从发酵液中分离ε-聚赖氨酸的树脂筛选

筛选适合分离纯化发酵液中ε-聚赖氨酸的树脂并确立纯化工艺参数。以树脂对ε-聚赖氨酸的吸附量、解吸附率为评价指标,选用HZD-5、D113、D152、D155、HD-2、DK110 6种树脂进行筛选。结果表明,HD-2型树脂吸附与洗脱效果最佳,上柱发酵液pH为8并且流速为4mL/m in,洗脱液为0.075mol/L的盐酸、流速2.5mL/m in。经活性炭脱色、旋转蒸发仪浓缩后得ε-聚赖氨酸粗品,纯度可达81.2%,回收率98.3%。     

甲基橙比色法测定发酵液中ε-聚赖氨酸含量

根据Itzhaki法的原理,对比色法测α-聚赖氨酸的方法进行改进。通过考查反应体系的pH、甲基橙浓度以及无机离子等条件对ε-聚赖氨酸测定的影响,建立了一种简便准确测定发酵液中ε-聚赖氨酸含量的方法。该方法的相关系数R2=0.9993,样品回收率达98.0%以上,相对标准偏差<2%。     

ε－聚赖氨酸增强的可注射白蛋白水凝胶

牛血清白蛋白水凝胶拥有优异的生物相容性及生物降解性,被广泛应用于组织工程领域中.目前已经成功制备了可注射牛血清白蛋白水凝胶,但其力学性能仍有待提高.本文利用一种简单的方法提高了该可注射白蛋白水凝胶的力学性能.以尿素为变性剂,谷胱甘肽为还原剂制备由氢键及二硫键协同作用的白蛋白凝胶网络,并在牛血清白蛋白完全解旋后在体系中物...     

大孔弱酸型离子交换树脂分离纯化-氨基酸分析仪测定酱油中ε-聚赖氨酸的含量

<正>ε-聚赖氨酸(ε-PL)作为一类天然防腐剂,一般由25～30个赖氨酸残基构成。相对于其他防腐剂,ε-PL具有抗菌谱广、稳定性好等特点^[1-4]。在日本,ε-PL早已进入消费市场,被添加至各类市售食品中。在我国,ε-PL还处于研究阶段,应用前景良好^[5-7]。2014年,国家卫生和计划生育委员将ε-PL列为食品添加剂的新品种,添加量为150～250 mg·kg^-1[8],涉及的食品包括焙烤食品、熟肉制品以及果蔬汁类等。     

淀粉酶产色链霉菌TUST2中ε-聚赖氨酸降解酶的纯化和性质

分离得到产抗菌聚氨基酸--ε-聚赖氨酸菌株淀粉酶产色链霉菌TUST2,从中纯化了ε-聚赖氨酸降解酶,并对其性质进行了研究.结果表明,该酶为膜结合蛋白.为提取该降解酶,先收集菌体细胞并用超声波破碎,细胞膜部分用1.0 moL/L NaSCN溶液溶解.将粗酶液进行Sephadex G100凝胶柱层析分离.用100mmol/L磷酸缓冲液洗脱,收集活性部分.纯化后的样品用SDS-PAGE检测,酶亚基分子量约为54700.酶活力在pH=6.0～9.0间稳定,最适宜pH=7.0.酶的最适温度为30℃,在10～50℃水浴30 min酶活力未见明显下降.研究了不同金属离子对酶活力的影响,结果表明,Zn~(2+),Cu~(2+)和Fe_(3+)可分别提高酶活力29.72%,15.85%和15.08%;但Ag~(+),Hg~(2+),Co~(2+)和Mn~(2+)对酶活力有强烈的抑制作用.Ca2~(2+),K~+和Ba~(2+)对酶活力没有影响.添加4%Tween-80能提高酶活力10%,但EDTA能强烈抑制酶活力.研究结果表明,此降解酶的性质与白色链霉菌产生的ε-聚赖氨酸降解酶的性质相似.     

正交试验法优化CS汽化吸附条件

通过正交试验设计,优化了影响西埃斯(CS)标准样品管制备的参数:汽化温度、采样流速、采样时间。结果表明,CS标准样品管的最佳吸附条件为汽化吸附温度:260℃,采样N2流速:330mL/min,采样时间:15min。在15~1500ng范围内,色谱峰面积与进样量有良好的线性关系,线性相关系数为0.9995,检出限为6.0ng。     

某些药物的吸附薄层色谱法定量测定中展开条件的优化

由于展开体系的半开放性,薄层色谱行为极易受到外来因素的干扰。因此,薄层色谱定量分析结果受操作条件和操作者技能影响比较大。人们一般从两方面设法解决这个问题:一是改善展开室结构,二是优化展开过程。     

N~ε-甲基赖氨酸的合成

设计并合成了不同α-氨基保护的一甲基,二甲基和三甲基赖氨酸,其结构经1H NMR和MS表征.     

