柑橘皮中柚皮苷的研究价值及发展前景

我国是柑橘的重要原产地之一,柑橘资源丰富,优良品种繁多柚皮苷是一种二氢黄酮类化合物,具有抗癌、抑菌、抑酶、抗氧化、降血胆固醇、降低毛细血管脆性,改善微循环,治疗非典型性肺炎等生理活性,在医药和食品等领域具有极大的应用价值。     

柚果中柚皮苷含量与果实苦味相关性研究

运用HPLC法对柚（Citrus grandis L.）果实不同部位的柚皮苷含量进行测定.并对该方法相关问题进行讨论.该方法线性范围：0.056～0.504 μg（r=0.9998）,待测组分分离效果显著(R＞1.5),柚皮苷平均回收率为98.6%（RSD=2.13%）.柚果各部位柚皮苷含量差异显著,基本规律为果皮最高,其中以台北柚含量最高达到832.76×10-6 g/100 g鲜重,可作为工业生产的新原料,其次是种子,汁囊中最低.苦味程度随汁囊中柚皮苷含量的鲜重比由低到高依次增加而增强.     

柚子皮中柚皮苷的适宜提取条件研究

采用控制变量法、正交试验法对柚皮中柚皮苷提取最适宜条件进行研究。控制变量法所得结果为：水浴温度60℃、水浴次数3次、水浴提取时间40 min、甲醇溶剂20～25 ml、甲醇体积分数60～70%为最适宜的提取条件。正交试验法所得结果为：水浴温度60℃、水浴次数2次、水浴提取时间40 min、甲醇溶剂25 ml、甲醇体积分数60%,为适宜的提取条件。     

HPLC法测定骨碎补配方颗粒中柚皮苷的含量

目的:建立骨碎补配方颗粒中柚皮苷的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法定量柚皮苷.色谱柱:大连依利特C<,18>反相拄(5μm×250mm×4.6mm).流动相:甲醇-醋酸-水(35:4:65),柱温为35℃,流速:1.0mL/min,检测波长:283nm.结果:HPLC图谱显示,色谱峰形好,分离度高,阴性对照无干扰;供试品在24h内稳定(RSD=0.80%);该方法精密度高(RSD=0.31%),重复性良好(RSD=0.34%),平均加样回收率为96.97%(RSD=0.76%).结论:所建立的方法适合作为骨碎补配方颗粒的含量测定方法.     

响应面法优化超声波辅助提取梁平柚果皮中柚皮苷工艺研究

以梁平柚白皮层为原料,采用超声波辅助提取,在单因素试验的基础上,应用Box-Behnken中心组合设计(BBD)和响应面分析方法(RSM),研究了时间、温度、功率和固液比对梁平柚果皮中柚皮苷提量的影响.结果表明:回归方程有统计学意义,决定系数R2=0.973 4,4种因素对柚皮苷提取量的影响程度由大到小依次为功率,固液比,时间,温度.其优化提取工艺条件为时间50min,温度60℃,固液比1∶41g/mL,功率640 W,甲醇体积分数80%,在此条件下柚皮苷为57.124 6mg/g,与模型预测值57.744 1mg/g相近.     

利用柚皮高效发酵生产柚苷酶的研究

以棘孢曲霉为菌种,以磷酸氢二铵为氮源固态发酵柚皮生产柚苷酶,结果表明,在以柚皮为碳源和磷酸氢二铵为氮源的发酵体系中,添加疏松剂和豆饼粉对柚苷酶发酵没有显著影响,而磷酸氢二铵添加量和水分质量分数对柚苷酶合成具有显著影响.当无水柚皮粉中磷酸氢二铵和水分质量分数分别为32.4%和170.0%时,有利于提高柚苷酶发酵活力.在接种量为7.1%、发酵温度为30 ℃的情况下发酵6 d,柚苷酶比合成速率与棘孢曲霉的生长速率符合模型Y柚苷酶=6.2677 X-0.0381,其中Y代表柚苷酶的比合成速率,X代表比生长速率.用Davis法测得柚苷酶活力为94.61 IU/g,酶发酵的培养基成本（5×10-5元/IU）远远低于其他同类研究,酶的纯度远高于用豆饼粉为氮源所获得的酶纯度.     

