柯尔克孜族和维吾尔族ACE基因多态性与2型糖尿病的关联研究

探讨新疆柯尔克孜族和维吾尔族人群血管紧张素转化酶（ACE）基因rs1799752位点插入或缺失（I/D）多态性及其与2型糖尿病（TypeⅡdiabetes mellitus,T2DM）的关系．方法采用病例-对照的研究设计．采集无血缘关系、年龄性别匹配的新疆柯尔克孜族样本117例、维吾尔族样本127例,分为2型糖尿病组（T2DM）、糖耐量异常组（impaired glucose tolerance, IGT）和糖耐量正常组（normal glucose tolerance, NGT）,以Hardy-Weinberg平衡检验确认研究样本的群体代表性,采用PCR技术检测ACE基因I/D多态性．结果（1）病例组与对照组ACE基因多态性的分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,所选人群具有代表性;（2）柯尔克孜族DD型42.74%,ID型31.58%,II型26.50%,D和I 等位基因频率分别为58.115%和41.876%;维吾尔族DD型35.43%,ID型28.35%,II型36.22%,D和I 等位基因频率分别为49.626%和50.387%．（3）ACE基因频率差异在柯尔克孜族（χ2=70.11,P 〈0.01）,维吾尔族（χ^2=35.11,P〈0.01）的糖调节异常组与糖耐量正常组间,分别具有统计学意义．在维吾尔族T2DM组中携带DD、ID、ID＋DD基因型的个体较携带II基因型的个体发生糖代谢异常（T2DM＋IGT）的危险性增加（OR=7.812,95%CI=3.135-19.607;OR=4.854,95%CI=1.835-12.821;OR=6.410,95%CI=2.865-14.286,携带D等位基因的个体较携带I等位基因的个体发生糖代谢异常（T2DM＋IGT）的危险性增加（OR=4.444,95%CI=2.617-7.576）,而柯尔克孜族DD、ID＋DD基因型和D等位基因性对糖代谢异常（T2DM＋IGT）的发病风险降低．结论ACE基因I/D多态性与新疆两个少数民族T2DM相关,ACE基因I/D多态性可能是维吾尔族T2DM的危险因素,柯尔克孜族的保护因素．     

伴有鸡蛋不耐受的皮肤过敏症患者接种灭活SARS-CoV-2疫苗的安全性调查（英文）

为明确灭活新型冠状病毒疫苗在伴有鸡蛋不耐受皮肤过敏症患者中的安全性,该回顾性研究纳入缺乏鸡蛋过敏实验证据但鸡蛋不耐受的皮肤过敏症成年患者.通过电话随访记录每次接种疫苗后7天的不良反应,研究共纳入122名受试者(平均年龄(30±9.47)岁).和鸡蛋耐受的受试者相比,鸡蛋不耐受者在接种疫苗后会出现更多的不良反应(39.78%/17.24%,P<0.05).同时,特异性鸡蛋不耐受抗体的滴度与接种疫苗后不良反应的风险成正比(趋势P=0.008).其中,注射部位异常疼痛和新发或原有皮疹恶化为最常见的不良反应,且在第一针剂后出现的概率更高.多元回归分析调整后发现,鸡蛋不耐受会增加注射部位异常疼痛(P=0.044,aOR:5.061,95%CI:1.047～24.457)及新发或原有皮疹恶化(P=0.041,aOR:9.109,95%CI:1.098～75.563)的风险.结果表明:灭活新型冠状病毒肺炎疫苗的总体安全性较高,但鸡蛋不耐受会增加皮肤过敏患者接受疫苗后出现不良反应的风险,并且与特异性鸡蛋不耐受抗体的血清浓度成正比.     

