PMOXA/PAA混合刷用于毛细管电泳在线富集牛血清蛋白

本文发展了一种对蛋白质具有吸附/释放功能的二元混合刷涂层(BBC)毛细管,并将其用于蛋白质的在线富集. 通过阳离子开环聚合可逆加成断裂链转移聚合,分别合成了末端为氨基的聚(2-甲基-2噁唑啉)(PMOXA-NH₂)以及末端为巯基的聚丙烯酸(PAA-SH). 然后通过聚多巴胺黏合层将PMOXA-NH₂和PAA-SH依次接枝到熔融硅毛细管内表面,制备出基于聚(2-甲基-2-噁唑啉)(PMOXA) 和聚丙烯酸(PAA)的BBC毛细管. 利用扫描电镜、X射线光电子能谱分析了在毛细管内表面或毛细管原材料上形成的PMOXA/PAA涂层的厚度及组成. 通过荧光显微镜研究了一定pH及离子强度(I)下,BBC毛细管对蛋白质的吸附/释放功能. 结果表明, pH=5.0 (I=10^-5 mol/L)时,BBC毛细管可以吸附牛血清蛋白(BSA),而当pH=9.0 (I=10^-1 mol/L)时,吸附的BSA可被释放出来. 将这种具有蛋白质吸附/释放功能的涂层管用于毛细管电泳在线富集BSA,以提高BSA的检测灵敏度. 结果表明,在最佳条件下,BSA的灵敏度增强因子超过了5000.     

一种新型含炔基的聚合2-乙基-2-噁唑啉引发剂的合成（英文）

本文利用2-苯基-1,3-二氧六环-5-醇合成了含有一个炔基和两个三氟甲磺酸酯基的三官能团引发剂.首先,2-苯基-1,3-二氧六环-5-醇与炔丙溴反应制得含炔基的中间体.然后在稀盐酸和四氢呋喃水溶液中反应制得含双羟基的中间体,最后在四氯化碳中与三氟甲磺酸酐反应制得新型引发剂.该引发剂的结构由核磁共振氢谱确认.并且用该引发剂引发2-乙基-2-噁唑啉的聚合,得到窄分布的聚合物.作为对比,本文同时合成了一种含两个甲苯磺酸基的引发剂,由于两个甲苯磺酸基之间存在较大的空间位阻,该引发剂聚合所得的聚(2-乙基-2-噁唑啉)分布较宽,并且在反应后的体系中存在大量的未反应的引发剂.为了进一步研究位阻效应对2-乙基-2-噁唑琳聚合的影响,合成了一种线性的含一个甲苯磺酸基的引发剂,用该引发剂引发聚合体系中仍有大量未反应的引发剂存在,说明位阻效应和亲电平衡均会影响2-乙基-2-噁唑啉的阳离子开环效率.聚合物分子量及分子量分布通过核磁共振氢谱,基质辅助激光解吸电离-时间飞行质谱和尺寸排阻色谱表征.     

聚电解质包覆的铕(Ⅲ)配合物@SiO2荧光纳米粒的合成与性质

以二苯甲酰甲烷(DBM)、邻菲罗琳(phen)和丙烯酸(AA)为配体,制备了铕的配合物Eu(Ⅲ)(DBM)2-(phen)(AA).利用St(o)ber法合成了SiO2纳米粒.通过超声辅助,将脂溶性的强荧光铕配合物吸附到SiO2纳米粒上,再包覆阳离子聚电解质聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDAC)和阴离子聚电解质聚丙烯酸(P...     

中性/聚电解质高分子混合刷对蛋白质的吸附/解吸附

本文应用分子理论,研究中性(A)/聚电解质(B)高分子混合刷对蛋白质的吸附/解吸附特性.理论模型考虑蛋白质与中性高分子A的排斥、以及与聚电解质高分子B的静电吸引.研究发现,在pH=4～6、中性高分子A处于弱水合状态时,混合刷中A高分子链塌缩,B聚电解质链溶胀.由于蛋白质和B聚电解质链间的静电吸引,导致高分子混合刷对蛋白质的吸附.当A高分子水合性增强时,A高分子链溶胀,B聚电解质链塌缩.由于蛋白质与A高分子链间的排斥作用增强,与B聚电解质链间的静电吸引减弱,混合刷对蛋白质解吸附.     

