毛细管区带电泳监测牛胰岛素的去折叠过程

用毛细管区带电泳监测了二硫苏糖醇作用下二硫键还原引起的牛胰岛素去折叠全过程,同时用离线的基质辅助激光解吸／电离飞行时间的质谱配合确证。从毛细管电泳谱图能直接观察胰岛素去折叠过程中发生的变化,获得蛋白质去折叠信息。结果表明,毛细管区带电泳作为监测蛋白质构象变化的一种有效手段,方法简便、快速、灵敏度高、样品消耗量少。     

重组人粒—巨噬细胞集落刺激因子去折叠过程的高效液相色谱动态监测

建立了用反相高效液相色谱分析重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｈｒＧＭ－ＣＳＦ）在二硫苏糖醇 （ＤＴＴ）作用下去折叠的方法。分离了ｈｒＧＭ－ＣＳＦ去折叠变化过程中的异构体，实现了对这一过程的动态监 测，从色谱分析的角度提供了结构信息，并用二极管阵列检测器和基质辅助激光解吸附飞行时间质谱对结 果进行了验证。     

反相高效液相色谱法测定康肾颗粒中的葛根素

建立了反相高效液相色谱分离、质谱定性、紫外检测定量测定康肾颗粒中葛根素含量的方法。采用YMC-ODS色谱柱(4.6 mm i.d.×100 mm,10 μm),选用甲醇(含0.1%三氟醋酸)和水(含0.1%三氟醋酸)体系为流动相,非线性梯度洗脱分离,流速1.0 mL/min,检测波长250 nm;用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析鉴定对照品和样品的馏分,在确定目标峰后进行紫外检测定量测定。结果表明,葛根素在0.132 ~1.32 μg范围内其峰面积与进样量呈良好的线性关系（r=0.9997）,平均加标回收率高于103%,相对标准偏差低于2.0%(n=6)。应用该方法测定康肾颗粒中葛根素,其平均含量为3.09 mg/g。该方法简单、快速、重现性好。     

虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅴ去折叠过程的色谱分析

将纯化的天然虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅴ经盐酸胍变性 30min后 ,在pH 3 0、反应温度为 37℃的条件下与三羧甲基磷酸 (TCEP)反应 12min ,用反相高效液相色谱分离得到其全部去折叠中间体 ,通过基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOFMS)进行鉴定 ,并利用烷基化反应对这些去折叠中间体予以进一步确证。根据其保留时间 ,分析虎纹毒素 Ⅴ各去折叠中间体的色谱行为 ,初步探讨了多肽或蛋白质构象异构体反相色谱行为的多样性。     

虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅴ去折叠过程的色谱分析

 将纯化的天然虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅴ经盐酸胍变性30 min后,在pH 3.0、反应温度为37 ℃的条件下与三羧甲基磷酸(TCEP)反应12 min,用反相高效液相色谱分离得到其全部去折叠中间体,通过基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行鉴定,并利用烷基化反应对这些去折叠中间体予以进一步确证。 根据其保留时间,分析虎纹毒素-Ⅴ各去折叠中间体的色谱行为,初步探讨了多肽或蛋白质构象异构体反相色谱行为的多样性。     

反相高效液相色谱法测定微乳制剂中的胰岛素

Waters高效液相色谱仪：510型泵,486型紫外检测器．WDL-95色谱工作站(大连化学物理研究所);PHS-3C型精密pH计(上海雷磁仪器厂);SB2200型超声仪(上海必能信超声有限公司)。猪胰岛素(26．8IU／mg,徐州生化厂);乙腈(色谱纯,Fisher公司);Triton X-100(分析纯,Amresco公司);其余试剂均为国产分析纯,水为双蒸水;胰岛素微乳制剂及辅料(本校生命科学与技术学院药物研究所)。     

反相高效液相色谱法测定肿瘤细胞腺苷酸

测定肿瘤细胞中的腺苷酸类,可了解肿瘤细胞能量异常代谢,同时在研究抗肿瘤药物的作用机理方面具有重要的意义。核苷酸类化合物具有很强的水溶性,用反相色谱法分离效果比离子交换色谱法更好,其优点是色谱柱易于平衡,结果的重复性好。本文在Schweinsberg测定红细胞方法的基础上,对梯度曲线及分析时间进行合理的调整和改进,并利用此方法测定了Hela细胞株和L_(78M)腹水白血病细胞腺苷酸类。     

高效液相色谱法测定乌梅有机酸

采用Kromnsil C18为分析柱,0．0lmol／L磷酸盐缓冲溶液(pH2．7)为流动相,紫外215nm检测,建立了乌梅中草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸等多种有机酸的高效液相色谱方法。方法的回收率为98％～105％;RSD为2．26％～7．82％;检出限为10～75ng(S／N=3)。测定了4种不同产地和种类的乌梅中的苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸的含量。     

反相高效液相色谱法测定阿莫西林

采用反相高效液相色谱法测定阿莫西林并对测定条件及有关参数进行了试验.用Shim-Pack VP-ODS柱作色谱柱,以磷酸盐缓冲液(pH 5.0)及乙醇以90比10的混合液为流动相,流速为1.0 mL·min-1,在228nm波长处测定阿莫西林的含量,其线性范围为0.045～0.60 g·L-1,相关系数为0.9974.将方法应用于阿莫西林胶囊的测定,测定结果的相对标准偏差值小于0.6%,用标准加入法作回收试验,回收率结果在94.7%～101.3%之间.     