人nov基因全长cDNA克隆、测序及其组织表达谱分析

采用特异性mRNA富集技术，从人早期胚胎中得到人nov基因(novH)的cDNA克隆，序列分析表明，该基因cDNA序列由2389个碱基对组成，包含一段长1071bp的开放阅读框(ORF)，3′端含有加尾信号AATAAA和ply(A)尾巴。Northern杂交显示，在Hela细胞和肾上腺组织中有表达的novHmRNA，大小约为2．5kb；多组织RNA点杂交分析结果进一步表明，novH基因在肾上腺和主动脉中的表达水平相对较高，在成人肾、肝、肺和小肠组织中亦有少量的表达。     

紫红链霉菌2917磷脂酶A2基因的克隆及序列分析

用探针从紫红链霉菌2917基因组文库中克隆出磷脂酶A3基因，经双向测序，确定了其基因的全序列，并由此推导出其氮基酸序列，将此序列与其他来源的磷脂酶A2基因序列进行了比较研究，结果显示，与天蓝色链霉菌A3（2）中磷脂酶A2的同源性为98％，与蛇毒的磷脂酶A2的同源性小于10％，但有类似的质子传递系统、Ca^2 结合环以及疏水通道等结构，这个基因的克隆为磷脂酶A2结构与功能的研究提供更多的信息，也为利用重组微生物生产磷脂酶A2打下了基础。     

呼吸道合胞病毒感染SPC-A1相关新基因zlg10con的电子克隆及分析和验证

通过mRNA差异显示法获得了与呼吸道合胞病毒感染SPC-A1细胞相关的52个表达序列标签(EST)片段，其中的一个EST片段g10-1在RSV感染后的细胞中高表达．采用生物信息学原理和方法对g10-1进行了鉴定后预测这是一个新基因片段，经电子克隆获得了761bp的延伸产物，并且通过了实验验证．该基因片段含有一个典型的54个氨基酸的ORF，命名为zlg10con，并对该序列进行了蛋白结构和功能的分析．     

蚯蚓纤溶酶基因的cDNA克隆及其序列分析

从粉正蚓成体中提取总RNA，以寡核苷酸Oligo(dT)2v为引物合成cDNA第一条链；用RT-PCR的方法扩增蚯蚓纤溶酶的cDNA，将其克隆到pUCm-T载体上进行DNA序列测定．结果表明，所克隆的蚯蚓纤溶酶cDNA长度为747bp，其中编码区段为738bp．共编码246个氨基酸．将该序列与GenBank中其它的4种蚯蚓纤溶酶序列(Lumbricus rubellus EFE-III-1、Lumbricus rubellus lumbrokinase-3(1)precursor、Lumbricus bimastus lumbrokinase、Lumbricus rubellus lumbrokinase-1 T4 precursor)相比．同源性分别为99％，97％，89％，88％；与同源性最高的序列相比，本序列有7个碱基、3个氨基酸与该序列不同．     

鹌鹑和黑斑蛙核糖体蛋白L15 cDNA片段的克隆和序列分析

通过R-PCR方法、分别从两栖类的黑斑蛙(Rana nigromaculata)和鸟类的鹌鹑(Coturnix coturnix japonica)中首次克隆了核糖体大亚基蛋白Ll5(RPL15ribosomal protein L15)的cDNA片段,并分析了其序列特征,黑斑蛙和鹌鹑的rpll5cDNA片段分别为467个核苷酸和408个核苷酸，推测分别编码155个氨基酸和136个氨基酸的蛋白片段，与其它已知的脊椎动物，rpl15序列有高度的同源性．应用这两条cDNA序列和其它已知的脊椎动物rpll5序列构建的系统发育树显示聚类结果与传统分类一致。     

鸭源H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆、序列分析及原核表达

参照GenBank收录的H9N2亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因序列设计并合成引物,以鸭源H9N2亚型禽流感病毒RNA为模板,利用RT PCR方法扩增了预计约1700bp的HA基因,将此扩增产物克隆进pMD18 T载体,采用限制性酶切及序列测定鉴定阳性重组克隆子.测序结果表明HA基因长为1683bp.基于HA蛋白的信号肽在表达中的负面作用,本研究通过基因工程手段缺失HA蛋白位于起始的信号肽的编码序列,获得了缺失HA蛋白信号肽的HA基因,并将其亚克隆到pGEX KG中,与GST融合表达.SDS PAGE结果显示:融合表达的蛋白分子量约为90×103.Western印迹表明表达蛋白具有免疫活性.