聚酰胺亲和膜色谱用于去除内毒素的研究：Ⅱ.去除条件最佳化和应用

考察了所制备的带组氨酸配基的尼龙６６亲和膜在不同离子强度、ｐＨ值的盐溶液中及不同温度和流速下对内毒素的去除效果，并对这种亲和介质与内毒素的相互作用机理进行了研究。结果表明：在盐溶液离子强底低于０．２ｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ值３￣８的范围及温度低于５０℃、流速小于５ｍＬ／ｍｉｎ下，可获得最佳去除效果。在选择的最佳条件下能有效去除牛清白蛋白、氨基酸注射液、人血样等中的内毒素。去除率大部分在９０％以上，并能保留     

聚酰胺亲和膜用于去除内毒素的研究：Ⅰ.亲和膜的制备和特征

以尼龙６６膜为基质，用环氧氯丙烷，戊二醛，二溴丙烷，羰基二咪唑试剂用盐酸水解后的尼龙６６膜进行活化，共价键合上乙二胺，己二胺等不同长度的间隔臂和组氨酸，四多菌素Ｂ等亲和配基，配基含量达３０μｍｏｌ／ｇ亲和膜装入专门设计制造的膜分离器中，能有效地去除水溶液中的内毒素，     

聚酰胺亲和膜用于去除内毒素的研究 Ⅰ亲和膜的制备和特征

以尼龙６６膜为基质，用环氧氯丙烷、戊二醛、二溴丙烷、羰基二咪唑试剂对用盐酸水解后的尼龙６６膜进行活化，共价键合上乙二胺、己二胺等不同长度的间隔臂和组氨酸、粘多菌素Ｂ等亲和配基，配基含量达３０μｍｏｌ／ｇ以上。亲和膜装入专门设计制造的膜分离器中，能有效地去除水溶液中的内毒素，去除率一般在９０％以上。该膜对内毒素的亲和容量为０２ｍｇ／ｇ，表观脱附常数为３０４×１０－８ｍｏｌ／Ｌ，亲和膜可用碱、脱氧胆酸钠、盐、无热原水进行洗涤再生。     

去除内毒素的柱亲和介质与膜亲和介质的制备和特征

以琼脂糖和尼龙６６微孔滤膜为原料，发展了两种用于去 内毒素的不同类型的亲和介质。在对原料进行化学改性后，键合了含六个碳原子的间隔臂和组氨酸亲和配基。它们对内毒素的亲和容量分别为２．０ｍｇ／ｇ和０．２ｍｇ／ｇ，内毒素和介质之间的表观解离常数分别为８．１＊１０＾－１０ｍｏｌ／Ｌ和３．０＊１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ。     

纤维素亲和膜用于内毒素的去除

报道了用于内毒素去除的３种新型纤维素亲和膜的制备及应用,并对它们的性能进行了比较。结果表明,这３种亲和膜均能有效去除盐溶液中的内毒素,去除率在９０％以上。对人血清白蛋白溶液,季铵盐和壳聚糖亲和膜对内毒素的去除率较高,仍然在９０％以上,金属螯合物亲和膜的去除效果不如前两种,去除率仅为８３．３％。实验选择不同的亲和膜,考察了它们对内毒素的吸附容量、样品处理量以及再生效果,结果表明吸附量在 ２．４×１０６ＥＵ／ｇ以上,样品处理量较大,适合用于小批量医药制剂的生产过程;再生效果较好,可重复使用。     

亲和膜用于去除医药及人血清白蛋白溶液中的内毒素(英文)

 以纤维素膜为基质材料 ,制备了 3种用于去除内毒素的亲和膜 ,分别为壳聚糖亲和膜 (KFCC5 17) ,疏水阳离子亲和膜 (KFCG316 )和金属螯合物亲和膜 (KFCG40 2 )。研究了亲和膜对内毒素的吸附容量及在内毒素去除方面的应用 ,结果表明这 3种亲和膜都可以用于多种溶液中内毒素的去除。考察了离子强度、pH值以及流速对去除效果的影响 ,并分析了原因。KFCC5 17,KFCG316 ,KFCG40 2都可用于人血清白蛋白溶液中内毒素的去除 ,KFCC5 17还可用于医药制剂如氢化可的松、葛根素、盐酸丁卡因和右旋糖苷 40葡萄糖注射液中内毒素的去除。     

