一株耐高温纤维素降解菌的分离筛选及鉴定

为了分离筛选耐高温的纤维素高效降解菌,从鸡粪蘑菇渣高温堆肥中取样,采用滤纸富集培养基进行富集培养、刚果红纤维素培养基进行分离纯化培养、滤纸条培养基和刚果红纤维素培养基进行初筛培养、液体发酵测定纤维素酶活法进行复筛培养,利用形态特征观察、生理生化特征检测和基于16S rRNA基因序列的系统发育分析法进行初步鉴定,结果分离筛选到1株耐高温纤维素降解菌XD-3.该菌株在50 ℃生长良好、羧甲基纤维素酶(CMCase)活力达6.14±0.37 U/mL.综合形态特征、生理生化特性、基于16S rRNA基因序列的系统发育分析,菌株XD-3初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）.     

牛源纤维素降解菌的分离筛选与鉴定

为了提高牛粪中的纤维素降解效率,筛选牛粪发酵菌剂的优良菌种,采用连续稀释平板法,以羧甲基纤维素纳(CMC-Na)为碳源,从新鲜牛粪和腐熟牛粪中对纤维素降解菌株进行初步分离.对所得菌株进行纤维素水解圈测定,并进一步采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定纤维素酶活,再结合菌落形态、生化反应特性和16S rDNA序列分析进...     

一株分解纤维素的肠球菌的分离鉴定

从绵羊瘤胃内容物中分离出一株高效纤维素降解细菌.经形态学、生理生化反应和基因型的鉴定,鉴定为肠球菌属的一个种,其16S rDNA序列(1480 bp)在NCBI中的登录号为EU106047,并将所测得的序列用Clustal W软件按Neighbor-Joining方法构建了16S rDNA系统发育树.     

一株多氯联苯降解菌的分离鉴定及基因分型

从深海底泥中分离筛选出一株以多氯连苯（PCBs）为惟一碳源和能源生长的菌株, 命名为pdi. 该菌在含有PCBs 7.5 mg/L的150 mL液体培养基中培养7d, 用GC MS检测其对PCBs的降解率达95.38%. 以细菌16SrDNA通用引物对pdi基因组进行PCR扩增, 得到~1　500　bp的片段. 经纯化, 测序后在Genbank上进行同源性比较分析及系统发育树构建, 该菌与Pseudomonsa spTS1138同源性达100%, 初步鉴定该菌为假单胞菌属. 对pdi基因组进一步运用RAPD分子标记技术进行随机引物扩增基因分型, 获得了稳定的DNA 指纹图谱.     

一株纤维素降解菌的分离和鉴定

为得到降解纤维素能力较强的细菌,以腐殖土壤为菌株来源筛选、分离纤维素降解细菌。对所取土样稀释一定比例进行涂布平板,以羧甲基纤维素钠（CMC-Na）为唯一碳源培养,用刚果红染色的方法筛选有透明圈的菌株,得到一株编号为YBX-52的纤维素降解细菌。在产酶培养基中以30 ℃培养48 h,用DNS法测得滤纸酶活力(FPA)为221.75 μmol/min、羧甲基纤维素酶活力(CMC)为274.56 μmol/min。以16 SrDNA通过序列对比,构建YBX-52系统发育树,结合其生理生化特征将其鉴定为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)。     

一株降解草甘磷的真菌分离鉴定

草甘磷 (Ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ)是一种对植物具有非选择性广谱杀生作用的除草剂 ,具有高效、低毒、低残留、不破坏生态环境等优点 ,故广泛应用于农田杂草防治 .但是由于草甘磷杀生作用的非选择性 ,在杀灭杂草的同时 ,往往对农作物造成药害 ,因而给该除草剂的应用带来一定的影响 .所以研制抗草甘磷的转基因作物一直是研究的热点[1] .许多微生物对草甘磷具有降解作用 ,这类微生物对土壤和叶面上的草甘磷有良好的降解作用 ,若将降解草甘磷的基因克隆后转入农作物 ,在植物中将草甘磷快速催化代谢为无毒产物 ,就可解除草甘磷对农作物的危害[2～ 5…     

石油降解菌的分离与鉴定

按照石油污染土壤微生物修复技术目前发展的方向,本论文针对天津大港油田地区石油污染盐碱土壤的现状,经过分离、筛选、复筛,从大港油田的石油污染土壤中富集分离、优选出2株石油降解菌,并进一步研究了2株菌的生理生化特性.菌株鉴定结果表明,菌株DB-1属于假单胞杆菌属,菌株DF-1属于曲霉菌属.     

