诺卡氏菌株胞外β-淀粉酶的分离和鉴定

诺卡氏菌株（Nocaridasp．）82除去菌体的发酵液经硫酸镀沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析、SephadexG－200凝胶过滤，得到高纯度的β-淀粉酶。用SDS－PAGE测定酶蛋白分子量为53000，不具亚基；酶反应最适pH和温度分别为7．0和60℃，有较高的热稳定性；Fe2十和Zn2+对酶活力有促进作用，而Hg2+对酶活力有抑制作用。     

大豆β－淀粉酶的纯化和性质研究

主要介绍大豆β－淀粉酶的分离纯化。首先通过酸抽提得到粗提物，再经过乙醇沉淀，百里香草酚吸附和超滤技术进行纯化，纯化的酶用聚丙烯酰凝胶电泳检测为三条带。回收率为３５．８％；酶的比活为３４１ｕ／ｍｇ蛋白。分子量为５．３万，等电点为５．２；最适ｐＨ５－６，最适温度４０—５０℃．     

水、旱稻幼苗β－淀粉酶酶学性质的比较研究

以四种抗旱性不同的水、旱稻幼苗的茎、叶为实验材料，应用ＤＮＳ法测定β－淀粉酶的活性，比较抗旱性不同品种间β－淀粉酶酶学性质（包括酶的最适温度、热稳定性、抑制剂和激动剂对酶活性的影响以及Ｋｍ值）的差别．结果表明，所有供试品种β－淀粉酶的最适温度为４０℃；不抗旱的８３－８和８２－１β－淀粉酶的热稳定性强于抗旱的秦爱和７８－８－１０；ＥＤＴＡ和Ｃｕ２＋，Ｚｎ２＋，Ｍｇ２＋，Ｐｂ２＋和Ｈｇ２＋等金属离子是β－淀粉酶的抑制剂，Ｍｎ２＋，Ｂａ２＋，Ｃｏ２＋和Ｃａ２＋等金属离子β－淀粉酶的激动剂；旱稻品种β－淀粉酶的Ｋｍ值大于水稻．     

大豆β—淀粉酶的纯化和性质研究

主要介绍大豆β－淀粉酶的分离纯化。首先通过酸抽得到粗提物，再经过乙醇沉淀，百里香草酚吸附和超滤技术进行纯化。纯化的酶用聚丙烯酰凝胶电泳检测为三条带。回收率为３５．８％；酶的比活为３４１ｕ／ｍｇ蛋白，分子量为５．３万，等电点为５．２；最适ｐＨ５－６，最适温度４０－５０℃。     

植物β－淀粉酶的提取与酶粉剂的制备

报道用甘油作溶剂，提取植物β－淀粉酶的优化提取条件；提取液的保存与纯化以及酶粉剂的制备．     

从高等植物中水提β－淀粉酶的研究

用含有还原剂的水提取麦芽、小麦、大豆等多种植物原料中的β－淀粉酶，探讨原料组织状态及水提温度、时间、水及还原剂用量等因素对β－淀粉酶提取率的影响。     

硅藻土对诺卡氏菌的吸附作用

研究了吉林长白硅藻土吸附水相中诺卡氏菌的吸附过程,讨论了吸附时间、硅藻土用量、溶液初始pH值和吸附温度等实验条件对吸附效果的影响·实验结果表明,硅藻土对水相中的诺卡氏菌具有较好的吸附效果·该吸附过程进行得较快,在20min左右即可达到吸附平衡;在溶液初始pH值为7 0～9 0内都有较好的吸附效果;温度对吸附过程的影响不大,室温条件下操作即可;在诺卡氏菌浓度一定的条件下,适量增加硅藻土用量可以提高吸附效果·扫描电镜分析结果表明,硅藻土表面的微孔和诺卡氏菌表面的菌丝可能是吸附过程的主要吸附位·     

诺卡氏菌对养殖水体中氨氮的降解特性研究

应用诺卡氏菌Nocardia对影响氨氮降解的各种主要因素进行了研究,发现降解菌在30℃,pH7．2及氨氮初始浓度0～30mg／L范围内保持高活性,最大降解速率达3．5mg／L·h。当底物浓度大于50mg／L时,平均降解速率线性下降。当接种量(菌悬液／反应液)为20mL/100mL时氨氮的降解是高效与经济的。     

1株耐盐拟诺卡氏菌株的分离及初步鉴定

从青海高盐环境中分离到1株拟诺卡氏菌形放线菌YIM90039，该菌株具有典型的拟诺卡氏菌属的形态学特征．通过对其进行的形态学、生理生化特性、细胞壁化学组分以及16S rDNA序列等方面的分类学研究。菌株YIM90039初步鉴定为拟诺卡氏菌属的一个潜在新种．该菌株在大多数培养基上生长良好，气生菌丝大都呈黄白色，基内菌丝浅橙黄色至深橙黄色．气生菌丝上有长短不一的孢子链，基内菌丝则长，多分枝。常断裂成杆状。     

纤维素诺卡氏菌降解玉米秸秆和玉米芯的研究

纤维素诺卡氏菌可以纤维素作为唯一碳源进行固氮生长,利用它对天然纤维素材料玉米秸秆和玉米芯进行降解研究,结果表明纤维素诺卡氏菌可利用CF－11作为唯一碳源和能源生长,同时对玉米秸秆具有很强的降解能力,对玉米芯具有较强的降解能力,经10天固体培养,纤维素诺卡氏菌对玉米秸秆的降解率达到54．78％,高于对照菌青霉的降解率,而对玉米芯的降解率为17．55％。     

一株产淀粉酶的克雷伯氏菌株的分离鉴定及其产酶条件优化

从酒酿、酒曲样品中,采用透明圈法对淀粉酶产生菌株进行初筛,并通过测定酶活对其进行复筛.对所筛选出的产淀粉酶能力较高的菌株进行形态特征观察、生理生化鉴定及16S rDNA序列测定.经鉴定是克雷伯氏菌属,将其命名为Klebsiella sp.ZSY-I.通过正交实验对该菌株产酶的影响因素进行优化,结果表明：对菌株产酶影响较大的因素依次为KNO3、温度、淀粉和pH.该菌株在淀粉含量为2.5%,KNO3含量为1.25%的培养基上,30℃和初始pH为7.5,培养24 h后,酶活力达到最高为14.66 U/mL.     

