设计合成了一系列3,3′-双吲哚烯类受体分子,应用紫外-可见吸收光谱研究了该类受体对二十种天然氨基酸分子的识别作用. 结果表明,在乙腈-水溶液中,双吲哚烯受体分子可以通过其氢键受体位点的质子化作用比色识别天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸;而硝基取代的双吲哚烯受体分子则通过其氢键供体位点的去质子化作用比色识别精氨酸、赖氨酸等碱性氨基酸. 在乙腈-水的中性缓冲溶液体系中,硝基取代的双吲哚烯类受体分子通过与巯基发生亲核加成反应高选择性比色识别半胱氨酸和同型半胱氨酸.     

原代大鼠肝细胞在多孔壳聚糖及其复合物支架上的培养

研究了原代肝细胞在壳聚糖及其复合物多孔支架上的生长及代谢.结果表明,细胞在多孔壳聚糖支架上生长良好,且密度、代谢活性较单层培养条件下有大幅度提高,细胞在7d后仍能保持较强的分泌白蛋白和合成尿素的功能,壳聚糖复合物上肝细胞的代谢活性更高.还从材料的化学结构和几何形态角度对这种材料的优势进行了讨论.     

修复前后Vero细胞调控草酸钙晶体生长的差异

采用扫描电子显微镜(SEM)和流式细胞仪等多种方法研究了降解大豆多糖(SPS)对损伤的非洲绿猴肾上皮细胞(Vero)的修复作用;研究了修复前后Vero调控草酸钙(CaOxa)晶体形成的差异。经H2O2氧化损伤的Vero在被SPS修复后,其细胞活力、细胞外SOD活性及细胞内线粒体膜电位均增加,细胞形态逐渐恢复到接近正常细胞。在诱导草酸钙(CaOxa)晶体生长过程中,修复细胞可以减少棱角尖锐的一水草酸钙(COM)晶体生成,诱导更多的二水草酸钙(COD)晶体。三种状态Vero诱导的晶体尺寸从小到大顺序为:正常细胞<修复细胞<损伤细胞。本文结果表明,降解大豆多糖可以修复受损伤的Vero细胞,降低肾结石形成的危险性,提示SPS有可能是一种潜在的绿色防石药物。     

质谱法定量测定高密度脂蛋白结合蛋白的糖基化水平

采用质谱法对4种高密度脂蛋白(HDL)的结合蛋白重组人载脂蛋白血清淀粉样蛋白A(SAA)、 α1-抗胰蛋白酶(A1AT)、 α2-人体血清糖蛋白(A2HSG)和A载脂蛋白C3(Apo C3)从蛋白质含量(蛋白的绝对定量)、 位点特异性糖基化(糖肽的相对定量)及聚糖位点占有率等方面进行了研究. 利用四极杆-飞行时间质谱仪(Q-TOF)测量糖蛋白标样酶解产物的二级质谱碎片离子, 用Byonic软件发现了新的糖基化位点信息, 即增加了原位点处聚糖糖型的种类. 对于A2HSG, 新增了N-糖基化156位点上的4种糖型, N-糖基化176位点上的6种糖型, O-糖基化319位点的4种O-聚糖和O-糖基化346位点上的1种糖型. 对于Apo C3, 只有O-糖基化94一个位点, 在此位点上新增了9种糖型. 同时, 调整了用于定量蛋白的多肽, 使得定量更加准确. 采用三重四极杆串级质谱仪(UPLC-ESI-QQQ)研究了4种结合蛋白中多肽和糖肽的多反应监测(MRM)行为, 并重新计算了每种聚糖的位点占有率, 优化了现有的定量方法.     

降解前后异枝麒麟菜硫酸多糖对草酸钙晶体生长的调控作用

采用过氧化氢法降解产于印尼的海藻异枝麒麟菜硫酸多糖(ESPS). 降解前ESPS的平均分子量为1410000, 硫酸基(OSO2-3)含量为16.0%(w); 而降解后其分子量显著下降至4819, 硫酸基含量则略微下降至15.2%. 采用体外模拟方法研究了降解前后ESPS对草酸钙晶体生长的抑制作用. 扫描电子显微镜(SEM)和X射线衍射(XRD)结果表明, 降解后ESPS能使一水草酸钙(COM)晶体数量进一步减少, 晶粒尺寸进一步减小. 当降解ESPS浓度从0.006 g·L-1分别增加到0.010 和0.050 g·L-1时, COM晶体平均尺寸由11.5 μm×2.9 μm分别减小到9.2 μm×2.9μm 和6.0 μm×2.5 μm, 晶体数量由3357 mm-2分别减少到2298和1532 mm-2, COM 的(101)面衍射峰强度I(101)与(010)面对应的(020)衍射峰强度I(020)之比(I(101)/I(020))由5.54 分别增加到16.2 和20.0. 结果显示, 具有小分子量的降解ESPS对草酸钙晶体成核与生长的抑制效果明显优于大分子量的未降解ESPS.     