化橘红有效成分柚皮苷的提取分离

研究了以产自广东化州市3个不同产区的化橘红为原料,用HPLC方法分析其有效成分柚皮苷含量,并研究了化橘红柚皮苷重结晶纯化工艺。结果表明,同产于化州不同产区的化橘红其有效成分含量也有区别:化州宝山产化橘红柚皮苷含量最高(109.95μg/mL),平定产其次(105.36μg/mL),河西区产最低(87.71μg/mL);化橘红柚皮苷重结晶纯化最佳条件为以50%乙醇作为结晶溶剂,在pH值等于4.0时,于5°C下结晶12 h。     

中药枳壳中柚皮苷和橙皮苷的提取方法研究

目的:采用正交设计法,对枳壳中的柚皮苷和新橙皮苷的提取方法和提取工艺参数进行优化。方法:通过水浴回流、索氏提取、超声辅助提取、微波炉辅助提取四种提取方法的比较,其中水浴回流提取法采用L9(33)正交实验以提取溶剂、时间、温度为因素,每个因素选3个水平,以枳壳中的柚皮苷和新橙皮苷的提取率来确定最优化的提取方法和提取条件。结果:水浴回流提取的优化条件是:溶剂为80%乙醇,温度为60℃,时间为40min.索氏提取优选95%乙醇,超声提取优选甲醇作溶剂。微波提取的最优化条件是,80%乙醇作溶剂,微波萃取仪功率400W,提取时间10min,温度40℃.结论:水浴回流提取法适用于作为生产制剂的提取,超声和微波提取法宜用于药物成分分析的提取。     

槲蕨中提取柚皮苷最适宜条件研究

采用控制变量法、正交试验法探索槲蕨中提取柚皮苷最适宜的条件。控制变量法结果:提取柚皮苷最适宜条件水浴温度为60℃,水浴次数为3次,提取时间为80min,甲醇体积为40mL,甲醇浓度为60%。正交试验法结果:提取柚皮苷最适宜条件水浴温度为60℃,水浴次数为3次,提取时间为40min,甲醇体积为30mL,甲醇体积分数为60%。     

酶法改性柚皮苷的高效液相色谱分离及结构表征

在叔戊醇有机介质中,用固定化脂肪酶Novozym 435®催化柚皮苷和棕榈酸发生酯化反应,在柚皮苷分子上引入亲脂性的棕榈酰基团。采用制备高效液相色谱对改性柚皮苷进行分离纯化,优化的色谱条件为：色谱柱：C18柱（21.5×250 mm）;流动相：甲醇;流速：20 mL/min;进样浓度：30 mg/mL;进样体积3 mL。产物经红外光谱、质谱证实为柚皮苷棕榈酸单酯,核磁共振碳谱分析表明,酰基化选择性地发生在柚皮苷的葡萄糖基的6′′-羟基位上。并对区域选择性反应机理进行了探讨。     

响应面法优化柚皮苷的提取条件

采用超声波提取法从成熟鲜柚皮中提取柚皮苷,运用响应面法优化柚皮苷提取条件。考察料液比、提取时间、乙醇浓度等因素对柚皮苷提取率的影响。响应面实验结果表明:柚皮苷超声波提取的最佳条件为料液比1∶35,乙醇浓度65%,提取时间60 min,此工艺条件下所得柚皮苷得率为6.26%。     

基质固相分散-毛细管电泳法测定柚果皮中柚皮苷的质量浓度

以硅藻土为分散剂, 甲醇为洗脱剂, 采用基质固相分散-毛细管电泳法测定柚果皮中的柚皮苷, 并考察分散剂种类和用量、 洗脱剂种类和用量及柚果皮样品和硅藻土的质量比对测定结果的影响. 结果表明: 柚皮苷的加标回收率为79.2%; 检测限为1.5 μg/mL.     

柚皮苷对DSS诱导结肠炎小鼠肠道菌群的影响

目的 探究柚皮苷( Naringin,NG)对 DSS 诱导的结肠炎小鼠肠道菌群的影响。 方法 用 C57BL / 6 雄性小鼠构建动物模型,将 15 只小鼠分为对照组、模型组和 NG 组,每组 5 只。 除对照组外,其它两组给予 4% ( m / v) DSS 自由饮用,第 2 天给予 NG 组小鼠 NG 干预。 第 9 天处死小鼠,留取结肠和粪便。 Western blot 检测炎症分子蛋白磷酸化核因子-κB-p65( p-NF-κB-p65)和凋亡蛋白 Bcl-2。 PCR-变性梯度凝胶电泳( PCR-DGGE) 技术分析小鼠肠道菌群结构。 结果 模型组 p-NF-κB-p65 和 Bcl-2 蛋白表达与对照组比较,有显著差异( P<0. 01) ,且 NG 干预后有不同程度的改变;对 PCR-DGGE 中的条带通过非加权成对算术平均( UPGMA)算法进行聚类分析,结果显示各组小鼠结肠菌群结构具有显著差异。 结论 NG 可以有效改善 DSS 诱导的结肠炎症状,改善小鼠肠道菌群。     

优化D101大孔树脂脱除蜜柚柚汁中柚皮苷的工艺研究

选择树脂的添加量、作用时间、温度、PH以及转速等因素进行单因素和正交实验,对国内优质D101大孔树脂脱除梅州蜜柚柚汁中柚皮苷的工艺进行研究.实验结果表明:D101大孔树脂脱除蜜柚柚汁中柚皮苷的最佳工艺条件为树脂用量2.2%,作用时间18 min,温度30℃,转速100 r/min,PH3.5.在此条件下进行验证实验,得出柚汁实际脱苦率为51.44%,脱苦后调整柚汁的可溶性固形物并进行感官评价,得加糖量为6%时,柚汁的可溶性固形物为13.9%,此时柚汁感官评分可以达87分,且无明显苦味,受到消费者喜好.     