中性/聚电解质高分子混合刷对蛋白质的吸附/解吸附

本文应用分子理论,研究中性(A)/聚电解质(B)高分子混合刷对蛋白质的吸附/解吸附特性.理论模型考虑蛋白质与中性高分子A的排斥、以及与聚电解质高分子B的静电吸引.研究发现,在pH=4～6、中性高分子A处于弱水合状态时,混合刷中A高分子链塌缩,B聚电解质链溶胀.由于蛋白质和B聚电解质链间的静电吸引,导致高分子混合刷对蛋白质的吸附.当A高分子水合性增强时,A高分子链溶胀,B聚电解质链塌缩.由于蛋白质与A高分子链间的排斥作用增强,与B聚电解质链间的静电吸引减弱,混合刷对蛋白质解吸附.     

在气/液界面牛血清蛋白对阴离子磷脂DPPG脂单层膜的动态行为和形貌变化的影响

The interaction between bovine serum albumin (BSA) and the anionic 1.2-dipalmitoyl-snglycero- 3-(phospho-rac-(1-glycerol)) (sodium salt) (DPPG) phospholipid at different subphase pH values was investigated at air-water interface through surface pressure measurements and atomic force microscopy (AFM) observation. By analyzing surface pressure-mean molecular area (π-A) isotherms, the limiting molecular area in the closed packing state-the concentration of BSA (A_lim-[BSA]) curves, the compressibility coefficient-surface pressure (C_S^-1-π) curves and the difference value of mean molecular area-the concentration of BSA (ΔA-[BSA]) curves, we obtained that the mean molecular area of DPPG monolayer became much larger when the concentration of BSA in the subphase increased at pH=3 and 5. But the isotherms had no significant change at different amount of BSA at pH=10. In addition, the amount of BSA molecules adsorbed onto the lipid monolayer reached a threshold value when [BSA]>5×10^-8 mol/L for all pHs. From the surface pressure-time (π-t) data, we obtained that desorption and adsorption processes occurred at pH=3, however, there was only desorption process occurring at pH=5 and 10. These results showed that the interaction mechanism between DPPG and BSA molecules was affected by the pH of subphase. BSA molecules were adsorbed onto the DPPG monolayers mainly through the hydrophobic interaction at pH=3 and 5, and the strength of hydrophobic interaction at pH=3 was stronger than the case of pH=5. At pH=10, a weaker hydrophobic interaction and a stronger electrostatic repulsion existed between DPPG and BSA molecules. AFM images revealed that the pH of subphase and [BSA] could affect the morphology features of the monolayers, which was consistent with these curves. The study provides an important experimental basis and theoretical support to understand the interaction between lipid and BSA at the air-water interface.     

牛血清白蛋白与VB2间的荧光共振能量转移

以发射波长350nm的牛血清白蛋白(BSA)为给体,维生素B2(VB2)为受体,研究了在Tris-HCl缓冲体系中BSA与VB2之间的荧光共振能量转移。实验结果表明,在pH=7.43的Tris-HCl缓冲体系中,VB2在1.2×10-6—1.2×10-5mol/L范围内与Fa/Fd呈现良好线性关系(r=0.9973),1个BSA给体最多可与10个VB2受体发生有效的共振能量转移。     

SiO2纳米粒子在毛细管电泳分离蛋白质中的应用

将SiO2纳米粒子作为添加剂用于溶菌酶、牛血清白蛋白、牛血红蛋白的毛细管电泳(CE)分离研究.对影响3种蛋白质分离的因素如缓冲溶液的浓度,SiO2纳米粒子、聚合物PVP、乙腈的含量,及分离电压、温度等进行了考察,得到最佳分离条件,即50mmol/L NaH2PO4-10mmol/L H3PO4缓冲溶液(pH=2.8),...     

