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在甲肝减毒疫苗生产工艺中不同pH对疫苗得率有一定的影响,为提高疫苗的产量,在传统的氯仿抽提条件下,使用不同pH值(pH1.0~12.0)的磷酸盐缓冲体系进行氯仿抽提,检测抽提后甲肝病毒(HepatitisAVirus,HAV)抗原滴度和感染性滴度,结果表明经氯仿抽提后,HAV抗原滴度和感染性滴度均在pH8.0~9.0时最高,相应得率也比常规处理的得率有显著的提高.说明改进pH抽提条件对甲型肝炎减毒活疫苗后处理工艺效率的提高,成品疫苗产量的增加具有实际应用价值. 相似文献
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在甲肝减毒疫苗生产工艺中不同pH对疫苗得率有一定的影响,为提高疫苗的产量,在传统的氯仿抽提条件下,使用不同pH值(pH1.0-12.0)的磷酸盐缓冲体系进行氮仿抽提,检测抽提后甲肝病毒(Hepatitis A Virus,HAV)抗原滴度和感染性滴度,结果表明:经氯仿抽提后,HAV抗原滴定和感染性滴度均在pH8.0-9.0时最高,相对得率也比常规处理的得率有显著的提高。说明改进pH抽提条件对甲型肝炎减毒活疫苗后处理工艺效率的提高,成品疫苗产量的增加具有实际应用价值。 相似文献
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2株甲型肝炎病毒蛋白酶2A核苷酸序列的测定与比较 总被引:1,自引:1,他引:0
从甲型肝炎病毒2个不同株感染的KMB17细胞中提取总RNA,经RT-PCR特异性扩增出此2毒株病毒蛋白2A基因,将2个2A基因克隆到pGEM-T载体上,经DNA序列测定,得到2个2A基因的核心苷酸序列,序列比较发现它们及与HAV野毒株相对应序列有突变存在,H2株与HM175相比有一个点突变,同源性为99.72%;与HM175比较,H2株和L8株第3197位核苷酸均由A突变为G,相应的氨基酸由丝氨酸 相似文献
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猪瘟病毒HCLV株E2核苷酸序列与结构分析 总被引:2,自引:0,他引:2
用RT-PCR技术从CSFV HCLV株F482代感染兔脾的细胞总RNA中分段扩增出CSFV E2基因特异的3个部分重叠的DNA片段,并将之分别克隆到pGEM-T载体上,经核苷酸序列测定和片段重叠完成了包含E2全长基因的1144bp序列的测定,其GC含量为49.0%,核苷酸序列与国外报道的各株病毒的E2基因同源性分别不83.5%_97.5%. 相似文献
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对家蚕核型多角体病毒苏州株(BmNPVsu)半胺氨酸蛋白酶基因(CP)的序列分析表明,该基因读码框为972个核苷酸,编码323个氨。同源性分析表明,BmNPVsu CP的氨基酸序列与不同来源的木瓜蛋白酶超家庭的CP具有较高的同源性,特别与Trpanosomabrucei的CP具有较高的一致性,达32%。在组织蛋白酶B、H、L、S以及木瓜蛋白酶的36个保守氨基酸残基中有31种出现在BmNPUsu的CP中,BmNPVsuCP同其他杆状病毒CP一样,可看作木瓜蛋白酶超家庭成员。 相似文献
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利用疫苗对养殖鱼类进行疾病预防正得到逐步应用,而减毒活疫苗通过浸泡方式也能使鱼体获得较高的免疫保护力。利用模式动物斑马鱼对鳗弧菌减毒活疫苗MVAV6203的生物安全性进行了评价。首先进行了疫苗对斑马鱼毒性实验,每条鱼注射免疫的半致死量为9.26×10^4CFU;其次分析了鳗弧茵在水体中的存活情况,菌体浓度在1.0×10... 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52疫苗株S1基因的克隆与序列测定 总被引:2,自引:0,他引:2
根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因序列。设计了一对引物并以RT-PCR特异性扩增出IBV H52疫苗株的S1基因,基因产物大小为1.62kb,与设计相符,对其进行序列测定后,与其他标准毒株H120,M4l,BEAU株的S1基因进行同源性比较,结果表明,H52株与H120,M41和BEAU株的核苷酸序列的同源性分别为91.1%,96.9%和96.8%,由此可以看出,IBVH52疫苗株与标准毒株在Sl基因上具有高度的同源性。 相似文献
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用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从轮状病毒感染的细胞中扩增了916bp的VP7片段中抗原表位区。通过T4DNA连接酶将其直接连接于克隆载体质粒pGEM-T上,转化至受体菌DH5a中。提取质粒经PCR扩增、酶切鉴定,证明重组质粒pT-V7中含有轮状病毒的VP7基因片段。经核苷酸序列分析,表明正确克服了轮状病毒主要保护性抗VP7基因中抗原表位区。 相似文献
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提取BHK21细胞增殖的亚洲一型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus Serotype Asial)强毒株YNAs1.1的RNA,用一对引物P7,P13经反转录(RT)-PCR法扩增了约674bp的DNA片段。克隆目的基因后,采用双脱氧DNA链末端终止法测得了YNAs1.1的VP1基因36-633核苷酸序列。分析表明,病毒VP1基因的核苷酸序列与以色列以及印度已报道的Asia1型FMDV的同源性分别为82.11%与88.07%,对应的氨基酸序列同源性为87.94%与93.47%。该序列在GeneBank登陆号为AF241566。 相似文献
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用加速热稳定试验筛选甲型肝炎减毒活疫苗热稳定保护剂 总被引:1,自引:0,他引:1
