胃肠道恶性肿瘤及其切缘组织中c—myc基因mRNA和端粒酶活性的表达

探讨胃肠道恶性肿瘤及其切缘组织中c-myc基因mRNA和端粒酶活性表达与手术切缘的安全性关系。方法：用RT－PCR和TRAP方法检测12例胃癌和19例肠癌标本和切缘组织中c-myc基因mRNA和端粒酶活性的表达,结果：（1）胃肠道恶性肿瘤组织中c-myc基因mRNA和端粒酶活性有很高的表达率。（2）肿瘤的上下切缘组织中c-myc基因mRNA和端粒酶活性表达无明显差异。（3）在中心表达阳性的肿瘤中,距中心4厘 上端粒酶均为阴性表达,而c-myc基因mRNA在距4cm处仍有小部分呈阳性表达,5cm处则呈阴性,结论：就c-myc基因mRNA表达和端粒酶活性表达而言,距离肿瘤5cm可定为肿瘤的分子切缘。     

三种草坪草愈伤组织的诱导及其脱水处理后的蛋白分析

研究了匍匐翦股颖、高羊茅和狗牙根3种草坪草愈伤组织诱导情况,愈伤组织诱导率分别为53．0±8．7％、60．7±7．9％和14．7±4．0％,三者的愈伤组织含水量约为91．4±0．3％、94．1±0．4％和93．4±0．2％．经空气干燥法脱水处理,两种冷季型草坪草匍匐翦股颖和高羊茅愈伤组织中18．5kDa和28．7kDa的热稳定蛋白表达量增加．暖季型草坪草狗牙根中18．5kDa的热稳定蛋白表达量增加,而35kDa的热稳定蛋白表达量明显减少．经脱水蛋白的Western Blot检测,脱水处理后3种草坪草中均有脱水蛋白大量积累,分子量从18．5到34．3kDa不等．暖季型和冷季型草坪草在热稳定蛋白和脱水蛋白表达上存在的差异,可能与它们的耐旱机理及耐旱性强弱差异有关．     

人乳头瘤病毒16及18型E6与p53表达的关系

采用 SP免疫组织化学方法 ,比较了 6 8例宫颈癌组织中 HPV- 16、18E6和 p5 3蛋白的表达及其相互关系 .结果表明 ,6 8例宫颈癌中有 6 0例 HPV - 16、18E6蛋白和 17例 p5 3蛋白呈阳性表达 ,阳性率分别为 88.2 %和2 5 .0 % ;在 5 9例 HPV- 16、18E6蛋白过度表达的宫颈癌中有 5 4例 p5 3蛋白为阴性或弱阳性表达 ,二者呈负相关(P <0 .0 1) .p5 3蛋白阳性表达与组织学类型有关 ,其阳性率在宫颈腺癌中为 83.3%和宫颈鳞癌中为 17.2 % ,差异有极显著意义 (P <0 .0 1) .p5 3蛋白阳性表达随着临床分期上升而增高 .     

葡萄球菌肠毒素B基因原核表达系统的构建及其表达产物促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用的研究

构建葡萄球菌肠毒素B（staphylococcal enterotoxins B,SEB）基因原核表达系统,了解重组表达产物rSEB促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长的作用．采用高保真PCR从金黄色葡萄球菌FRIS6B株DNA中扩增全长SEB基因片段,T—A克隆后测序,构建SEB基因原核表达系统pET32α-SEB—E．coliBL2IDE3．采用SDS-PAGE检测rSEB表达产量,Ni—NTA亲和层析法提纯rSEB．采用TCID50法测定rSEB对Vero细胞的细胞毒性作用并计算TCID50值．采用MTT比色法分别检测不同浓度rSEB体外对小鼠脾细胞、人外周血单个核细胞（PBMC）的促增殖作用以及对HepG2细胞（人肝腺癌细胞）、HeLa细胞（人宫颈癌上皮细胞）的生长抑制作用．与公布的相关序列比较,所克隆的SEB基因核苷酸序列相似性为100％．rSEB表达量约为细菌总蛋白的40％．rSEB对Vero细胞的TCIC50为3．02μg．5．0～20．0μg／ml的rSEB对小鼠脾细胞和人PBMC均有明显的促增殖作用（P〈0．05）．5．0～20．0μg／ml rSEB作用的人PBMC上清均能有效地抑制HepG2细胞和HeLa细胞生长（P〈0．05）．本研究成功地构建了rSEB高效原核表达系统．rSEB仍然具有生物学活性．所建立的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用的检测方法,为以后减毒rSEB突变体的筛选奠定了基础．     

