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反相高效液相色谱法分析化学合成胸腺素α1 总被引:2,自引:1,他引:2
利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,对化学合成的胸腺素α1进行了分析.采用PLATINUM C18柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm,10 nm),柱温室温;流动相A100%H2O(含0.1%TFA);B90%乙腈水(含0.1%TFA),18%B-A的等梯度洗脱;流速为1 mL/min;检测波长为214 nm;进样量为20 μL.用外标法定量.实验结果表明,该测定方法的检出限为4 mg/L;平均回收率为95.8%;日内精密度(用相对标准偏差RSD表示)均在10%以内,胸腺素α1在选定的浓度范围内具有良好的线性相关性.该方法简便、快速、准确,20 min内就可以完成一个样品的分析,故对胸腺素α1的定量分析具有重要的实用价值. 相似文献
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PEG修饰是改善蛋白质及肽类药物药代动力学特性的有效途径。然而与蛋白质相比,肽类化合物的分子较小,PEG的分子体积较大,其长链很可能会遮蔽肽的活性位点。因此,肽类化合物PEG修饰的位置和数量对于保持肽的生物活性至关重要。为阐明PEG修饰的位置与肽生物活性之间的关系,对肽类药物日达仙(胸腺素α1,Tα1)进行了定点修饰。Tα1具有α-螺旋、β-转角和无规卷曲的结构区域。分别在这些区域选择不同的位点进行PEG修饰。PEG的定点修饰是通过引入Cys,利用其-SH与mPEG-MAL的特异性反应而实现的。Con A刺激下的脾细胞产生IFN-γ试验的初步结果表明,PEG修饰对活性的影响与修饰的位置有一定的关系,大多数情况下,PEG修饰能保持Tα1的免疫活性。PEG修饰的位点对于保持肽的生物活性是很重要的。 相似文献
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利用离子交换色谱快速纯化α-淀粉酶 总被引:1,自引:0,他引:1
本文开发了一个用强阴离子高效液相色谱分离纯化α-淀粉酶的的新方法。详细讨论了纯比的最佳条件*在给定的条件下纯化工业α-淀粉酶,其活性回收率达96%,比活性为388u/mg蛋白,纯化倍数提高30倍,经SDS-PAGE分析,得到分子量分别为58K和33K两条α-淀粉酶谱带。此法纯化α-淀粉酶简单,快速,效率高。不仅能纯化工业粗酶,也可纯化其它来源的α-淀粉酶。 相似文献
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本文开发了一个用强阴离子高效液相色谱分离纯化α-淀粉酶的的新方法。详细讨论了纯比的最佳条件*在给定的条件下纯化工业α-淀粉酶,其活性回收率达96%,比活性为388u/mg蛋白,纯化倍数提高30倍,经SDS-PAGE分析,得到分子量分别为58K和33K两条α-淀粉酶谱带。此法纯化α-淀粉酶简单,快速,效率高。不仅能纯化工业粗酶,也可纯化其它来源的α-淀粉酶。 相似文献
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胸腺素α1的C端活性片段环肽类似物的合成与生物活性评价 总被引:1,自引:0,他引:1
用硫酯法合成了一系列Tα1的C端活性片段的环肽类似物, 以提高其活性与稳定性. 用促淋巴细胞增殖法测定了环肽类似物的生物活性, 结果表明, 环肽类似物较好地保留或提高了促淋巴细胞增殖活性. 相似文献
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聚(苯乙烯-二乙烯基苯)反相高效液相色谱填料在胸腺素α1分离中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
采用高聚物型苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)麦科菲反相高效液相色谱柱(MKF-RP-MH)分离胸腺素α1,优化色谱条件为:流动相A:0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0或8.0),流动相B:乙腈,梯度洗脱条件0~20 min,0%~10%乙腈,20~40 min,10%~30%乙腈;温度:30℃;流速:0.8 mL/min;检测波长:214 nm。在优化条件下分离了胸腺素α1标准品和样品。样品浓度在0.05~4 g/L时,线性方程为C=0.0099A-0.0798(r=0.9994),胸腺素α1最大载样量为120μg(6 g/L)。 相似文献