乙二胺-N,N′-二邻氨基苯甲酸与牛血清白蛋白作用的荧光光谱研究

在pH7.4,0.05mol.L-1Tris-HCl条件下,采用荧光光谱法研究了乙二胺-N,N′-二邻氨基苯甲酸(EDA)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果表明,EDA与BSA的结合使蛋白质的荧光被猝灭,条件稳定常数为lgK=5.81±0.04,结合位点数为1,并依据Foerster能量转移理论确定EDA与BSA色氨酸残基的最近距离r为2.14nm。     

Synthesis and Adsorption Study of BSA Surface Imprinted Polymer on CdS Quantum Dots

开发了CdS量子点用于牛血清白蛋白(BSA)表面压印的方法,将CdS量子点掺杂进BSA的分子压印聚合物中. 实验过程中对制备条件和吸附条件进行了优化. 量子点(QDs)和量子点分子压印聚合物(QDs-MIP)的形貌用扫描电子显微镜进行了表征. 当该QDs-MIP重新结合模板分子BSA时,CdS量子点的荧光被淬灭. 荧光淬灭的原因可能是量子点与模板蛋白质分子之间的荧光共振能量转移. 该聚合物对压印分子的吸附为单分子层吸附,符合Langmuir等温吸附模型. 化学吸附为速率控制步骤. 该新型聚合物的最大吸附容量可达226.0 mg/g,比未掺杂量子点的BSA压印聚合物提高142.4 mg/g.     

尼古丁与BSA相互作用的光谱研究

用紫外-可见光谱和荧光光谱研究了尼古丁与牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)的相互作用。荧光研究表明,尼古丁浓度的增加引起BSA 345 nm处荧光有规律地猝灭。Stern-Volmer 方程分析pH 5.0,pH 7.4和pH 11.0体系的荧光猝灭机理发现,pH 5.0体系属动态猝灭,而pH 7.4和pH 11.0体系为静态猝灭。Lineweaver-Burk双倒数方程计算pH 7.4和pH 11.0体系在温度为20和37 ℃条件下尼古丁和BSA的结合常数k分别为：k_{20 ℃}=140.15 L·mol-1 ,k_{37 ℃}=131.83 L·mol-1 (pH 7.4)和k_{20 ℃}=141.76 L·mol-1,k_{37 ℃}=27.79 L·mol-1(pH 11.0),表明结合常数在pH 7.4条件下受温度的影响要比pH 11.0条件下小,推测是由于不同pH下尼古丁存在的不同形态所致。紫外-可见光谱研究表明,pH 7.4条件下尼古丁浓度的增加引BSA在210 nm处吸收峰吸收强度减小且红移,说明BSA二级结构发生变化,即螺旋结构变松散;紫外二阶导数光谱和同步荧光光谱(Δλ=λ_em-λ_ex=15 nm和Δλ=λ_<i>em-λ_ex=60 nm)分析尼古丁对BSA芳香性氨基酸(Trp, Tyr和Phe)残基微环境的变化,结果表明高浓度的尼古丁使所有这些芳香性氨基酸残基微环境由疏水环境转变为亲水环境。     

新型含噁二唑环双元席夫碱的合成与光谱特性

4-硝基苯甲酸与硫酸联氨在H₃PO₄/P₂O₅作用下脱水环化生成2, 5-二(4-硝基苯基)-1,3, 4-噁二唑(1),(1)被Zn/CaCl₂还原为2, 5-二(4-氨基苯基)1,3, 4-噁二唑(2),(2)与芳香醛反应合成8个含噁二唑环的新型双元席夫碱,产率为65%～81%,用1H NMR,FTIR,MS对其结构进行了验证。研究了它们的UV-Vis光谱和荧光光谱,并用循环伏安法测定了其电化学性能。UV-Vis光谱表明：标题化合物没出现噁二唑环和席夫碱单元所对应的特征吸收峰,共轭效应使两个结构的能带发生了部分杂化而形成新的能带结构,在345～357 nm出现最大吸收峰。荧光光谱表明：目标化合物发射强的紫蓝色荧光,在390～407 nm出现最大发射峰。电化学性能表明：电子亲合势为2.36～3.04 eV,离子势为5.35～6.06 eV,除了3a,3h外,它们的电子传输性比常用的电子传输材料PBD(E_A=2.82 eV)优越。此研究为进一步研究其在有机电致发光器件中的应用提供了参考。     