蛋白质三级结构对蛋白质内部形成紧密接触对速率的影响

通过蛋白质分子内两残基间距的概率分布函数P（r）,计算了641个蛋白质分子内近程和远程紧密接触对的形成速率．分析了不同蛋白质结构,不同紧密接触对半径以及DNA的绑定对速率的影响．结果表明：不同结构类型蛋白近程和远程紧密接触对的形成速率的变化趋势恰好相反．近程紧密接触对的形成速率ks随着n（n≡｜j—i｜）的增大而增大,远程紧密接触对的形成速率kL随着n的增大而减小,并且远程紧密接触对的形成速率AL满足AL（n）∝^-γ的关系、γ值随着紧密接触对半径α的增大而变小,当α=0．6nm时,全α蛋白的γ值等于0．382,α/β蛋白的γ值等于0．343,全β和α＋β蛋白的γ值等于0．218．DNA的绑定使蛋白质分子内近程和远程紧密接触对的形成速率都减小．     

ELMO3在结肠癌组织中的表达

为了检测吞噬和运动蛋白家族中的ELMO3在结肠癌组织中的表达情况,并探讨其与结肠癌临床病理参数间的相关性及意义,本研究应用免疫组化法检测了组织芯片中75例结肠癌及相匹配的癌旁正常结肠组织中ELMO3蛋白的表达水平。结果显示,ELMO3在结肠癌组织中的阳性表达率显著高于对应的癌旁组织(P<0.001);不同性别、年龄和肿瘤部位的ELMO3表达水平均无显著性差异(P>0.05);不同肿瘤大小、结肠癌分化程度、浸润深度和远处转移的结肠癌组织中的ELMO3表达水平存在显著性差异(P<0.05)。且ELMO3的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移和临床TNM分期均呈正相关性(R=0.386、R=0.608和R=0.760,P<0.05),即随着肿瘤分化程度、淋巴结转移和临床分期的增高,ELMO3的表达水平也增高。尤其是ELMO3在发生淋巴结转移的结肠癌组织中细胞染色强度显著高于未发生淋巴结转移的结肠癌组织中细胞染色强度,其差异具有统计学意义(P<0.05)。这些结果表明,ELMO3在结肠癌组织中高表达,其表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移和临床TNM分期相关,提示ELMO3表达水平与结肠癌生物学行为密切相关,有望成为结肠癌侵袭转移治疗的有效靶点。     

幽门螺杆菌临床菌株主要蛋白抗原表达及其诱导宿主产生抗体差异性的研究

建立了基于幽门螺杆菌重组蛋白抗原rUreB、rHpaA、rVacA、rCagAl、rNapA、rFlaA和rFlaB的ELISAs,用于检测幽门螺杆菌临床菌株上述抗原表达率和幽门螺杆菌感染病人血清IgG阳性率,另采用PCR检测临床菌株中上述抗原编码基因携带率,以期为选择幽门螺杆菌基因工程疫苗抗原提供依据．实验结果显示,rUreB、rHpaA、rVacA、rCagAl、rNapA、rFlaA和rFlaB表达量分别约为细菌总蛋白的35％、32％、15％、230．4、56％、25％和20％．各重组抗原均能与商品化幽门螺杆菌抗血清（DAKO）产生阳性WesternBolt结果,免疫家兔能产生特异性抗体．从332例慢性胃炎或消化性溃疡病人胃黏膜活检标本中,分离获得145株幽门螺杆菌,其阳性率为43．8％．所有幽门螺杆菌临床菌株均表达UreB、HpaA、FlaA和FlaB,52．4％、91．7％和93．1％菌株分别表达VacA、CagA和NapA．145例幽门螺杆菌感染的病人血清中,UreB、HpaA、VaeA、CagA、NapA、FlaA和FIaB的IgO抗体阳性率分别为100％、86．9％、42．8％、70．3％、89．7％、84．8％和79．3％．此外,不同胃疾病标本中幽门螺杆菌分离率均无显著性（P〉0．05）,但菌株VaeA和NapA表达率与疾病严重程度相关（P〈0．05）．综合分析实验结果,ureB是研制幽门螺杆菌基因工程疫苗首选抗原,其次是NapA和HpaA;各病种与幽门螺杆菌感染率无关,但与菌株毒力有关．     