反相液相色谱法测定α-甲氧基萘的含量

用反相液相色谱法分析了α-甲氧基萘的含量和其中的有害杂质。色谱条件：色谱柱Nucleosil－C18;流动相V（甲醇）：V（水）=90：10;紫外检测器,面积归一化法定量。方法的变异系数为0．29％。     

免疫法制备液相色谱生物样品的研究——血中沙丁胺醇的分析

 用动物免疫法制备了免疫亲和柱纯化水溶性的沙丁胺醇血浆样品。琥珀酸酐交联沙丁胺醇和牛血清白蛋白获得抗原免疫家兔抗沙丁胺醇抗体——免疫球蛋白。琼脂糖Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ与抗体交联制成免疫球蛋白亲和柱。对高效液相色谱法测定中的一般提取方法和固相小柱提取法作了比较，后者具有内源性杂质干扰少的优点，是生物样品预处理的一种有效的方法。     

反相高效液相色谱法测定杜仲中的松脂醇二葡萄糖甙

建立一种测定杜仲中松脂醇二葡萄糖甙的反相高效液相色谱法。杜仲粉末的甲醇提取液经大孔树脂柱处理后,在ＹＷＧ－Ｃ１８柱上进行ＨＰＬＣ分析。流动相为２８％（Ｖ／Ｖ）的甲醇水溶液;流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ;紫外检测波长２３２ｎｍ。方法平均回收率为９９．２２％（ｎ＝３）,变异系数０．５０％～０．７４％（ｎ＝５）。进样量在０．０６８μｇ～０．６８μｇ范围内线性关系良好,ｒ＝０．９９９９。所建立的方法可作为评定杜仲及杜仲制品降压效果的一种简便、快速和准确的测定方法。     

高效液相色谱法测定酒花α-酸含量

介绍反相液相色谱测定酒花和酒花浸膏中的α-酸含量的方法,反相色谱分离α-酸,外标法定量。方法具有样品处理简单、快速、定量准确和重复的特点。酒花和酒花浸膏的α-酸测定相对偏差分别为2.02％和1.78％。     

反相高效液相色谱法测定盐酸索他洛尔

 建立了用于盐酸索他洛尔的含量测定、有关物质的检查和稳定性考察的 RP-HPL C法。采用 ODS柱、体积分数为 0 .1 %的乙酸水溶液 -乙腈 (体积比为 80∶ 2 0 )为流动相的色谱条件 ,以磺胺二甲基嘧啶为内标物 ,测定的线性范围为 5～ 45 mg/ L(r=0 .9991 ) ,日内精密度为 0 .2 0 % ,日间精密度为 0 .93 %。     

高效液相色谱法测定新生儿血清中去甲万古霉素浓度

 建立了反相高效液相色谱测定新生儿败血症患者血清中去甲万古霉素浓度的方法。血清样品经乙腈－异丙醇沉淀蛋白，上清液用三氯甲烷萃取后以水相进样。流动相为乙腈－磷酸盐缓冲液，紫外检测，最低检测限０．３ｍｇ／Ｌ，有良好的线性关系，回收率达９４．７％，日内、日间精密度分别为２．２３％和２．６２％。结果表明，方法简便、有效。     

反相键合相高效液相色谱法分离测定萘普生

 建立了分离测定萘普生和溴代萘普生的反相键合相高效液相色谱法。采用ＯＤＳ柱，以添加５０ｍｍｏｌ／Ｌ乳酸并用高氯酸调节ｐＨ为２．５的８０％甲醇－水溶液作为流动相，以苯甲酸为内标物，测定了不对称合成工艺产物中萘普生和溴代萘普生的含量。方法的准确度分别为９９．８３％～１０２．０７％（萘普生）和９９．０％～１００．８３％（溴代萘普生），相对标准偏差分别小于２．５８％（萘普生）和３．６４％（溴代萘普生）。方法可用于工艺条件的选择和质量检测。     

反相高效液相色谱法分离测定酪胺

 建立了分离酪胺与酪氨酸及其它杂质的反相键合相高效液相色谱法,讨论了流动相添加剂对色谱分离的影响和离子相互作用的分离机理。在C8烷基键合相分离柱上,以含Tris-高氯酸盐(20mmol/LTris,用HClO4调节pH为7.9,并添加KClO4,使总高氯酸盐浓度为30mmol/L)的甲醇-水溶液(体积比为40∶60)作为流动相,以对甲苯磺酰胺为内标物,测定了p-酪氨酸脱羧工艺产物——酪胺的质量分数。酪胺样品质量分数测定的准确度和重现性数据为(96.40±0.633)(n=11,RSD=0.66),加样回收率为99.33～100.38。方法可用于工艺条件的选择和酪胺产品质量的检测。     

非水反相液相色谱法测定枸杞子中β-胡萝卜素含量

应用甲醇－乙酸乙酯（５０５５,Ｖ／Ｖ）为流动相,在ＯＤＳ反相柱上采用外标法测定了３种不同产地枸杞子中β－胡萝卜素的含量。方法简便、快速,重现性好。β－胡萝卜素的检测线性范围为１．０～５．０ｍｇ／Ｌ,ｒ＝０．９９９８,平均回收率为９７．１％,变异系数为１．９％。