八角莲不同部位鬼臼毒素分布的毛细管区带电泳研究

建立了一个简单灵敏的分离测定鬼臼毒素的高效毛细管区带电泳方法,并用该方法研究了八角莲的不同部位中鬼臼毒素的分布情况。结果表明,在未涂层石英毛细管(57cm×75μmi.d.,有效长度50cm)中,以25mmol/L的硼砂(pH10.8)缓冲溶液为电解质,鬼臼毒素可与八角莲不同部位中的其它组分得到有效分离。方法对鬼臼毒素的测定范围为1.5~171.0mg/L,相对迁移时间和峰面积的RSD值分别为1.50%和0.82%(n=8)。对八角莲的根、茎、叶、须乙醇提取物进行单独测定,发现鬼臼毒素在八角莲不同部位中的分布是不均匀的,其中根部最多,而叶中最少。     

植物形成愈伤组织的激素调节与核酸及氨基酸代谢的关系

本文将绿豆子叶切段培养在Miller培养基上附加或不附加生长素和激动素,研究了受伤和激素诱导形成愈伤组织的作用.实验证明绿豆子叶切段必须有生长素和激动素才能形成愈伤组织.25S和18S的RNA明显增加。对照子叶切段比形成愈伤组织的切段中自由氨基酸的含量多,而结合氨基酸的情况相反.脯氨酸和羟脯氨酸的含量在两种组织中都是随着培养时间的延长而增加,但是形成愈伤组织的切段中羟脯氨酸和脯氨酸含量的比例却大大超过对照。     

高等植物根原生质体的分离和培养

本文由12种植物,其中包括8种豆科植物(绿豆、黑绿豆、大豆、豌豆、木豆、蚕豆、苜蓿和胡卢巴)和4种十字花科植物(油菜、本油菜、甘兰和白芥)的萌发种子的幼根分离得到了根原生质体.根原生质体在培养中表现出活跃的分裂能力.除了在木豆和蚕豆中仅观察到细胞分裂外,其余10种植物的根原生质体均形成了愈伤组织。其中苜蓿根原生质体通过形成胚状体再生了植株,而油菜和甘兰的根原生质体通过愈伤组织诱导成芽也再生了植株,由此证明了根原生质体的全能性.这为那些在分离或培养原生质体方面仍存在困难的植物种提供了另一可供选择的系统.本文还讨论了这一系统的优点以及存在的问题。     

三维荧光结合交替三线性分解方法测定中药鬼臼和人体体液中鬼臼毒素含量

本文采用三维荧光光谱结合化学计量学交替三线性分解(ATLD)方法,对中药鬼臼和人体体液中鬼臼毒素的含量和回收率进行测定,利用核一致诊断法对体系的组分数进行了估计。采用标准曲线法和二阶标准加入法得到的鬼臼中鬼臼毒素的含量分别为4.855%±0.14%和4.558%±0.05%,回收率为101.4%±1.2%,人体血浆和尿液中鬼臼毒素的回收率分别为101.4%±3.9%和99.4%±0.9%,得到的鬼臼毒素的解析光谱与真实光谱几乎完全重合。实验结果表明,该方法可用于干扰组分共存下中药鬼臼和人体体液中鬼臼毒素的快速、准确定量分析。同时,讨论了内滤光效应对定量测定鬼臼毒素的影响及其校正方法,吸光度校正后的定量测定结果更好。     

抗4-氧赖氨酸的烟草愈伤组织突变体及其再生植株组织的研究

本文用烟草叶片发生的愈伤组织,相继用L-4-氧赖氨酸(OL,1克/升),2％甲基磺酸乙酯(EMS)和OL(4克/升)处理,选择并建立了抗OL的烟草愈伤组织突变体(W_0),它对乙硫氨酸(Eth)和5-甲基色氨酸(5MT)不表现交叉抗性。它比其亲本积累赖氨酸多一倍。从它再生出突变植株,在培养瓶内开花结籽。从突变植株发生次级愈伤组织(BCB)。检查了W_0和BCB对OL的抗性,赖氨酸含量和过氧化物酶同工酶谱带,证实与其亲本不同的上述三项特征都能通过再生传递在次级愈伤组织培养上表达。     

缺铁条件下苹果砧木愈伤组织的特异反应及多肽分析

以苹果属砧木种对缺铁敏感的山定子(Malus baccata(L.)Borkh.)和对缺铁耐受的西府海棠(Malus micromalus Makino)为材料,用无菌苗茎段建立了可继代培养的愈伤组织试验体系。比较了两种愈伤组织在不同铁营养条件下其生理与生化的变化。山定子愈伤组织在铁逆境下,其干重和鲜重显著增加,P,S,Mg,K,Zn,B等元素含量也均有所增加,三价铁还原能力未发生变化,细胞的超微结构遭到一定损伤,并在加重碳酸根离子(HCO_3~-)的缺铁逆境下合成了一种25kD的多肽。相反,西府海棠愈伤组织在缺铁条件下,干重和鲜重未发生显著变化,P和S元素含量显著降低,三价铁还原能力增加,并形成了传递细胞,在低铁和低铁加重碳酸根离子逆境下,合成了25kD,34kD和100kD的多肽。以上结果表明,对缺铁敏感的山定子和对缺铁耐受的西府海棠对缺铁营养逆境的反应不同,这是由其不同的遗传基础决定的。本结果为今后培育耐缺铁新类型提供了理论依据。     

