固定化生长细胞生物催化的若干动态性质

通过啤酒发酵实验研究了以海藻酸盐为载体的固定化生长细胞生物催化作用的若干动态特性．在分批出料的填充柱循环反应器中，产物抑制型的啤酒发酵、其Ｓ～ｔ，Ｐ～ｔ曲线与批式发酵罐的Ｘｔ／Ｘｓｔ～Ｋｔ理论曲线相似，Ａ（λ＝５２０ｎｍ）的变化可作为简便的检测方法．发酵周期的缩短呈现τｎ＝ｎ－１（τ１－Ｃ）关系，式中ｎ＝２～４．这对生产上前期的成功应用是有力的支持．但在ｎ≥５时出现载体的崩解和起泡现象，因相催化剂不能继续使用．     

甲烷生物催化氧化制甲醇:固定化细胞催化剂的制备及其催化性能的研究

研究了利用无机载体（活性炭、氧化铝、分子筛等）吸附法和天然藻胶（海藻酸钙等）包埋法制备的固定化甲烷氧化细菌的催化性能及其在生物反应器中的反应，结果表明，在进行甲烷制甲醇的反应中、活性炭吸附制备的固定化细胞的操作稳定性最好，但其初始酶活性与休止游离细胞相比损失了６０％￣８０％，海藻酸钙包埋的固定化细胞初始酶活性高（与游离细胞相比，可保持５５％￣９０％的酶活性），但反应中甲醇累积速度很低，而双重介质（     

固定化脂肪酶催化合成生物柴油

固定化脂肪酶催化合成生物柴油;转酯反应;固定化脂肪酶;菜籽油;甲醇;生物柴油     

固定化细胞及其载体中组分扩散性质研究现状

本文综述了对于组分在固定化细胞及其载体中的扩散性质的研究现状。     

酶和细胞的固定化

本文对酶和细胞固定化技术的近期发展作了较为全面的扼要综述。     

固定化乳杆菌细胞的离子交换吸附发酵生产乳酸

本文提出了固定化乳杆菌细胞的离子交换吸附发酵生产乳酸的新方法，该法以海藻酸钙凝胶为载体包埋固定化细胞用于生产乳酸，将离子交换树脂填充柱与发酵反应器相连接，用于从发酵液中及时地分离出产物乳酸。这种新方法成功地消除了产物乳酸对乳酸菌生长和产物形成的抑制作用。与常规的发酵法相比，利用离子交换树脂吸附发酵使糖转化率和乳酸生产速率分别由８６．２％和０．３２８ｇ／Ｌ·ｈ提高到９４．７％和０．４８２ｇ／Ｌ·ｈ。     

固定化脂肪酶催化碳酸二甲酯制备生物柴油的研究

以介孔硅材料(MPS)为载体将脂肪酶固定化,以碳酸二甲酯为酰基受体,对固定化酶催化碳酸二甲酯进行了反应路径(原料油)、反应条件(反应温度、碳酸二甲酯的用量、加水量)的优化,在最佳的条件下对实验过程中所用的固定化酶进行重复使用性的考察.实验结果表明,不同种油与碳酸二甲酯反应在同定化酶的催化下制备生物柴油的产率以麻疯树油为最高,最佳反应条件是碳酸二甲酯的浓度为16mL/g、不加水,在50℃下反应24h,生物柴油得率达81.6％.     

酶生物传感器中酶的固定化技术

综述了近年来国内外酶生物传感器的进展,介绍了制作酶生物传感器的关键技术——酶的固定化。固定化方法主要有吸附法、包埋法、共价键合法和交联法。固定化材料分为无机材料、有机聚合物材料、凝胶以及生物材料等。探讨了固定化方法和固定化材料对酶的固定化及酶生物传感器性能的影响,并结合自己的工作展望了酶生物传感器的发展方向和趋势。     