新型亲和膜色谱用于去除胆红素的研究

 以纤维素膜为亲和基质 ,接枝后分别以聚赖氨酸和季铵盐为配基 ,制备了两种亲和膜介质 ,用于去除磷酸缓冲液 (pH 7 4)及人血白蛋白 (HSA)溶液中的胆红素。实验结果表明 ,该方法对磷酸缓冲液中胆红素的去除率能达到 70 %以上 ;对HSA溶液中的胆红素 ,其去除率稍低 ,但在较低浓度的HSA溶液中 ,也能获得高于 5 0 %的去除率。并对亲和膜与胆红素间的亲和作用进行了研究 ,考察了温度、流速、HSA浓度及胆红素初始浓度等相关条件对去除效果的影响。结果表明 ,在较高的温度条件下 ,去除效果较佳 ;在较高的初始浓度情况下 ,胆红素的吸附速率较大。     

柱亲和介质用于内毒素去除的研究

以琼脂糖凝胶为基质,采用不同方法活化后,键合多粘菌素B配基,制备了3种用于内毒素去除的亲和介质。亲和介质的配基键合量及对内毒素的去除率随间隔臂长度的增加而增加。考察了盐浓度、pH、温度及流速对亲和介质3去除内毒素的影响。结果表明,亲和介质3在NaC l浓度为0.05~0.5 mol/L,pH为6~10,温度为25~55℃,流速为0.20~0.80 mL/m in范围内对内毒素去除效果最佳,去除率大于90%。     

金属螯合亲和膜吸附分离与纯化溶菌酶的研究（Ⅱ）——不同金 …

采用低温氧或氨等离子体法改性聚丙烯微孔膜，基于等离子体改性膜的活化，偶联及螯合过程的机理，制备了Ｆｅ＾３＋、Ｎｉ＾２＋、Ｃｕ＾２＋等金属离子螯合亲和膜，并用于溶菌酶的吸－脱附实验。两种膜的重复吸－脱附性能相近，而Ｆｅ＾３＋螯合亲和膜基本上不能用于重复吸－脱附实验，采用补充金属螯合离子，能部分恢复亲和膜对溶菌酶的吸附量，是实现亲和膜重复使用的有效方法。     

染料膜亲和色谱法中膜堆的制备及应用

将染料亲和配基偶联于大孔纤维素膜上,所得亲和膜用胶粘法制成亲和膜堆,膜堆的通透性远优于通常的亲和色谱柱。装有蓝色和红色亲和膜的膜堆可分别用于人血清白蛋白和碱性磷酸酯酶的分离纯化,其中碱性磷酸酯酶可在一步操作后纯化４０倍。     

膜亲和色谱的现状、发展和应用

文章对膜亲和色谱的原理、特点、设备、过程和发展情况做了介绍，并对亲和膜在整个膜分离技术中的地位、所占的比重及市场预测做了述评，对膜亲和色谱与其它色谱分离技术的优缺点进行了比较。重点介绍了制备亲和膜的材料，活化方法，问隔臂和配基的种类、选择和共价键合方法，配基和配合物产生亲和作用的机理及解离过程和方法。并对膜亲和色谱在酶、蛋白质、核糖核酸等生物大分子纯化分离方面的应用情况做了述评。     

膜亲和色谱的现状、发展和应用

文章对膜亲和色谱的原理、特点、设备、过程和发展情况做了介绍，并对亲和膜在整个膜分离技术中的地位、所占的比重及市场预测做了述评，对膜亲和色谱与其它色谱分离技术的优缺点进行了比较。重点介绍了制备亲和膜的材料，活化方法，间隔臂和配基的种类、选择和共价键合方法，配基和配合物产生亲和作用的机理及解离过程和方法。并对膜亲和色谱在酶、蛋白质、核糖核酸等生物大分子纯化分离方面的应用情况做了述评。     

亲和毛细管电泳法测定牛血清白蛋白和加替沙星的结合常数

利用亲和毛细管电泳法对牛血清白蛋白(BSA)与加替沙星(GT)间的结合反应及其相互作用做了初步探索,并应用淌度比(M)作为指标测定了两者的结合常数。以20 mmol/L pH 7.4的磷酸盐缓冲液作为运行缓冲液,分别以GT和BSA作为添加剂,另一组分为进样样品,内标为二甲基甲酰胺,于214 nm波长下检测。两种测定条件下得到的结合常数分别为4.4×104 L/mol和4.2×104 L/mol,与传统的荧光淬灭法测得的结果基本一致。该方法具有简单、高效的优点。     

金属螯合亲和膜吸附分离与纯化溶菌酶的研究(Ⅱ)──不同金属螯合亲和膜对溶菌酶的吸附性能

采用低温氧或氨等离子体法改性聚丙烯微孔膜,基于等离子体改性膜的活化、偶联及螯合过程的机理,制备了Fe³⁺,Ni²⁺,Cu²⁺和Zn²⁺等金属离子螯合亲和膜,并用于溶菌酶的吸-脱附实验.实验结果表明,Ni²⁺和Cu²⁺离子螯合亲和膜对溶菌酶具有较高的吸附量,螯合过程中采用氯化物盐溶液制得的膜对溶菌酶吸附量比采用硫酸盐溶液制得的膜的吸附量高.两种膜的重复吸-脱附性能相近,而Fe³⁺螯合亲和膜基本上不能用于重复吸-脱附实验.采用补充金属螯合离子,能部分恢复亲和膜对溶菌酶的吸附量,是实现亲和膜重复使用的有效方法.     