小麦原生质体培养——高频率的细胞团形成和植株再生

通过调整培养基中还原态氮的含量及变換使用不同水平的2,4-D,从普通小麦的成熟种子诱导建立了胚性愈伤组织无性系,随后又从中诱导出了适合悬浮培养的松脆愈伤组织,并建立了悬浮系。由悬浮细胞游离原生质体,培养于KM8P等几种培养基中,获得了大量的再生细胞团。变换使用不同的培养基使细胞团进一步发育,形成了致密的或颗粒状的愈伤组织,在分化培养基上以器官发生和胚胎发生的途径形成了完整的植株。     

根瘤农杆菌介导的枸杞转化及转化植物的获得

本文报道一种重要的中药——枸杞(Lycium barbarum L.)的转化、再生系统的建立。以根瘤农杆菌(Agrobaterium tumefaciens)C58cl(pGV3850::neo1103)感染枸杞的幼茎外植体,在含卡那霉素50μg/ml的诱培养基上选择转化的愈伤组织,在含卡那霉素25μg/ml分化培养基上得到再生小芽,再生小芽中有30％外观形态正常。形态正常的小芽转到生根培养基后可长出根从而得到完整的植株。胭脂碱检测。NPT-Ⅱ活性测定及分子杂交的结果均表明,外源基因已导入枸杞并得以表达。在实验过程中还发现:(1) 经过一定预处理后,形成愈伤组织较快的外植体易被转化。(2) 转化后愈伤组织再生正常植株的频率比未转化的愈伤组织高。     

杜仲韧皮部离体培养的研究

本文证明杜仲剥下的树皮,其里面的部分具有未成熟的次生韧皮部.这一部分在人工培养下,可以由射线细胞和韧皮部中其他生活的细胞发生愈伤组织,从中分化出不连续的分生组织带或直接形成一些管胞状分子,后来并可出现成群的管胞状分子团.雄株韧皮部产生的愈伤组织中并可分化出不定芽和不定根原基.离休韧皮部经过人工培养所发生的愈伤组织内,没有分化出筛胞状分子。     

毛白杨的叶肉原生质体培养再生植株

毛白杨(Populus tomentosa)是我国华北地区特有的一种林木,从毛白杨无菌苗分离得到的叶肉原生质体在改良的KM8p液体培养基中进行浅层培养,7天后开始第一次细胞分裂,1O天时分裂频率可达20％左右,随后形成大量的细胞团和愈伤组织,通过调整培养基中的激素浓度,愈伤组织呈黄绿色并逐渐变得紧密,当这种愈伤组织转到附加玉米素和吲嗓乙酸或者萘乙酸的MS培养基上时,培养4—5周后开始有芽的分化,待芽伸长后从基部切下转到无激素的1/2MS培养基上,即长根形成完整植株。     

鬼臼毒素及VP-16化学活性的激光光解与脉冲辐解研究

运用激光光解与脉冲辐解技术, 对用于肿瘤治疗的鬼臼毒素(PPT)和依托泊甙(VP-16)的化学活性进行了详细的研究. 结果表明: 鬼臼毒素及VP-16经248 nm的激光激发可光电离, 且光电离的量子产额比较高, 有很强的光敏性, 而且还有多个活性基团分别与水合电子、氢原子、羟基自由基作用生成不同的瞬态粒子, 并推断出相应的反应机理. 为医学工作者进一步了解、利用鬼臼毒素和VP-16, 探讨其抗肿瘤机理提供科学的参考, 也为化学工作者进一步合成高效、低毒的抗肿瘤药物提供新思路.     

信息与服务

整形素是对植物各种生理过程和形态发生过程具有深刻影响的一类新型合成生长调节剂。它具有多种生物活性:可促进植物离体部分愈伤组织的形成,从而可用于植物组织培养;可用于进行植物无性繁殖,用于调整花期,诱发单性结实;消除某些植物的向光性和向地性。     

紫外分光光度法测定高山红景天根及其浸膏的有效成分

使用紫外分光光度法测定了高山红景天根不同部位及其浸膏中主要有效成分的含量.红景天甙、酪醇对照品溶液和供试品溶液在276nm处具有最大吸收峰,红景天甙对照品溶液的线性回归方程为A=0.00529c+0.00189,r=0.99997(n=8),线性范围为7.97～71.71mg/L,平均回收率为98.08%,RSD为2.60%(n=5).测得高山红景天原药材内层部分、外皮层部分和总体混合物部分主要有效成分(红景天甙和酪醇)的含量(以红景天甙计)分别为2.789%,2.385%和2.617%,其浸膏中主要有效成分的质量分数分别为6.384%,13.80%和6.700%.并用HPLC法验证了该法的准确性,结果表明,该法可用于红景天属植物原药材及其浸膏中主要有效成分的定量分析.     