诺卡氏T-01菌降解十二烷基苯磺酸钠的研究

得出了诺卡氏T－01菌对比较难生物降解的十二烷基苯磺酸钠（ABS）有较强的降解能力的结论．当pH＝7～8，ABS的浓度为30～50mg／L，时间为50～60h时，降解效率可达90％以上；ABS的浓度为100g／L以下时仍有较好的降解能力．     

诺卡氏菌催化环氧琥珀酸水解反应的影响因素

诺卡氏菌经超声波破碎后，环氧琥珀酸水解酶活性比完整细胞提高40倍以上，表明细胞通透性对酶的表现活性影响很大。用顺式环氧琥珀酸二钠溶液处理诺卡氏菌细胞，可使细胞的通透性提高，表观环氧琥珀酸水解酶活增大，转化反应时间缩短。底物不存在时，诺卡氏菌细胞的环氧琥珀酸水解酶在37℃不稳定，游离细胞的表观酶活半衰期为19min，破碎细胞酶活仅10．4min，表明内源蛋白酶是造成破碎细胞环氧琥珀酸水解酶不稳定的重要原因。完整诺卡氏菌细胞于37℃放置后再将细胞破碎，环氧琥珀酸水解酶的半衰期为144min，表明37℃放置后细胞通透性受到较大影响。存在底物时完整诺卡氏菌细胞于37℃放置后表现酶活基本不变。     

α—淀粉酶的纯化

枯草芽孢杆菌（Bacillus sublilis）BF7658产生的α－淀粉酶，经絮凝、流水 层析和DEAE－－纤维素层分析进行了提纯。提纯的酶活力为132413．8U／g，与业用酶相比，纯度提高19－22倍，为精酶。用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，图谱上只出现单一的区带。     

碱性纤维素酶产生菌株的筛选及其酶学性质研究

【目的】从堆肥中筛选和鉴定产碱性纤维素酶的菌株,对菌株及其酶学特性进行研究。【方法】以刚果红平板染色法进行初筛,摇瓶发酵复筛,分离到高酶活菌株C73。通过形态观察和16SrRNA序列分析对菌株进行鉴定。采用DNS定糖法测定发酵液酶活最适pH值、pH值稳定性、最适温度、热稳定性及常见金属离子、SDS、EDTA等对酶活的影响。【结果】该菌株形态呈杆状,革兰氏阳性,不产芽孢,适宜在pH值8.0~11.0、30~37℃条件下生长。16SrRNA序列比对发现,该菌株与琼斯氏菌(Jonesiasp.)PC1序列相似度大于99%,初步鉴定为琼斯氏菌属菌株。在发酵培养基中,菌体浓度和CMCase活力分别在40h和50h达到最大值,随着发酵时间的延长发酵液pH值稳定在9.5左右。粗酶液的最适作用pH值为10.0,此时CMCase活力达2.3U/mL。在pH值8.0~11.0的范围内保持60%以上的酶活;最适作用温度为60℃,且在30~80℃的范围内保持60%以上的酶活。金属离子Mn2+、Co2+和(NH4)2SO4对酶活力有较强的抑制作用。【结论】菌株C73呈现较高的碱性CMCase酶活、较高的热稳定性和pH值稳定性,具有良好的工业应用前景。     

土壤中产a-淀粉酶菌株的分离和筛选

目的：从土壤中筛选产a-淀粉酶活力较强的菌株并对其酶学性质进行初步研究。方法：结合选择性分离培养,碘液检测法,酶活力测定和形态学检测等方法从土壤中分离出产酶活力较强的菌株,并对其所产仅一淀粉酶的最适反应温度和pH值进行研究。结果：共分离到4株能产a-淀粉酶的菌株,其中菌株4产酶活力最高。该菌株所产仅一淀粉酶最适反应温度为50～60℃,最适pH值为6．2。结论：分离到1株产a-淀粉酶酶活力较强的芽孢杆菌,所产仪一淀粉酶属于中温淀粉酶,最适pH值为6．2。     

固定化诺卡氏菌批次连续转化生产L(+)酒石酸

采用卡拉胶包埋具有环氧琥珀酸水解酶活性的诺卡氏菌用于生产L( )酒石酸。为了提高细胞固定化的效率,采用自制的固定化装置,将固定化细胞制成细条状,可以加快固定化细胞的制备,获得具有高活性和强度的固定化细胞颗粒,固定化细胞的最佳菌体浓度为100 g(湿细胞)/L。将固定化细胞用于填充床反应器进行反复批式反应,可以反复利用48次以上,将0.85 mol/L的环氧琥珀酸溶液转化为L( )酒石酸,酒石酸的得率不低于96%。     

发芽黄豆β-淀粉酶的提取研究

通过实验比较了黄豆发芽前后β-淀粉酶的活力及影响发芽黄豆β-淀粉酶提取的主要因素，确定了最佳提取参数。结果表明，在黄豆发芽的第三天，提取液的β-淀粉酶的活力为最大；最佳提取条件是，以1g／L的亚硫酸氢钠为还原剂，温度为40℃，pH值为5．7，提取液放置时间为1．5h．