柚皮苷与人血清蛋白作用机理探索

利用荧光光谱及同步荧光光谱法研究了柚皮苷与人血清蛋白相互作用.结果表明,相互作用使得人血清蛋白荧光猝灭且引起蛋白构象改变;猝灭常数大小证明人血清蛋白荧光猝灭机制为静态猝灭;根据能量转移原理求得结合距离为3.7 nm,存在发生能量转移的可能性.     

固定化柚皮苷酶解转化制备普鲁宁

选择D101-1大孔吸附树脂固定化反应底物柚皮苷,考察α-L-鼠李糖苷酶水解柚皮苷转化普鲁宁的工艺条件,结果表明,其最适条件为:α-L-鼠李糖苷酶用量30 U/mL,最适酶反应温度60 ℃,pH=4.0,底物质量浓度2.4 g/L,振荡速率80 r/min。在此条件下酶解反应420 min,柚皮苷转化率达到78%。此外,研究发现,高浓度的Mn2+、Fe2+对酶解反应有极强的促进作用。Lineweaver-Burk双倒数拟合曲线的Km=5.12 g/L,Vmax=0.013 g/(L·min)。利用薄层色谱(thin layer chromatography,TLC）和高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）对酶解产物进行分析,并验证得出,反应完全后可得到纯的反应产物普鲁宁。     

柚皮素、柚皮苷与牛血清白蛋白相互作用的机理分析

采用荧光光谱法对柚皮素(naringenin, NG)、柚皮苷(柚皮素-7-新橙皮苷,naringin, NA)猝灭牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)荧光发射的机理进行了研究,并使用分子对接技术获得了NG, NA同BSA之间的结合模型。优化了水浴时间和溶液pH等实验条件,荧光测试结果显示NG,NA浓度与BSA的荧光发射强度呈负相关,并且NG猝灭BSA的程度强于NA。通过分析不同浓度NG, NA猝灭BSA的荧光发射可知,NG与NA猝灭BSA的机理都是静态猝灭,即与BSA形成1∶1型非共价复合物。同步荧光光谱实验结果表明,NG与NA对BSA的Trp残基的影响强于对Tyr残基的影响。分子对接结果表明,在BSA的Trp213残基附近存在一个疏水性口袋,NG可以进入其中并与BSA形成复合物,而NA则结合在BSA表面,无论NA还是NG都与BSA的多个氨基酸残基存在氢键或疏水作用。     

柚皮苷与α-糜蛋白酶相互作用的光谱研究

分别采用荧光、圆二色谱法及活性测定法研究了柚皮苷与α-糜蛋白酶(α-CT)的相互作用.考察了柚皮苷与α-CT的相互作用机理,测定了不同温度下该反应的结合常数及热力学参数.实验结果表明:柚皮苷分子与α-CT作用导致α-CT内源荧光猝灭,猝灭机理主要为静态猝灭,它们之间主要为氢键或范德华作用力;CD光谱研究表明柚皮苷能够引起α-CT的构象变化,使α-螺旋含量减少;酶活性实验表明柚皮苷对α-CT酶活性的影响不大.     

高效液相色谱法测定小儿百部止咳糖浆中柚皮苷的含量

为了更好的控制小儿百部止咳糖浆的质量。本文采用高效液相色谱法对柚皮苷的含量测定方法。结果柚皮苷在0．1606～0．9638μg范围内，柚皮苷进样量与峰面积值呈良好的线性关系（r＝0．9997）。柚皮苷的平均回收率为99．87％，RSD为0．67％。结论该法操作简便，结果可靠，为小儿百部止咳糖浆限量标准提供了科学依据。     

柚皮中柚皮苷和类柠檬苦素的提取及分离纯化

用热水煮提法提取出柚皮中柚皮苷和类柠檬苦素等大量苦味活性物质,通过静态吸附－解吸试验,筛选出具有较大吸附和解吸率的D101大孔吸附树脂进行分离纯化,得出最优的吸附条件:树脂添加量3.0%（质量分数）,25 ℃恒温条件下摇床以180 r/min振荡90 min.在此条件下,柚皮苷和柠檬苦素吸附率都达到100%.吸附完全后进行动态洗脱,洗脱液再通过萃取和重结晶后可有效分离纯化柚皮苷和柠檬苦素类似物,纯化后的样品用HPLC法测得柚皮苷纯度达到95.8%,用紫外分光光度法测得柠檬苦素类似物纯度达到90.9%.