核磁共振法快速检测肝素钠粗品

采用1 H NMR对肝素钠、多硫酸软骨素标准品进行测试,并对谱图进行了归属,建立了核磁共振法快速检测肝素钠粗品的分析方法。结果表明:用500MHz核磁共振波谱仪器进行检测,样品浓度为35mg/0.6mL时,能快速(5min)检测出粗品肝素钠中是否存在杂质多硫酸软骨素,检出限为0.3%。     

氯化铕对大黄愈伤组织生长及超微结构的影响

以掌叶大黄的愈伤组织为材料，研究了不同浓度氯化铕对其生长的影响，并利用透射电镜技术研究了氯化铕对大黄细胞超微结构的影响。实验结果表明，低浓度氯化铕促进愈伤组织生长，高浓度则抑制生长，浓度达到１００ｍｇ／Ｌ则可导致大黄外植体全部死亡。氯化铕对大黄的促进作用可被钙调蛋白的拮抗剂氯丙嗪抑制。１０ｍｇ／Ｌ氯化铕可使大黄愈伤组织的细胞形态发生明显变异。     

各生长期黄芪中黄芪多糖及微量元素的含量测定

采用水提醇沉法制备多糖粗提物，采用苯酚￣硫酸比色法测定多糖含量，原子吸收法测定微量元素的含量。结果表明：在不同时期采集的栽培品及野生品中，以１０月底１１月初、５月初的栽培品多糖及Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｎ、Ｆｅ含量最高。     

黄花烟草(Nicotiana rustica. L)叶肉原生质体花芽的发育

黄花烟草(Nicotiana rustica.L)两个栽培种的叶肉原生质体培养于Nagata-takebe(NT)培养基上形成愈伤组织。将已形成的愈伤组织移入修改的MS分化培养基(MSBI,MSBN)上诱导器官发生。仅有一个品种的愈伤组织形成了绿色突起,将它移植到不加任何生长素的基本培养基上,这些绿色的小突起在不同的光照条件下,均进一步发育成花芽,特别是其中一部分绿色小突起在试管内从愈伤组织直接形成不具叶片的花蕾,并开花结籽。     

IgG1型单克隆抗体对照品的一级结构解析

对单克隆抗体药物对照品(IgG1型)进行了全面的结构表征。采用Exactive plus EMR质谱测定了去N糖前后抗体的精确分子量,并通过计算N糖含量得出其完整分子量为148 285.0～149 020.8,完整去糖后分子量为145 810.4,N糖含量为1.67%～2.15%。优化了全柱成像实时等电聚焦毛细管电泳(WCID-cIEF)检测方法,结果显示该抗体等电点分布在8.21～8.74之间,其中主成分等电点为8.61,相对含量为61.43%。继而使用离子交换色谱检测了电荷异质性,发现碱性峰含量为4.1%,酸性峰含量为23.9%,主峰含量为72.0%,与WCID-cIEF结果吻合,并证明了方法间良好的重现性。通过切糖前后的肽图分析,获得糖肽分布信息,识别出糖修饰位点及重轻链的互补决定区(CDR),甲硫氨酸(M)的氧化位点及氧化率,并通过抗体还原前后的肽图解析出二硫键连接。研究结果同时提示该抗体对照品无C末端糖化修饰现象。     

大豆致瘤及基因转移研究

本文报道了致瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的15个菌系对大豆的致瘤作用,筛选出致瘤效果较好的7个菌系.从野生大豆、半野生大豆和栽培大豆的1553个品种和品系中筛选出94个结瘤品种和品系,占筛选总数的6%,并获得了无菌愈伤组织.经生化鉴定证明,上述愈伤组织中有一部分含有胭脂碱(nopaline),证明Ti质粒可以做为载体,把胭脂碱基因转移到野生大豆、半野生大豆和栽培大豆的基因组中去整合和表达,并稳定地保存在大豆基因组中。     

催化动力学荧光法测定日化品中的邻苯二甲酸酯

日化品中邻苯二甲酸酯PAES含量的测定对于保护人体健康具有重要作用.曾有文献测定过环境样品和日化品中PAEs的含量,如紫外分光光度法[1]、荧光法[2]、气相色谱法[3-4]和高效液相色谱法[5-6].本文发现在Co2 的催化下,邻苯二甲酸酯的水解产物可被过氧化氢氧化,发出强的荧光,从而建立了测定日化品中邻苯二甲酸酯的新方法.与文献[2]相比,本方法具有更高的灵敏度和较好的精密度,方法应用于指甲油和香皂中PAEs总量的测定,获得满意结果.