光谱法研究钙红-Cu(Ⅱ)络合物与蛋白质的相互作用及其应用

研究了钙红-Cu(Ⅱ)络合物与牛血清蛋白(BSA)作用的共振光散射光谱(RLS)、荧光光谱和电子吸收光谱特征,建立了利用金属配合物作为探针测定痕量蛋白质的方法。钙红-Cu(Ⅱ)-BSA三元络合物的形成导致RLS强度和荧光强度的增大;同时引起电子吸收光谱的强度减小,594 nm处吸收峰消失。在pH5.65～5.75的酸度条件下,钙红-Cu(Ⅱ)络合物与BSA系统在317 nm处有一增强的RLS光谱峰,且增强的RLS强度与BSA的浓度呈线性关系。在实验室确定的优化条件下,RLS强度与BSA浓度的线性范围为0.75～10 μg·mL-1, 线性方程为I=150.88+201.48c(BSA ,μg·mL-1),相关系数r=0.997 3。方法检出限为5.62×10-2 μg·mL-1。该方法成功地用于人工混合样品中BSA含量的测定。对钙红-Cu(Ⅱ)络合物与BSA的作用机制的研究表明,钙红-Cu(Ⅱ)络合物与BSA之间主要存在的是静电引力。     

溴酚蓝测定血清白蛋白质的研究

用酸性染料为探针对蛋白质的定量已应用于临床医学及生命科学的研究中,本文利用分光光度法研究溴酚蓝(BPB)与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)的反应。在pH=2.79的Britton-Robinson缓冲溶液中,血清白蛋白与溴酚蓝通过分子间力形成蓝色复合物使吸光度增加。λ=605 nm时,εBSA=5.20×10~5L·(mol·cm)-1,εHSA=5.12×10~5L·(mol·cm)-1;BSA在0-78.0 mg·L-1,HSA在0-81.6 mg·L-1范围内服从比尔定律。检出限分别为BSA:2.93 mg·L-1,HSA:3.12 mg·L-1。对7个人血清蛋白总量平行6次测定,相对标准偏差1.2％-3.1％,回收率91.9％-105.6％。     

几种2-取代-4,5-双(α-呋喃基)噁唑的结构与光谱性质

在密度泛函DFT-B3LYP/6-31+G水平上对2-甲基-4,5-双(α-呋喃基)噁唑(化合物A)、2-苯基-4,5-双(α-呋喃基)噁唑(化合物B)、2-α-呋喃基-4,5-双(α-呋喃基)噁唑(化合物C)和2-α-呋喃乙烯基-4,5-双(α-呋喃基)噁唑(化合物D)S0基态进行构型优化,并用单取代组态相互作用方法(CIS)优化其S1激发态结构。从理论上探讨了A,B,C和D四种化合物的前线分子轨道能量、吸收和发射光谱等性质与结构的关系,并与实验值进行了对比,发现理论计算数据能够与实验结果一致,特别是采用纯密度泛函DFT-OLYP方法计算发射光谱时,理论计算数据与实验结果相差比混合密度泛函DFT-B3LYP方法更小。计算结果表明,分子共轭体系越大,前线轨道间能隙越小,吸收光谱红移越显著。     

脱镁叶绿酸-a甲酯的合成及对牛血清白蛋白的结合作用

用荧光光谱和UV-Vis光谱研究了脱镁叶绿酸-a甲酯(Methyl pheo-phorbide-a)与牛血清白蛋白(Bovine Serium Albumin,BSA)的相互结合反应。实验表明叶绿酸-a甲酯与牛血清白蛋白的相互结合作用为单一的静态猝灭过程。在水溶液中脱镁叶绿酸-a甲酯发生自聚,它与蛋白质以表观摩尔比2∶1牢固结合,其结合常数K_B=6.7×104 L·mol-1。而在四氢呋喃与水的混合溶液中脱镁叶绿酸-a甲酯以单分子状存在, 其与BSA的结合摩尔比为1∶1。BSA分子与叶绿酸-a甲酯的结合点位为1。根据Frster非辐射能量转移机理,求算了给体(BSA)与受体(脱镁叶绿酸-a甲酯)间距离r=3.50 nm和能量转移效率E=0.39。     