新型功能性环状聚(ε-己内酯-co-α-氯代-ε-己内酯)的合成

借助活性开环聚合反应和紫外光辐照下的分子内交联反应合成新型功能性环状聚(ε-己内酯-co-α-氯代-ε-己内酯)(cP(εCLcoαClεCL)).首先,利用Baeyer-Villiger氧化法将α-氯代环己酮在间氯过氧苯甲酸(mCPBA)的作用下制得功能性单体α-氯代-ε-己内酯(αClεCL).然后,功能性单体αClεCL和ε-己内酯(εCL)在环状引发剂2,2-二丁基-2-锡-1,3-二氧环庚烷(DSDOP)的作用下,进行活性开环聚合反应获得活性环状无规共聚酯(LCP(εCLcoαClεCL))前体,该前体的分子量可以通过改变单体与引发剂的摩尔配比来控制.当单体完全转化后,该活性环状前体再引发反应性单体α-(1-丙烯酰氧乙基)-ε-己内酯(αAEεCL)进行嵌段聚合反应,合成了在活性中心附近带有不饱和双键的功能性环状共聚酯,即活性环状聚(ε-己内酯-co-α-氯代-ε-己内酯)-b-(α-(1-丙烯酰氧乙基)-ε-己内酯).最后该活性环状共聚酯在紫外光辐照下,反应性单体单元中的双键发生分子内交联反应,制得稳定的不含有机锡的新型功能性环状无规共聚酯cP-(εCLcoαClεCL)(M n,NMR=32400).采用SEC,NMR以及DSC等技术对聚合物的结构和性能进行表征,SEC和黏度表征结果显示新型功能性cP(εCLcoαClεCL)与分子量相同的线型共聚酯相比具有较小的动态力学体积,DSC表征结果显示共聚酯环化的结果使其熔点和结晶度下降.该方法的突出特点是能够高效地合成具有高分子量的环状聚合物.     

基于酸-碱动态化学的超支化聚赖氨酸的合成

报道了离子型单体e-四氟硼酸盐-L-赖氨酸-N-羧酸酐(NH3BF4-Lys NCA)的合成,其化学结构和纯度采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)、核磁共振氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)、氟谱(19F-NMR)和飞行时间质谱(TOF-MS)进行了确认.在大于20oC时,单体中的胺基氟硼酸盐动态解离出e-胺基,原位转化为AB*型引发单体(inimer-NCA),一锅法生成了超支化聚赖氨酸氟硼酸盐.产物经脱盐处理,得到了支化度为0.34~0.53的超支化聚赖氨酸.在25~55oC聚合温度内,离子单体的开环聚合符合一级动力学,表观速率常数kp,obs从25oC的0.01 h~(-1)逐渐增大到55oC的0.11 h~(-1).采用异核单量子相干谱(1H-13C HSQC)、傅里叶变换离子回旋共振质谱(FTICR-MS)和FTIR对超支化聚合物的结构和聚合机理进行了解析.     

超滤-吸附法制备高纯度L-辛弗林的优化工艺

以枳实提物液为原料,探讨了膜过滤和吸附树脂分离杂质,制备纯化L-辛弗林的新方法并获得纯度高达90%的冻干粉。先用不同截留分子量的超滤膜对枳实提取液进行超滤分级分离,脱除分子量差异大的杂质,再用筛选出的大孔吸附树脂吸附分离超滤透过液中的色素,确定其优化工艺条件,然后用反渗透浓缩及冷冻干燥,获得高纯度L-辛弗林冻干粉。超滤分级富集枳实粗提液中的L-辛弗林的优化条件为:以截留分子量为30kDa和5kDa的超滤膜顺序进行分级分离L-辛弗林浓度为4.5mg/mL的枳实提取液,压力为0.20MPa,获得的枳实超滤液中L-辛弗林透过率达89.7%,多糖、蛋白质和色素截留率分别为95.2%、93.8%和75.7%;D3520大孔吸附树脂脱除超滤透过液中色素的优化工艺条件为:上柱液L-辛弗林浓度为3mg/mL,上柱流速为1BV/h,上柱体积为3BV,获得的脱色液中色素仅残留3.82%,L-辛弗林损失率仅为6.54%;该脱色液经反渗透浓缩及冷冻干燥,制备出L-辛弗林冻干粉,其纯度为89.61%,总收率为77.34%。通过系列超滤膜顺序分级分离枳实提取液中分子量差异大的杂质及采用D3520大孔吸附树脂脱除色素的集成创新方法,制备出高纯度的L-辛弗林,丰富了天然产物分离纯化领域的应用理论和实证,并对分离枳实中L-辛弗林提供指导和参考。     