一株聚丙烯酰胺降解菌的分离鉴定及其生物降解

应用厌氧Hungate技术,从大庆油田常规污水回注工艺采油的采出液中分离到一株聚丙烯酰胺降解菌株A9。对该菌株进行形态、生理生化、分子生物学鉴定结果表明:菌株为革兰氏阳性(G ),短杆状,具有硫酸盐还原功能,产H2S,兼性厌氧,通过核糖体16S rDNA基因序列鉴定,菌株与Anaerofilum pentosovorans(AP716816S)的相似性为98%,暂时命名为Anaerofilum pen-tosovoransA9。扫描电镜和红外光谱分析结果表明:菌株以聚丙烯酰胺为唯一碳源,菌株作用前后表面结构发生变化,分子链上的酰胺基水解成羧基,侧链降解,部分官能团发生改变,浓度为500mg/L时,20 d菌株生物降解率为61.2%,其溶液粘度下降显著。气质联机(GC-MS)初步分析表明:聚合物发生断链生成的低分子量化合物除含双键、环氧和羰基的聚丙烯酰胺碎片外,大多属于一般丙烯酰胺低聚体的衍生物。     

四株纤维素降解菌的生化性质研究

[目的]对分离筛选得到四株纤维素降解菌进行生化性质研究,为纤雏素降解菌的研究与开发应用提供依据.[方法]从健康水牛的新鲜粪便中分离筛选得到纤维素降解菌,然后对其生化性质进行了研究;并比较研究pH值、碳源、氮源及培养时间对不同菌株繁殖能力的影响.[结果]四株纤维素降解菌分别在接种后22h、23h、13h、16h时长势最好,最适PH值分别为8.5、8.5、8.5、8.5、8.0,最适生长的碳源分别是葡萄糖、麦芽糖、麦芽糖、麦芽糖,最适生长的氮源分别是大豆蛋白胨、牛肉膏、尿素、牛肉膏;[结论]不同的纤维素降解菌株的生长速度及最适pH值、碳源、氮源都不相同,这些数据给下一步研究提供了依据和基础.     

一株降解芘的苍白杆菌的分离、鉴定及性能表征

采用富集培养的方法从北京焦化厂多环芳烃（PAHs）污染土壤中筛选到一株高效降解芘的微生物,命名为PW,分子生物学等手段鉴定此菌株属于苍白杆菌属（Ochrobactrum sp.）。经一次性大剂量方法对此菌株进行驯化后,考察了摇瓶条件下环境因素对此菌株降解芘效率的影响。结果表明,驯化培养使得菌株5d内对0.5mmol/L芘的降解率由62.3%提高到92.7%。此外,该菌株的环境耐受性好,在环境温度为20~40℃下该菌株对芘均具有一定的降解能力,30℃培养时降解效果最好;在pH为5~10的培养基中,PW对芘的降解率均在45%以上;当盐度小于3%时,此菌株对芘降解率在60%以上;同时菌株PW还可耐受一定浓度的重金属。     

酒糟泥中纤维素降解菌的筛选与鉴定

利用羧甲基纤维素钠培养基及刚果红染色从酒糟泥中筛选具有纤维素降解能力的菌株,利用DNS法测定纤维素降解能力最强的菌株6d内的滤纸酶活,并从形态学和分子生物学两方面对该菌株进行初步鉴定.结果表明:从酒糟泥中获得4株长势良好的菌株,其中菌株FIB-3刚果红染色后的透明圈直径与菌落直径比值(1.88±0.175)最大,并且该...     

纳木错牦牛粪便中纤维素降解菌的鉴定及产酶特征

通过富集、纯化从西藏纳木错的牦牛粪便中筛选得到2株高效纤维素降解菌株,采用滤纸条崩解试验测定不同培养温度、培养时间和初始pH值条件下纤维素降解菌株的产酶特征,并初步分析了目标菌株的遗传地位.结果表明,菌株X1和X2具有显著降解纤维素优势,两菌株在培养温度9℃、培养时间6 d、初始pH值4的条件下,产出的纤维素降解酶具有较强的相对酶活性.系统发育分析显示,X1和X2可能为Cronobacter属菌株.     

2株石油污染降解菌的分离与鉴定

分别从大庆油田和新疆油田油井旁土壤中分离筛选得到2株石油污染降解主体菌株,并对他们从形态结构、16SrDNA序列分析及生理生化特征进行了初步的菌种分类鉴定.结果表明菌株DQ-1属于假单胞菌属、T6190属于迪茨氏菌属.菌株T6190可以降解脂肪族烃类,3d降解率达到40.7%;而DQ-1可以降解芳香族烃类,3d降解率达到83.07%.     