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本文比较了D290、D296、D370、D301、201×4、201×7等6种树脂对植物水提液中左旋多巴的静态交换和动态交换性能。筛选出D296用以研究不同pH、不同流速、不同解吸剂对吸附交换或解吸交换的影响。实验结果表明:用此工艺得到的产品,有关质量符合药典要求,收率可达4.0%以上。 相似文献
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离子交换法分离提纯木质素 总被引:4,自引:0,他引:4
本文研究了用蛇笼树脂分离粗木质素溶液中的小分子盐,用互贯磺酸树脂分离粗木质素溶液中的还原糖,以及用大孔和凝胶磺酸树脂对木质素分级作用。此外还研究了用离子交换法测定木质磺酸盐的磺化度和有木质磺酸盐存在时小分子盐含量测定,都得到了满意结果。 相似文献
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微波法固相合成二茂铁基α、β-不饱和酮 总被引:5,自引:0,他引:5
由于二茂铁具有芳香性,氧化还原可逆性,稳定性高,亲电性,毒性低等特点,其衍生物在材料学、电化学、生物学、医学等方面有广泛的应用[1,2]。本文报道以负载于氧化铝上的氟化钾为固体碱催化剂,使用微波法合成了一系列二茂铁基α、β 不饱和酮,并研究了芳香醛上取代基对反应的影响。Ar:a,C6H5 ;b,4 MeOC6H4;c,2 Furyld,4 Me2NC6H4;e,Ferrocenyl;f4 NO2 C6H4.1 实验部分1 1 试剂和仪器所用药品均为国产AR或CP级试剂。XPC 1显微熔点测定仪(温度计未校正)(四川大学科仪厂);Carlo Erb… 相似文献
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离子交换法分离乳酸的研究 总被引:4,自引:1,他引:4
本文对离子交换法分离乳酸的离子交换树脂、交换相平衡和交换动力学进行了研究,并在离子交换柱上测定了南开大学化工厂生产的201×4树脂的交换曲线。实验结果说明,用离子交换法分离发酵液中乳酸是可行的。 相似文献
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空气条件下高温固相合成层状LiMnO2及其离子交换的影响规律 总被引:2,自引:0,他引:2
在空气中高温固相反应合成了层次单斜结构前驱体NaMnO2,在不同条件下进行离子交换反应,得到LiMnO2。用X射线衍射法表征了前驱体及交换产物的晶体结构,用电感耦合等离子体光谱进行元素含量分析,用扫描电镜测定晶体的形貌。结果表明,离子交换反应条件对反应速率和产物的晶体结构与组成有重要影响。 相似文献
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大孔离子交换树脂分离纯化玻璃酸的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
本文选用了四种离子交换树脂进行分离纯化玻璃酸的研究。结果采用D315大孔离子交换树脂,以去离子水为淋洗液,0.6mol/L NaCl溶液为洗脱液,纯化效果较佳,纯化产品杂蛋白含量≤0.3%,回收率达71.1%,粘均分子量大于96万。 相似文献
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离子交换色谱法分离纯化鸡卵黄免疫球蛋白 总被引:2,自引:0,他引:2
建立了高效、经济、大规模获得鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的生产方法。在对传统的水稀释法改良的基础上,结合聚乙二醇沉淀与离子交换色谱进行IgY的分离纯化。结果显示,用8倍无菌水稀释蛋黄液,用0.1 mol/L HCl调节pH为5.2,在4 ℃下静置8 h,于5000×g力离心可得上清粗IgY液,经测定回收率可达93.47%。然后用6%聚乙二醇沉淀后经DEAE-Toyopearl 650 M离子交换纯化,最佳的纯化条件: 0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS, pH 7)平衡上样,0.075 mol/L PBS(pH 7)洗脱。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析结果显示所得的IgY的纯度为95.02%,活性保持率高达73.77%。本研究弥补了传统分离方法不能同时达到高纯度和高回收率的缺点,且可用于大规模生产。 相似文献
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高效离子交换色谱法分离和纯化蛋白质时,蛋白质在色谱柱上的不可逆吸附使柱效降低,柱压升高。本文使用2%的胰蛋白酶溶液在37℃下处理TSKgelCM-5PW和TSKgelDEAE-5PW(7×7.5mmI.D.)离子交换色谱柱24h后,柱压显著降低,柱效提高4~13倍,交换容量也得到恢复。离子交换色谱柱的恢复程度和交换容量与处理液的用量有关。 相似文献