免疫亲和富集-荧光光谱法检测牛血清白蛋白的研究

本文通过戊二醛法合成免疫磁球(IMMs),采用荧光电镜、透射电镜和振动样品磁强计对其进行表征。合成的IMMs为单分散的球形结构,粒径约为510 nm,具有超顺磁性(饱和磁化强度为40.44 emu/g)。基于此,以牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质模型,建立了免疫亲和富集-荧光光谱法用于目标蛋白质的分离与检测。考察并优化了影响免疫亲和富集的因素。在最佳实验条件下,IMMs对目标蛋白质的最大吸附容量为107.7μg/g,可重复使用10次以上。将该方法应用于人血清基质中BSA的测定,加标回收率不低于89.3%,由基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪测得分离后的BSA纯度较高。结果表明,该方法适用于人血清样品中蛋白质的选择性分离与检测。     

亲和毛细管电泳法和荧光法研究氟喹诺酮类药物与牛血清白蛋白的相互作用

分别采用亲和毛细管电泳法和荧光法对6种氟喹诺酮类药物(司帕沙星、洛美沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星、培氟沙星和氟罗沙星)与牛血清白蛋白的相互作用进行考察. 结合比均为1∶1, 结合常数在104 L/mol量级, 热力学参数表明体系间的相互作用力以范德华作用力和氢键力为主. 另外, 亲和毛细管电泳实验结果表明, 缓冲溶液pH值和离子强度增大会造成结合常数在一定程度上的减小, 使相互作用减弱. 同时, 荧光猝灭实验结合紫外光谱扫描说明体系间为静态猝灭. 所得到的数据对进一步研究氟喹诺酮类药物的作用机理、提高药效和开发新一代氟喹诺酮类药物具有一定的参考意义.     

固定化金属螯合亲和膜色谱柱制备及纯化铜锌超氧化物歧化酶的研究

 以大孔纤维素滤纸为基质 ,通过碱处理、环氧活化、偶联亚氨基二乙酸二钠、固定化Cu2 +,装柱后制得固定化金属螯合亲和膜色谱柱。对Cu/Zn SOD粗品进行了纯化研究 ,将其比活从 645U/mL提高到 6882U/mL ,纯化倍数为 1 0 7,蛋白回收率为 92 3% ,活性回收率达 985%。设计了一种解决金属离子泄露问题的方案 ,将Cu2 +泄露量降至 86μg/L。     

固定化铜离子亲和膜色谱柱吸附血红蛋白的研究

将纤维素滤纸进行碱处理及环氧活化、偶联亚氨基二乙酸、固定化铜离子等处理,并将其装入自制的色谱柱管,制得固定化铜离子亲和膜色谱柱。该柱可用于吸附血红蛋白(hemoglobin,Hb),吸附率可达到90%以上。考察了上样量、pH值、温度、上样速度等因素对固定化铜离子亲和膜吸附Hb的影响。实验结果表明,固定化铜离子亲和膜色谱柱吸附血红蛋白的最佳条件为：室温下实验,缓冲体系的pH值控制在6~8,上样速度0.5~1.0 mL/min,上样量为3.16~7.90 mg/g。     

金属螯合亲和膜吸附分离与纯化溶菌酶的研究(Ⅰ)──低温氧等离子体改性条件对亲和膜结构与吸附性能的影响

用低温氧等离子体方法对聚丙烯微孔膜表面进行改性.扫描电镜、红外光谱和光电子能谱综合分析结果表明,膜表面上产生了-OH、-COOH和C=O等极性基团,这些基团可被活化和偶联制亲和膜.所制备的Cu²⁺离子金属螯合亲和膜用于对溶菌酶的吸附,在20min和68W的最佳条件下,制成的亲和膜对溶菌酶的吸附量为8μg/cm².     

化学改性纤维素亲和膜色谱用作人血清白蛋白中杂质的去除

用环氧法对纤维素微孔滤膜进行了化学改性，并在经改性的膜上共价结合了活性红染料配基Ｋ－２ＢＰ，设计并制作了特殊的膜分离器，利用所制备的亲和膜分离器成功地去除了人血清白蛋白中的杂质。