聚ε-己内酯结晶形态的研究

采用DSC测试了聚ε-己内酯(PCL)的结晶温度(TC)和熔融温度(Tm)。同时采用偏光显微镜(POM)探讨了结晶时间的影响,发现结晶时间的改变只能够改变其晶体的尺寸,对其结晶形态并没有太大的影响。最后采用原子力显微镜(AFM)讨论了基底材料、溶剂和过冷度对PCL结晶形态的影响。结果表明:基底材料对PCL结晶形态的影响是比较显著的,PCL在硅片上呈棒状,在云母和涂有碳膜的云母上呈树枝状。溶剂对PCL结晶形态的影响明显,其结晶形态的差别与蒸汽压有关。在不同的温度下PCL结晶形态都成树枝状晶体,且分枝宽度随着过冷度的降低而增加。     

钛酸丁酯催化ε-已内酯聚合的研究

ε-聚己内酯(PCL)做为生物医用高分子材料,国外已有不少报道,然而国内研究不多,原因是对材料性能要求苛刻且价格昂贵,对于PCL的合成,目前多采用辛酸亚锡和双金属氧桥烷氧化物为引发剂开环聚合。我们采用价格便宜易得的钛酸丁酯为引发剂制得聚合物与其他方法制得的聚合物在结构与性能上无根本的差别,体外缓释性能实验表明,可望做为某些药物的载体加以使用。     

合成ε-己内酯实验的绿色化探索

将环己酮催化氧化合成ε-己内酯开设成一个绿色化探索的设计性实验。采用清洁的氧化剂H2O2,筛选高效的环保型催化剂,在不同条件下制备了一系列的复合金属氧化物MgO/SnO2为催化剂,比较了不同催化剂的催化性能,进行了微型实验和常量实验的比较,确定了以MgO/SnO2（物质的量比7：3）为催化剂的合成工艺条件,测定了目标产物的产率。实验从设计方案到实施过程都渗透了绿色化学的理念和思想,引导学生树立绿色化学观念、增强环境保护意识,有效地发挥了他们的主观能动性;使学生接触了学科前沿,受到了科学思维的训练和创造性思维的培养。     

编制ε-外推程序求色谱死时间

死时间t_d是一个重要的色谱参数,其准确值常常难以直接测定,于是研究出许多计算死时间的数学方法,其中以ε-外推法当外推步数越多求得的t_d值越准确。但这种方法计算费时,为此本文编制ε-外推BASIC浯言程序,在计算机上求取色谱死时间。这种方法迅速、准确。     

氯化稀土催化ε-己内酯开环聚合

聚ε-己内酯（PCL）具有优良的生物可降解性、生物相容性及可渗透性等,可以作为药物控释和缓释材料,因而受到人们的广泛关注,我们长期开展稀土催化聚合方面的研究,发现许多新的稀土催化剂,如稀土烷氧基化合物、卤化稀土体系、稀土芳氧基化合物等是ε-己内酯（CL）聚合的优良催化剂。     

1,6-己二醇选择氧化内酯化制备ε-己内酯

ε-己内酯是合成聚己内酯(PCL)等聚合物的关键单体,相关高分子材料具有良好的生物降解性和兼容性,在生物医药、环保材料等领域具有重要应用。ε-己内酯的绿色廉价制备是制约这类材料广泛使用的重要因素,其中1,6-己二醇选择氧化内酯化制备ε-己内酯有待进一步发展。本文分析对比了环己酮Baeyer-Villiger氧化法和1,6-己二醇氧化内酯化法制备ε-己内酯的优缺点,按照反应体系中是否加入电子受体(氧化剂)分类介绍了国内外1,6-己二醇选择氧化内酯化制备ε-己内酯相关的研究进展,并对相应反应体系、所用催化剂的优缺点进行了评述,最后对该转化过程的发展趋势进行了展望。     

聚(Nε-苄氧羰基赖氨酸)-聚乙二醇-聚(Nε-苄氧羰基赖氨酸)的合成及其表征

利用三光气合成了N^E-苄氧羰基赖氨酸酸酐(Lys(z)-NCA)，并用双端氨基聚乙二醇做引发剂，在DMF中引发Lys(z)-NCA聚合，合成了聚(N^E-苄氧羰基赖氨酸)-聚乙二醇-聚(N^E-苄氧羰基赖氨酸)三嵌段共聚物。利用IR、^1H NMR、DSC和GPC对其结构进行了表征，结果表明，这种方法能够合成分子量可控、分子量分布窄(Ip=1．06)的嵌段共聚物，产率95．4％。     

金电极表面聚赖氨酸固定微过氧化物酶-11的电化学研究

通过聚赖氨酸修饰将微过氧化物酶-11(MP-11)固定在金电极表面,制备成MP-11修饰电极.修饰在电极表面上的MP-11的血红素活性中心与电极之间可进行直接的电子传递反应,其氧化还原式电位为-0.39V.该修饰电极对氧的还原具有电催化活性.当MP-11与咪唑发生轴向配位反应时,其氧化还原式电位发生负移,此时对氧的还原不再具有电催化活性.