蛋白磷酸酶2A抑癌因子在非小细胞肺癌组织中的表达及其对预后的影响

目的探讨蛋白磷酸酶2A抑癌因子(CIP2A)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对预后的影响.方法选择2010年6月～2011年5月,收治的106例NSCLC患者,均在医院进行手术切除治疗.本方案经新疆医科大学附属肿瘤医院伦理委员会批准,所有患者和家属签署知情同意书.手术切除癌组织和匹配的癌旁无瘤组织.用免疫组织化学和图像分析技术检测上述病理标本中CIP2A蛋白的表达情况.随访3年,生存时间按月计算,总体生存时间计算从手术日期到死亡或未次随访日期;无瘤生存时间的截止点以术后首次CT、超声、核磁等影像学证实肿瘤复发或转移.失访病例和非肿瘤原因死亡病例按统计学要求以截尾数据处理.观察CIP2A蛋白的表达情况与患者生存率的关系,用统计学方法对影响预后的因素进行相关性分析.结果其中男性75例,女性31例,年龄:26～85岁,平均(64.18±10.33)岁,体重指数(22.13±1.35)kg﹒m2.106例患者中,有10例失访,剩余96例患者完成研究,随访率为85.71%.截至末次随访时间,43例(44.79%)患者死于原发性肿瘤,53例(55.21%)继续存活.按TNM分期分期,I期患者43例,II期患者30例,IIIa患者期18例,IIIb患者期13例,IV期患者2例.腺癌45例,鳞癌38例,大细胞癌10例,腺鳞癌13例.在癌组织标本中高表达23例,中表达31例,低表达21例,21例无表达,表达率为78.13%;在癌旁正常组织低表达31例,无表达65例,表达率为32.29%.CIP2A的蛋白表达在癌组织中显著高于相应癌旁组织(P0.05);CIP2A高表达患者3年总生存率和3年无瘤生存率均显著低于低表达的患者(P0.05).单因素分析显示,CIP2A蛋白表达与3年总生存率密切相关;多因素分析显示,CIP2A蛋白表达不是3年生存率的独立影响因素.结论 CIP2A蛋白在NSCLC组织中高表达,且阳性表达患者的3年总生存率和3年无瘤生存率均显著低于阴性表达患者,但是多因素分析结果显示,CIP2A不是NSCLC患者预后的独立危险因素,可能与其他因素协同影响NSCLC的预后.     

白缘(鱼央)微卫星分子标记的筛选

用磁珠-生物素标记的微卫星探针(ACA)15与白缘缺(Leiobagrus marginatus)基因组酶切片段杂交,捕获含有微卫星序列的DNA片段,连接到T载体中,构建富集微卫星序列的小片段插入文库,再用γ-32P标记的探针进行二次筛选,获得阳性克隆785个,对其中的140个克隆进行了测序,获得完整的微卫星序列132个．用引物设计软件Primer Premier 5．0设计引物64对．对其中的20对引物进行了多态性检测,筛选到稳定扩增的标记13对,用此13对微卫星引物分析了缺属白缘缺(L．marginalus)、拟缘缺(L．marginatoides)(大、小各1种)、黑尾缺(L．nigricauda)共4个群体的遗传多样性,其中10对微卫星引物在种内或种间表现出多态性．     

