牛血超氧化物歧化酶脂质体的稳定性

采用“逆相蒸发法”制备含有牛血细胞超氧化物歧化酶(Cu,2n—SOD)的大单层囊泡脂质体,经过一次Sepharose 4B柱层析得到纯化的SOD—脂质体(SOD—Luv);SOD—Luv可以有效地抵抗6.Omol/L盐酸胍的钝化作用;SOD—Luv可以有效地抵抗胰蛋白酶的消化作用。     

测定蛋白质的四溴荧光素分光光度法

在pH=2.0的Britton-Robinson(B-R)缓冲液中,牛血清白蛋白(BSA)与四溴荧光素(TBF)形成复合物,在波长540 nm处有最大吸收,比四溴荧光素本身的最大吸收红移25nm。对不同pH值及离子强度对其结合作用的影响进行了探讨,并研究了各种实验条件对反应体系的影响,确定了最佳反应条件,制订出BSA测定标准曲线。在四溴荧光素浓度为1×10-5mol.L-1时,其线性范围为0.05~12 mg.L-1,检出限为23μg.L-1(S/N=3),方法稳定性好,检测灵敏度高。该方法用于实际样品的测定,结果令人满意。     

异硫氰酸酯的合成

异硫氰酸酯是有机合成的中间体,它有着广泛的用途。合成它的方法很多,本文就其主要的几种进行了讨论。     

夏威夷椰子超氧化物歧化酶基因片段的克隆与序列分析

以热带植物夏威夷椰子(Chamae doreacostricana)基因组DNA为模板,根据SOD基因保守序列设计特异引物进行PCR扩增,得到特异基因片段.回收该基因片段,与pMD182T载体连接,并转化到感受态大肠杆菌ER2566细胞,获得Cu*Zn-SOD基因片段的克隆.序列分析表明夏威夷椰子Cu*Zn-SOD基因片段含3个外显子和3个内含子,编码64个氨基酸,与玉米、红薯和白杨相应氨基酸序列的同源性分别为82.81%,81.25%,81.25%和79.69%.     

烯丙基异硫氰酸酯在水溶液中的稳定性研究

采用温度、时间、pH、超声频率4个考察因素设计正交试验,研究其对水溶液中烯丙基异硫氰酸酯稳定性的影响.将异硫氰酸酯溶解在含有少量甲醇的水溶液中,通过HPLC检测烯丙基异硫氰酸酯的浓度变化,来考察各因素对其稳定性影响程度.结果表明,时间因素对烯丙基异硫氰酸酯降解的影响程度最大,其次是超声频率、温度、pH.对降解后的混合物...     

荧光素及其衍生物的荧光性质研究

以荧光素、荧光素甲酯和6-O-(乙氧基羧甲基)荧光素甲酯为研究对象,探讨了溶液中甲醇和乙腈的含量、溶液的pH值、光照时间以及温度四种因素对这3种物质荧光性质的影响,实验结果表明6-O-(乙氧基羧甲基)荧光素甲酯具有较好的耐溶剂性、光稳定性、热稳定性,并且其荧光强度受介质pH值影响小.     

高纯度荧光素钠的制备工艺研究

本文介绍了一种制备高纯度荧光素钠的新工艺。利用荧光素钠盐在DMF中与乙酰氯酰化,得到荧光素二乙酸酯。荧光素二乙酸酯的易结晶性可使杂质得以分离,再经过皂化、酸化、成盐的过程制得高纯度的荧光素钠。与常规工艺比较,该工艺具有产率高、纯化效果好的特点。产品纯度大于99％,产率大于78％。     

二氯卡宾与异硫氰酸反应机理的量子化学研究

用密度泛函理论B3LYP方法研究了单、三重态CCl2与HNCS的反应机理.在B3LYP/6-311＋＋G＊＊水平上对反应物、中间体和过渡态进行了全几何参数优化;通过频率分析和内禀反应坐标（IRC）方法确认了中间体和过渡态;并用CCSD（T）/6-311＋＋G＊＊//B3LYP/6-311＋＋G＊＊方法计算了各个驻点的单点能.结果表明,对于单、三重态CCl2与HNCS反应,共有4条可行的反应通道,且通道CCl2（S）＋HNCS→IM1→TS1→IM2→HCN＋CCl2S（P1）反应能垒最低,为该反应的主反应通道;单重态抽提亚氨基通道反应能垒也比较低,为主反应通道的竞争通道.可为进一步实验研究提供参考.     

荧光素荧光法测定痕量硫氰酸根的研究

报道了以荧光素为指示剂,荧光法间接测定痕量ＳＣＮ－的新方法．在ｐＨ＝５．５～７．５的中性缓冲溶液中,Ｉ２与荧光素反应,使荧光素的荧光猝灭．当加入ＳＣＮ－时,ＳＣＮ－和Ｉ２反应使体系荧光增强,该体系激发波长、发射波长分别为４９４ｎｍ和５１５ｎｍ,ＳＣＮ－含量在１．０～６０μｇ／Ｌ范围内呈良好的线性关系,检测下限为１．０μｇ／Ｌ．该方法灵敏度高,选择性好,用于吸烟人和非吸烟人唾液中痕量ＳＣＮ－测定,结果令人满意．     

荧光素荧光法测定大气中SO2的研究

报道了以荧光素为指示剂,荧光法间接测定大气中ＳＯ２ 的方法．在ｐＨ＝ ５．５ ～７ ．５ 中性缓冲介质中,Ｉ２ 与荧光素反应,使荧光素的荧光熄灭,当加入ＳＯ２－３ 时,ＳＯ２－３ 与Ｉ２ 反应使体系荧光增强,体系激发波长、发射波长分别为４９４ ｎｍ 和５１０ｎｍ ,ＳＯ２－３ 含量在２ ．１～６０．０ μｇ／Ｌ范围内呈良好线性关系,检测下限为２．１ μｇ／Ｌ．     