固定化脂肪酶催化高酸废油脂酯交换生产生物柴油

 探讨了固定化脂肪酶Novozym 435催化高酸废油脂与乙酸甲酯酯交换生产生物柴油. Novozym 435能催化高酸废油脂与乙酸甲酯的酯交换反应,反应24 h后甲酯产率为77.5%,但该值大大低于以精制玉米油为原料时的甲酯产率(86.2%). 系统研究了反应体系中的水、游离脂肪酸和乙酸对反应的影响. 当反应体系中的水含量低于0.05%时,水对酶反应速率和甲酯产率影响甚小,而水含量高于0.05%时,酶反应速率和甲酯产率随着水含量的增加而降低. 游离脂肪酸对反应有较大影响,甲酯产率随着游离脂肪酸含量的增加而急剧下降. 乙酸甲酯与游离脂肪酸反应产生的副产物乙酸是导致甲酯产率显著下降的原因. 在反应体系中添加适量(油重的10%)的有机碱三羟甲基氨基甲烷或三乙胺可有效提高酶促高酸废油脂的酯交换反应速率和甲酯产率,使反应12 h后的甲酯产率分别达到85.9%和80.8%; 碱的加入还提高了酶的操作稳定性,添加有机碱三羟甲基氨基甲烷或三乙胺可使反应10批次后Novozym 435的相对酶活力分别由对照值86%提高到97%和93%.     

MethylomonasZ201细胞在戊二醛活化DEAE—纤维素上的共价固定化

以戊二醛活化的ＤＥＡＥ－纤维素为载体，采用共价键法固定化ＭｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｓＺ２０１细胞，固定化细胞催化丙烯环氧化的最优细胞／载体比为３２ｍｇ干重细胞，最适ＰＨ值达温度分别为７．８和３５℃，用纯氧代替空气作为氧源，分别使游离和固定化细胞的ＭＭＯ活性提高了８％和３５％，外泊性电子给体甲酸钠对固定化细胞ＭＭＯ活性的激发作用小于游离细胞，失活动力学分析结果表明，固定化细胞的稳定性高于游离细胞。     

无溶剂系统中固定化脂肪酶催化废油脂转酯生产生物柴油

 探讨了无溶剂系统中固定化脂肪酶Novozym 435催化餐饮业废油脂转酯生产生物柴油. 反应副产物甘油可吸附在固定化酶载体表面,采用丙酮洗涤除去甘油可提高酶的稳定性. 适宜的醇/油摩尔比、酶用量、反应温度和摇床转速分别为1, 6.6 U/g, 35～40 ℃和150 r/min,不宜加水到反应体系中. 采用分步加入甲醇的方式可减轻甲醇对酶的毒害作用. 分别在反应进行到6和14 h时用丙酮除去酶表面的甘油,然后按醇/油摩尔比为1的比例加入甲醇继续反应,反应30 h后产物中的脂肪酸甲酯含量为88.6%. 连续反应300 h后,酶活性基本没有下降.     

反胶束固定化乳酸脱氢酶的催化动力学性质研究

以十六烷基三甲基溴化铵(CATB)-辛烷-己醇反胶束体系对乳酸脱氢酶(LDH)进行固定化,试验了含水量、CTAB和己醇浓度对LDH固定化的影响。对游离酶和固定化酶的催化动力学性质研究表明:酶促反应的最适pH值分别为9.2和9.5,最适温度分别是37℃和43℃,对乳酸的米氏常数Km分别为1.4 mmol/L和2.3mmol/L。30℃时,游离酶存放2 h,约失活50%,而固定化酶仅失活10%,表明反胶束固定化LDH具有较好的热稳定性。     

两种反胶束固定化酶的催化性质研究

探讨十六烷基三甲基氯化铵(CATC)-戊醇-辛烷反胶束体系固定化乳酸脱氢酶(LDH)和醇脱氢酶(ADH)的催化作用。试验了含水量、表面活性剂以及助溶剂浓度对于酶固载量的影响。对游离酶和固定化酶催化性质研究表明:LDH酶促反应的适宜p H值分别为9.2和9.0,适宜温度为51℃和29℃,米氏常数15mmol·L-1和2mmol·L-1;ADH酶促反应的适宜p H值为8.8和8.2,适宜温度为33℃和39℃,米氏常数4mmol·L-1和17mmol·L-1。应用反胶束固定化酶测定了试样中微量组分。     