非洲爪蟾卵母细胞内源性ATP激活电流ID2成分的分析

在带有滤泡膜的非洲爪蟾卵母细胞标本上,应用双电极电压钳及胞内透析方法进行记录,外加ATP所激活的内源性膜电源包括3个成分依次为：快内向电流（early fast depolarizing current,ID1),慢内向电流（lateslow depolarizing current,ID2)和慢外向电流(slow hygerpolarrizing current,IH),本文主要分析ID2成分的特征及其产生的机制,结果如下：（1）胞内透析500μmol/L GDP-β－S,500min后被完全阻断;（2）外液中[Cl^-]从100mmol/L下降到5mmol/L时,在ATP（100μmol/L）作用下,ID2幅值随[Cl^-]的下降明显增大;（3）外液中无Na^ 时ID2幅值增高（P＜0．05）。结果表明,ID2是由P2Y受体所介导,通过G蛋白耦联及胞内信号转导而引起胸内Ca^2 依赖性Cl^-外流所致。     

角蝾螺精子的超微结构

用透射电镜(TEM)技术研究了角蝾螺精子的超微结构.成熟精子包括头部和尾部.头部由啤酒瓶状顶体与柱状细胞核构成.顶体内含物分布均匀,电子密度稍低于细胞核;顶体下腔呈细长管状,基部扩大成喇叭形,内有颗粒状物质分布.细胞核物质致密,电子密度高;核的前、后端都有一V字形凹陷,分别为核前窝和核后窝.尾部包括中段和末段.中段由5个线粒体围绕近、远端中心粒构成;末段细长鞭状,由中央轴丝及外包的质膜组成,轴丝为典型的"9+2"结构.比较了角蝾螺精子与相关腹足类精子结构的异同,分析了角蝾螺精子在腹足类系统演化中的地位.     

PFCVD氮化硅膜的性质与生长条件的关系

本文研究由国产DD-P 250型等离子淀积设备制备的氮化硅膜的性质与膜的生长条件的关系.俄歇分析的估算表明膜的组份在纵向分布均匀，含氧量均较低(3%以下)，任何使Si/N比增大的生长条件均会使固定界面正电荷增加，固是界面正电荷密度与陷阱密度均在10'z/cmz量级，膜的导电机理显示Poole-Frenkel发射，当Si/N比为1.25^-0.81时，膜的击穿场强为3.0~8. 5 MV/cm.     

MLH1、MSH2基因在散发性左、右半结肠癌中的表达差异及对临床特征的影响

探讨错配修复基因MLH1、MSH2在散发性左、右半结肠患者中的表达差异, 并分析这种差异与结直肠癌临床病理特征的相关性. 收集2015年12月至2018年12月期间, 在宁波市第一医院就诊的133例结直肠癌患者的病例资料, 分析左、右半结肠癌中MLH1、MSH2基因的表达差异, 以及这种差异与结直肠癌临床病理特征的相关性. 结果表明, 在结直肠癌病例中, MLH1、MSH2的表达缺失率与肿瘤的发病部位和分化程度有关(P＜0.05), 右半结肠癌的病例与总体样本表现更相近. 在散发性结直肠癌中, MLH1、MSH2的表达缺失率方面, 右半结肠癌高于左半结肠. 在右半结肠癌病例中, MLH1、MSH2的表达缺失患者相对发病年龄早, 分化程度低, 不容易发生神经浸润; 而在左半结肠癌MLH1、MSH2的表达缺失病例中, 无明显相关表现.     

广义抽象距离空间的度量方程

来自工程和科学研究领域的许多问题,最终都需要求解几何约束问题.距离几何中的各种度量方程为解决涉及几何度量的几何约束问题提供了数学基础,同时是研究正定和非正定距离几何的基础内容和基本工具.通过提出广义抽象距离空间的概念,消除抽象距离空间距离矩阵对称的这一限制条件,建立了广义抽象距离空间的秩的基本定理,作为建立在欧氏空间和非欧空间中的广义抽象距离空间的度量基础,给出了几个具体的有限齐秩广义抽象距离空间的广义度量方程.利用这些广义度量方程,为求解更为复杂的几何约束问题提供了所必需的各种代数方程.     