为筛选具有良好热稳定保护效果的甲肝减毒活疫苗(H2株)保护剂,利用正交设计和加速热稳定试验,将不同配比的保护剂和液体疫苗混合后,封入安瓿,分别置37度和45度,不同时间取样,检测其感染性滴度,结果表明无保护剂的对照疫苗在45度条件下感染性滴度仅能维持2D不变,第3天开始下降,至4天已下降1.27logCCID50.mL^-1,而有保护剂的5批疫苗在45度条件下感染性滴度能维持5天无显著变化,在37度条件下无保护剂的对照疫苗感染性滴度仅能维持7天无显著变化,10天显著变化,下降1.0-1.1logCCID50.mL^-1,而有保护剂的5批疫苗在37度条件下感染性滴度能维持10天无显著变化,研究表明0.1mol.L^-1MgSO4,ω=5%,乳糖,0.01mol.L^-1精氨酸,0.01mol.L^-1甘氨酸组成的保护剂具有最佳保护效果,其热稳定保护效果明显优于现在使用的对照疫苗。 相似文献
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免疫沉淀法分离纯化感染细胞中的甲肝病毒RNA 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究采用抗血清(多抗血清)沉淀甲肝病毒,并用盐酸胍酸性酚,氯仿一步法分离纯化病毒RNA.此方法能排除非病毒RNA的污染,操作简单,要求条件较低,RNA的纯度和完整性都较好 相似文献
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Pan Zi-shu Chen Yu-dong Shao Hua-bin Yang Jun Xiong Zhong-liang Wen Guo-yuan Zhang Chu-yu . College of Life Sciences Wuhan University Wuhan Hubei China . Institute of Animal Husbandry Veterinary Science Hubei Academy of Agricultural Science Wuhan Hubei China 《武汉大学学报:自然科学英文版》2004,9(3)
Newcastledisease (ND )isaseriousaviandiseasewithworldwidedistributionthatcancausesevereeconomicloss esinthepoultryindustry .Thecausativeagentofthedisease ,newcastlediseasevirus(NDV)alsoknownasavianParamyxovirustype 1,isamemberoftheParamyxoviridaeandcontainsasin gle strandednegativesenseRNAgenomeencompassing 15 186nucleotides[1 3] .Theviralgenomecontainssixgenes ,whichen codetheviralnucleoprotein(NP) ,phosphoprotein(P) ,matrixprotein(M ) ,fusionprotein (F) ,hemagglutinin neuraminidase(HN… 相似文献
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本文用恒河猴胚肾传代细胞(MEK)、人胚肺成纤维二倍体细胞(KMB17和2BS)对HAV-H2株感染性滴度进行了初步研究,结果显示H2株在MEK上感染性滴度(CCID50/mL)最高,CCID50/mL比KMB17,2BS平均CCID50/mL高1.28log和1.59log.经统计学分析,P<0.05,有显著性差异,证实MEK对H2株最敏感.MEK可能是测定HAV感染性滴度和繁殖HAV较理想的细胞 相似文献
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首次把生长特性有显著差异的 2株甲型肝病毒 (L8株、H2 株 )的蛋白酶 2A基因分别用基因工程技术克隆到大肠杆菌表达载体 pGEX -KG上 ,重组质粒转化至大肠杆菌 (E .coliBL - 2 1和DH5α)中 ,表达的结果显示 :2株甲型肝病毒的蛋白酶 2A均得以表达 ;表达量占菌体总蛋白 2 0 %以上 .为进一步纯化该蛋白酶、研究其生物学功能和与真核细胞代谢的关系奠定了基础 . 相似文献
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In this study, recognition of 4 recombinant viral proteins (GST?NHA1) by the antibodies induced by multi?epitope vaccine was testified. Inhibitory activities of these antibodies were also investigated in vitro against four heterologous influenza A viruses (H3N2). Three epitope?specific antibodies purified by affinity chromatography could reduce the plaque formation. Interestingly, the three neutralizing antibodies in combination showed obvious enhancement of inhibitory activity, suggesting that the development of recombinant multi?epitope vaccine might be an effective way against viral mutation. 相似文献
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从中国非甲—庚型肝炎病人中克隆到TT病毒样DNA序列 总被引:3,自引:0,他引:3
从中国非甲-庚型肝炎病人中克隆到TT病毒样DNA序列张军1杨海杰1苏智军2张奕返2林长青1黄鹤1郭庆1王颖1曾定1夏宁邵1(1厦门大学肿瘤细胞工程国家专业实验室厦门3610052福建省泉州市第一医院泉州362000)肝炎是严重危害我国人民身体健康的疾... 相似文献