表面等离子体共振传感器生物识别分子的固定化方法

表面等离子体共振具有无需标记样品和实时检测等优点,广泛应用于药物筛选以及生物、药物、食品等领域的检测。构建合适的生物传感界面是提高检测灵敏度和选择性的重要途径。该文介绍了利用化学偶联生物识别分子的非定向固定方法,以及利用化学键合或生物分子的特异性反应定向固定生物识别分子的方法,比较了两种固定方法的优缺点,并讨论了未来的发展趋势。     

海藻酸钠固定化根霉脂肪酶的制备及其性质

 研究了以海藻酸钠为载体,用包埋法制备固定化德氏根霉(Rhizopus delemar)脂肪酶的条件. 将酶粉和海藻酸钠溶于pH 5.0的HAc-NaAc缓冲溶液,用注射器将此混合液滴入到0.05 mol/L无菌CaCl2溶液中,静置固化45 min, 经过滤、洗涤和干燥后得到球状固定化酶. 固定化酶的活力回收约为34.1%. 酶学性质研究表明,此固定化酶的热稳定性较好. 游离酶在 60 ℃下保温1 h已完全丧失活力,而固定化酶在100 ℃下保温1 h仅损失36.2%的活力,在100 ℃下保温6 h仍可保持46.8%的酶活力. 酶经固定化后,其橄榄油水解反应的最适温度由40 ℃上升至90 ℃, Km值由13.8 mg/ml下降为8.1 mg/ml. 常见有机溶剂对固定化酶的活力影响较小. 将该固定化脂肪酶用于非水溶剂中正戊酸异戊酯的合成,重复使用6次后,固定化酶仍保持95%的酶活力.     

伴有辅酶再生的生物催化过程

很多生物催化的氧化还原反应需要昂贵辅酶的参与,本文详细介绍了伴有辅酶再生的生物催化过程中,辅酶的使用、辅酶的酶反应再生、电化学再生及载体再生的特点,并对各种再生方法的优缺点进行了比较,同时介绍了辅酶的固定化及化学改性方法的研究进展.简单综述了伴有辅酶再生的基于细胞、游离酶和固定化酶的生物催化系统的研究和应用,并展望了辅酶的研究前景及辅酶再生研究的发展方向和亟待解决的问题.     

优势菌固定化细胞对偶氮染料脱色的研究

利用紫外线诱变技术选育出高活力偶氮染料活性艳红X-3B脱色菌UVM7-9，以海藻酸钠为载体，采用包埋法固定UVM7-9细菌细胞用于处理含X-3B模拟废水。以固定化细胞对X-3B的脱色率和脱色寿命为试验指标，确定了最佳脱色条件，并与游离细胞对X-3B的脱色效果进行比较。结果表明，固定化细胞适应环境条件的范围更宽，脱色能力强，在30-35℃环境温度条件下，控制溶液pH为8，24h内对浓度为50mg／L的X-3B模拟废水的脱色率达93．8％。     

基于氯化镁饱和溶液中固定化脂肪酶Lipozyme TL IM催化光皮树油脂合成生物柴油

基于氯化镁饱和溶液反应体系中,对采用固定化脂肪酶Lipozyme TL IM催化光皮树油脂转化为生物柴油的工艺进行了研究。考察了固定化脂肪酶Lipozyme TL IM催化光皮树油转酯化的工艺中甲醇的用量、固定化脂肪酶的添加量、摇床的转速和反应时间对生物柴油产率的影响。实验结果表明,采用氯化镁饱和溶液反应体系,在醇油摩尔比为3∶1,固定化酶Lipozyme TL IM用量为光皮树油质量的20%,摇床转速为150 r/min,反应8 h时,生物柴油产率最高,达到86.5%。与传统的三步甲醇醇解或者有机溶剂反应体系比较,采用的氯化镁饱和溶液体系的酶稳定性更好,反应效率更高,有效地解决了酶在甲醇中失活的问题,生产成本低,可成为生产生物柴油的新工艺。     

压电免疫质量传感器中生物大分子的固定化方法

评述了近十几年来压电免疫质量传感器研究中的关键技术－生物分子固定化方法的研究应用,并对固定化方法的发展予以展望。