两亲性类树枝状聚合物的合成与药物控释

结合阴离子开环聚合方法合成了内壳为聚(乙氧基乙基缩水甘油醚),外层为聚环氧乙烷的两亲性类树枝状嵌段共聚物PEEGE-G2-b-PEO(OH)₁₂. 使用核磁共振氢谱以及凝胶渗透色谱等表征了中间产物和目标产物. 选择阿霉素作为实验药物,研究了该聚合物的载药和控释行为. 聚合物的载药率和包覆效率分别为13.07%和45.75%,体外释放试验表现为持续性的释放,并受到释放介质pH影响.     

铕(Ⅲ)-二苯甲酰甲烷-聚丙烯酸/聚(苯乙烯-丙烯酸)配合物及其性质研究

研究了铕(Ⅲ)和二苯甲酰甲烷(HDBM)形成的有机配体NaEu(DBM)4与聚丙烯酸(PPA)(Mr=5000)、聚(苯乙烯-丙烯酸)(PSAA)(Mr=3000)发生配位反应分别得到配合物Eu(Ⅲ)-DBM-PAA和NaEu(Ⅲ)-DBM-PSAA,得率分别为89.7％和87.3％。红外光谱、紫外光谱、X光电子能谱的测试表明了Eu3 分别与PAA,PSAA和DBM-发生配位。元素分析和电导率测定结果证明了一个Eu3 分别与PAA中二个链节或PSAA中三个链节的羧基和一个DBM-发生配位。Eu3 离子在配合物Eu(Ⅲ)-DBM-PAA和NaEu(Ⅲ)-DBM-PSAA中的质量分数分别为28.46％和12.23％。荧光光谱表明,常温下配合物在紫外光下发出强的红光,主要是Eu3 离子的5D0→7F2的能级跃迁。     

同步荧光法研究Hg(Ⅱ)-罗丹明B酰肼与牛血清白蛋白的相互作用

在三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液条件下(pH 5.0),用同步荧光和紫外-可见分光光度法研究了Hg(Ⅱ)-罗丹明B酰肼(RBH)与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的机理。实验结果表明,BSA的加入可猝灭Hg(Ⅱ)-罗丹明B酰肼(RBH)的荧光。由摩尔比法求得Hg(Ⅱ)-罗丹明B酰肼(RBH)光谱探针与BSA的结合比约为5:1,结合常数K△=1.0×10~6L·mol~(-1)(25℃)。不同温度下(298,308K)实验得到的热力学参数(△H~θ=-29.5kJ·mol~(-1),△S~θ=16.3J·mol~(-1)·K~(-1))表明维持Hg(Ⅱ)-罗丹明B酰肼(RBH)与BSA的相互作用力主要是以静电作用力为主。通过对Hg(Ⅱ)-罗丹明B酰肼(RBH)和牛血清白蛋白结合反应的研究,建立了一种检测蛋白质的新方法。     

荧光共振能量转移增敏法测定锌

以巯基乙酸为稳定剂合成了CdTe量子点,并利用其与牛血清白蛋白(BSA)组成了荧光共振能量转移体系,考察BSA(供体)和CdTe量子点(受体)之间的荧光共振能量转移的最佳条件,建立了荧光共振能量转移增敏法测定Zn2+的新方法.在pH 7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,Zn2+能对能量转移体系中CdTe量子点增敏从而测定锌的含量.Zn2+浓度在0.49-4.88μg/mL浓度范围内与CdTe量子点荧光强度呈现良好线性关系(r=0.9996),检出限为0.13μg/mL,RSD为3.2％,平均回收率为99.5％(n=5).方法适用于果汁饮料中微量锌的测定.