美地那对土壤溶液含盐量变化的影响

在田间利用盐分传感器对土壤溶液电导率连续观测表明，施用美地那可在灌水期间增加表层，10cm,30cm，深土壤溶液盐分淋洗量，在未灌水期间抑制这些土层土壤溶液中盐分累积,60cm深土壤液电导率变化较以上土层缓和，田间施用美地那对该层土壤液含盐量影响不大。     

重组真核表达载体pEGFP—C1／cecropin—XJ的构建及其在胃癌细胞MGC80—3中的表达

目的构建新疆家蚕抗菌肽（cecropin—XJ）基因的真核表达载体pEGFP—C1／cecropin—XJ（pEGFP—cec），检测其在肿瘤细胞中的表达情况，探讨抗菌肽对肿瘤细胞的作用机制和抗菌肽抑瘤作用效果．方法应用基因重组技术，将新疆家蚕抗菌肽（cecropin—XJ）基因克隆到真核表达载体pEGFP—C1，通过酶切和测序的方法鉴定重组质粒pEGFP—cec的正确性．将pEGFP—cec经脂质体法转染到胃癌细胞MGc80—3，48h后观察EGFP瞬时表达情况；72h后，应用RT—PCR，检测抗菌肽cecropin—XJ基因的表达；96h后，消化细胞，经台盼蓝染色，检测重组质粒pEGFP—cec表达产物对肿瘤细胞的影响．结果细胞转染48h后，荧光显微镜下可观察到EGFP的表达，发出绿色荧光；转染72h后，RT—PCR检测到胞内有抗菌肽cecropin—XJ基因的表达；表达产物能够抑制肿瘤细胞的生长．结论成功构建了真核表达载体pEGFP—cec，并在肿瘤细胞中可见抗菌肽cecropin—XJ和EGFP基因的有效表达以及表达产物具有显著的抗肿瘤活性．为深入开展抗菌肽抑制肿瘤的研究奠定基础．     

肩关节前上外侧手术入路的应用解剖

目的为肩关节前上外侧手术入路提供解剖学依据．方法按照手术入路和层次,对25例成年尸体50侧上肢标本作了解剖观测．结果三角肌前外侧部起点长度为(8.73±0.64)cm,三角肌肩峰外侧端起点至三角肌粗隆长(15.49±1.57)cm．腋神经前支于肩峰外侧端与三角肌止点连线相交点位于肩峰下(6.19±0.49)cm,相当于肩峰与三角肌止点连线间三角肌长度的上2/5与下3/5交点．结论手术横行切口,从肩峰沿锁骨向内侧不超过(8.73±0.64)cm,否则容易损伤位于三角肌胸大肌间隙内的头静脉、胸肩峰动脉和胸外侧神经．纵行切口,从肩峰向下不超过(6.19±0.49)cm,也就是说此纵切口不超过三角肌中线长度的上2/5．以防损伤腋神经前支及旋肱后动、静脉等．     

旅游者感知距离的影响因素分析

感知距离对旅游者的目的地选择行为具有重要影响.运用独立样本T检验法和单因素方差分析法对旅游者感知距离的影响因素进行了研究.得到：在同等实际距离水平下①性格是影响感知距离的显著因素,性格外向的旅游者的感知距离比性格内向的旅游者的感知距离近. ②目的地有无亲友是影响感知距离的显著因素,在目的地有亲友的旅游者的感知距离比在目的地无亲友的旅游者的感知距离近. ③旅游目的是影响感知距离的显著因素,以商务会议或探亲访友为目的的旅游者的感知距离比以纯旅游为目的的旅游者的感知距离近. ④旅游次数是影响感知距离的显著因素. 随着旅游者去同一旅游目的地次数的增多,旅游者对该旅游目的地的感知距离会逐渐变近. ⑤旅游经验是影响感知距离的显著因素,并且旅游者的旅游经验越丰富对距离的感知越近. ⑥性别、年龄、学历、家庭收入、职业、旅游方式和交通方式7个因素对感知距离的影响不显著. 但总体上,女性旅游者的感知距离比男性旅游者近;家庭收入高的旅游者的感知距离比家庭收入低的旅游者近;团队旅游者的感知距离比自驾车和散客旅游者近.