两株有机磷农药降解菌的分离鉴定及降解特性

从长期受有机磷农药污染的种植地土壤中分离到两株降解有机磷农药的细菌M1、M2.对所分离的菌株进行形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析,初步鉴定M1菌株是恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida),M2是Ludwigii肠杆菌(Enterobacter ludwigii).菌株M1、M2对甲基对硫磷、毒死蜱的耐受浓度在含有1%蔗糖的无机盐培养基中达到500 mg/L,对乐果的耐受浓度高达1 000 mg/L.在土壤模拟体系试验中,培养第32天,菌株M1、M2对土壤中甲基对硫磷的降解率分别为85%、93%;培养第48天,对土壤中毒死蜱的降解率分别为71%、81%.     

一株降解氧乐果的高效菌的分离和鉴定

从蔬菜地泥土中分离到一株降解氧乐果（omethoate)能力强的芽孢杆菌（Bacillus),对此株菌的个体形态,生理生化特点进行了分类研究,确定该株菌为巨大芽孢杆菌（Bacillus megateium),其中主要特性以及芽孢形成,与伯杰氏细菌鉴定手册描述的相同,研究还表明,该菌能够在以氧乐果为唯一碳源的基础培养基础中生长得很好,生长一周后,以未接种的基础培养基为空白对照,以同时从泥土中分离到的降解氧乐果细菌作为降解效率对照,在波长为560nm处,测得该菌的OD值为1．032,明显高于降解效率对照,证明了该菌对氧乐果有很好的降解效果。     

毛乌素沙地典型湖滨湿地土壤石油降解菌分离与鉴定

实验分析了陕西毛乌素沙地典型湖滨湿地土壤理化性质和石油降解菌的分离与鉴定,为沙化环境下湖滨湿地微生物修复石油污染提供科学依据。2006—2013年,在巴吓采当距湖边1m,10m和50m处共采集9个土样,测量了各土样的有机质、硝态氮、铵态氮和全磷等理化性质,分离出5种石油降解菌,利用16S rDNA进行鉴定。湖滨湿地pH值最高值为7.52,最低值为4.88。土壤中有机质、全磷含量分别在3.47~72.36,0.28~1.04g/kg,硝态氮、铵态氮和速效磷含量分别在2.57~14.19,16.53~37.45,3.93~10.26mg/kg。16S rDNA测序比对结果显示,巴吓采当湖滨湿地石油降解菌为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)和苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)。巴吓采当湖滨湿地土壤为偏酸性,土壤肥力比红碱淖地区高。     

纤维素酶产生菌的分离和鉴定

利用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，从齐市糖厂弃渣塘的土样中，分离到了一株纤维素分解能力很强的真菌（ＱＣＦ３），根据形态特征，可鉴定为绿色木霉。     

一株产碱性蛋白酶菌株的分离与鉴定

从黄石市土壤中分离到一株产碱性蛋白酶的革兰氏阴性杆菌,不产芽抱,具美膜．能在ｐＨ９－１１条件下生长、产酶．产酶最适ｐＨ值为９,最适温度为３７℃,适发酵时间为３６ｈ．发酵产酶量为４５．０Ｕ·ｍＬ－１根据实验结果,该菌株鉴定为毛状假单抱菌Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｌａｓｉａ．     

一株疏水性石油烃降解菌的鉴定

从石油污染的土壤中分离纯化得到1株能以石油为唯一碳源和能源生长的石油烃降解菌,命名为HDB-1,通过形态特征、培养特征、生理生化特征及16SrRNA基因序列分析,初步鉴定该菌为假单胞菌属细菌(Pseudomonas)。     

一株聚丙烯酰胺降解菌株的分离培养及其系统发育分析

应用Hungate厌氧技术,从大庆油田聚合物配注站的母液罐中分离到一株水溶性超高分子量聚丙烯酰胺(HPAM)的降解菌株I8,该菌株为短杆状,G-,黑色圆形菌落,最适温度为38℃,最佳pH值为7.8,具有硫酸盐还原功能,产H2S气体,兼性厌氧.研究表明,该菌株能以HPAM为唯一碳源,降解侧链,部分官能团发生改变;浓度为600 mg/L时,20 d菌株生物降解率为63.17%,其溶液粘度下降效果显著.16S rDNA序列与Enterobacter cloacae(ECL251469)的相似性为98%,通过形态、生理生化、G C含量以及16S rDNA序列鉴定,初步鉴定可能为肠杆菌属的一个新种,暂时命名为Enterobacter HPAM Dcgraded Bacteria I8,I8菌株的分离为HPAM的生物降解提供了新的微生物资源.图4,参14.