枸杞多糖对白血病细胞作用热化学特征研究

用微量热法研究了枸杞多糖对小鼠白血病细胞L1210代谢作用的热化学特征。结果表明，枸杞多糖对L1210细胞代谢有明显的抑制作用，为枸杞在防治肿瘤中的应用提供了可靠的信息。     

基于框架核酸的细胞表面受体配体相互作用研究进展

细胞表面受体与配体之间的特异性相互作用在细胞生物学过程中起着重要作用。然而,与均相溶液不同,受体分子在细胞膜上的分布是非连续的、动态的,因此细胞表面的受体配体相互作用通常呈现复杂的非线性结合模式。框架核酸作为一类具有确定几何形状的DNA纳米支架,可用于多价配体的偶联,为深入揭示受体配体相互作用机制提供了可靠的工具。利用框架核酸纳米分辨率的可寻址特性,可实现对配体数目、间距及空间构象等参数的精确调控,进而研究细胞表面受体配体的结合特性及影响因素,优化结合条件最终实现高效的分子识别及靶向治疗。本文综述了基于框架核酸的细胞表面受体配体相互作用研究进展,通过探讨细胞表面受体配体相互作用的重要影响因素及生物学应用,对该研究领域的发展前景和未来趋势予以展望。     

有机太阳能电池给受体材料界面的微纳结构调控

有机太阳能电池因具有成本低、质轻、柔韧性好、可大面积印刷制备等优势,引起了人们极大的关注并成为现阶段有机电子学研究的重要热点之一。有机功能层中电子给体和受体界面特性对电池的功率转换效率影响很大,通过给受体界面的微纳结构化,可扩大给受体的接触面积、缩短给体和受体的距离、增强光吸收,能产生更多激子并促进激子有效分离,从而有效提高器件的电池效率。本文综述了纳米压印、自组装、溶剂挥发以及模板法等调控微纳结构的技术和方法,总结了基于微纳结构构建有机光伏器件的发展现状,并对目前微纳结构化方法和光伏应用中存在问题和研究重点做了简要评述,最后展望了该研究领域下一步的发展方向和应用前景。     

杯芳烃类受体的分子识别作用研究进展

综述了杯芳烃类人工受体的分子识别作用的研究进展。主要介绍通过非共价键作用引起的识别-配合与识别-催化作用。     

固本活血壮骨颗粒对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用

为探讨固本活血壮骨颗粒对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用,采用CCl4致大鼠肝纤维化模型,观察固本活血壮骨颗粒对肝功能及肝细胞损伤超微结构的影响。结果表明,固本活血壮骨颗粒明显改善肝细胞变性及炎性细胞浸润等情况,同时明显降低血清转氨酶活性、升高血清白蛋白,降低白蛋白与球蛋白比例并使之接近正常;电镜观察表明固本活血壮骨颗粒对实验性肝纤维化大鼠肝细胞线粒体等细胞器的损伤有保护作用。提示固本活血壮骨颗粒明显减轻四氯化碳所致的肝细胞损伤,保护肝细胞,改善肝功能。     

铅对海马神经元通道、受体和递质的影响及作用机制

综述了铅影响儿童学习记忆毒理机制研究的部分进展,即铅对海马神经元通道、受体和递质的影响及作用机制,包括铅对海马突触可塑性,离子通道,对NMDA受体、非NMDA受体及通道特性,神经递质和基因调控的影响。参考文献27篇。     

环境内分泌干扰物对雌激素受体表达与转录激活的调控效应及分析技术

环境内分泌干扰物(Endocrine disrupting chemicals, EDCs)种类繁多,来源复杂,环境污染普遍,对野生动物与人类造成了不同程度的暴露。EDCs可通过调控机体内分泌系统,干扰心血管、生殖、神经等多个系统的正常功能,从而引起机体代谢综合征、肥胖症、神经毒性、生殖发育毒性和癌症等的发生发展。污染物调控雌激素受体(Estrogen receptors, ERs)产生内分泌干扰效应是当前EDCs研究的主要方向。本文围绕ERs的基本生理特征、ERs表达与转录激活的分析检测技术,及EDCs调控不同组织来源ERs的生物学意义进行系统综述,以期从ERs激动/拮抗效应的角度,为新型化学品的内分泌干扰效应筛选及分子机制解析提供科学思路。