牛红细胞铜锌超氧化物歧化酶的循环伏安法研究

应用悬汞电极和金属铂电极测试了牛红细胞Ｃｕ２Ｚｎ２ＳＯＤ分别在ＰＨ７．０的０．０５ｍｏｌ／Ｌ硫酸钠溶液２及ＰＨ７．２６的０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲溶液中的氧化还原电位，发现－０．０１６Ｖ处有一还原峰，＋０．７０５Ｖ处有一氧化峰，并对其进行讨论。     

超氧化物歧化酶模型化合物的合成,表征和活性

本文报导乙二醇二乙醚二胺四乙酸(EGTA)和邻苯二胺共热缩合得到双核配体N,N,N′,N′-四(2′-苯并咪唑甲基)-1,4-二乙氨基乙二醚(EGTB)及合成的一系列含Cu(Ⅱ),Fe(Ⅲ),Mn(Ⅱ)的具或不具咪唑外桥的EGTB配合物,对配体的~1H NMR,IR,UV-Vis谱及配合物的IR,UV-Vis谱、元素分析、电导等性质进行了研究。并用硝基四氮蓝唑(NBT)光还原法和邻苯三酚自氧化法对配合物的超氧化物歧化酶活性进行了测定,结果发现配合物在10~(-6)～10~(-7)mol·L~(-1)的浓度范围内具有很好的歧化超氧离子自由基O_2~-的活性。     

不同无性系杨树叶片的超氧物歧化酶_SOD_同工酶谱比较研究

本文对不同无性系杨树叶片的超氧物歧化酶（ＳＯＤ）同工酶谱进行了比较研究，实验结果表明：不同无性系杨树叶片ＳＯＤ同工酶谱都具有较小迁移率的Ｓ带、中等迁移率的Ｍ带和较大迁移率的Ｆ带；Ｓ带为Ｍｎ－ＳＯＤ，Ｍ带和Ｆ带为Ｃｕ、Ｚｎ－ＳＯＤ．各无性系ＳＯＤ同工酶谱都具有１条Ｓ带和１条Ｍ带，Ｆ带数目在各无性系存在差异；青杨和黑杨的Ｆ带为３条，白杨的Ｆ带为６条，亲缘关系较近的青杨和黑杨ＳＯＤ同工酶谱较为相似，而与它们亲缘关系较远的白杨ＳＯＤ同工酶谱存在较大差异，ＳＯＤ同工酶谱分析可应用于杨属植物的分组、无性系及亲缘关系的鉴定。     

植物叶细胞中超氧化物歧化酶分布及性质的研究

油莱叶细胞中超氧化物歧化酶(SOD)主要存在于细胞溶质部分,约占细胞内酶活性的73.9％,亚细胞颗粒中占26.1％。细胞溶质中SOD同工酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳及活性染色后呈现7条谱带,其中电泳迁移率最低的两条为Mn—SOD,其余为Cu—Zn—SOD。Mn—SOD在pH值低于4或高于10时活性明显丧失。酶液在4℃存放两天Mn—SOD活性有所下降,而Cu—Zn—SOD有较好的稳定性。用表面活性剂十二烷基硫酸钠或还原剂β—巯基乙醇、二硫苏糖醇等分别作用时,两种SOD活性均有不同程度的下降。     

天然MnSOD活性中心的密度泛函理论研究

本文用密度泛函理论对天然MnSOD的活性中心进行了计算,从电子组态、前线分子轨道、Mulliken重叠布居和NBO分析等方面解释了天然MnSOD的活性,为MnSOD模拟化合物的分子设计提供了理论依据。     

修饰Cu,Zn超氧化物歧化酶的分子动力学模拟

使用分子力学和分子动力学方法建造并优化月桂酸修饰Ｃｕ，Ｚｎ超氧化物歧化酶的结构，优化结构与晶体结构数据之间骨架均方根偏差０．１７０ｎｍ。并在溶剂存在的条件下，对修饰酶进行了分子动力学模拟和构象分析，讨论了其结构与性能的关系，认为月桂酸修饰链无序性带来的熵效应是提高修饰酶稳定性的主要原因。     

大鼠CuZn—SOD cDNA的克隆及高效表达

采用PCR技术,扩增大鼠CuZn-SOD cDNA,双酶切后与表达载体pBV220连接,构建出表达质粒pBV-RCS,并转化大肠杆菌DH5α,经金属离子和42℃诱导,pBV-RCS得到高表达,经SDS－PAGE及薄层扫描测定表达蛋白占菌体总蛋白的49％,是目前国内外SOD高表达菌株之一^[1,2],表达蛋白以包涵体形式存在于菌体内,经超声波破壁后,再经透析复性和稀释复性,表达蛋白具有特异性SOD酶活性（1298U/mL)。α     

大蒜细胞培养及超氧化物歧化酶产生的研究

经8℃低温下贮藏一个月的大蒜,在添加0. 1mg/1KT 和2mg/12,4-D 的 MS 培养基中培养,产生大量的愈伤组织,间隔20天继代培养,愈伤组织能够脱分化地持续增殖。培养中,随愈伤组织的增长,细胞内超氧化物歧化酶含量亦随之提高。培养15天,比活达到33. 7U/mg 蛋白,比天然贮藏大蒜中的含量提高了56％。