高效液相色谱-串联质谱法同时测定血液中的15种减肥药物

建立了一种专属、灵敏的同时测定血液中咖啡因、盐酸西布曲明等15种减肥药的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。样品经乙腈沉淀后,进入HPLC-MS/MS中分析检测。以甲醇和含0.1%(v/v)冰醋酸的20 mmol/L醋酸铵溶液作为流动相,采用梯度洗脱方式,以UltimateXB-C18为色谱柱进行HPLC分析;质谱分析采用电喷雾离子源,正负离子快速切换扫描,选择反应监测模式检测。15种减肥药的定量限在0.001～0.05 mg/L内,各种药物的灵敏度较高,各成分的线性相关系数均大于0.99,精密度均小于12.3%,回收率范围为77.3%～110.8%。研究了这15种药物的质谱特征。该方法灵敏、简便、快捷、专属性强,可用于动物实验样品中减肥药物的含量测定,并且对其他药品、食品中目标减肥药物的测定具有借鉴意义。     

胰脂肪酶抑制剂电位滴定筛选法的研究

建立了一种简单快速的胰脂肪酶抑制剂筛选研究的新方法,特别适用于深颜色或浑浊体系的天然药物活性分析。本研究采用临床减肥药Orlistat论证了电位滴定筛选胰脂肪酶抑制活性的可靠性和稳定性,探讨了酶抑制活性测定的影响因素,并成功应用于天然药物活性成分—黄芩苷的抑制活性研究。研究结果显示,Orlistat对胰脂肪酶具有很强的抑制活性(IC50=0.011g/L),实验结果与临床效果吻合,表明构建的胰脂肪酶抑制活性电位滴定筛选法是可靠的。此外,黄芩苷也显示出良好的胰脂肪酶抑制活性,其IC50为0.027 g/L。本研究为从天然药物筛选胰脂肪酶抑制剂作为绿色减肥药提供了一种新颖的研究思路。     

对氨基脲敏感的胺氧化酶生物功能化色谱的方法学研究

采用毛细管电泳法建立了对氨基脲敏感的胺氧化酶(SSAO)生物功能化色谱模型.将SSAO酶固载到一种仿细胞膜的载体--脂质体上,pH值对固定化酶稳定性影响的实验表明,pH 5.0是理想的固载条件;SSAO酶活性检测表明游离态和固定态的酶活性分别为0.0404和0.0347 mmol g-1 min-1.将有活性的固定化SSAO酶作为假固定相添加到磷酸盐缓冲液中(10 mmol/L, pH 5).随着固定化酶的浓度从0.004 g/L上升到0.856 g/L,其特异性底物苯甲胺的有效淌度从4.06×10-4 cm2/(V · s)下降到0.81×10 -4 cm2/(V · s).据此,建立的生物功能化色谱模型为研究生物分子间的特异性作用提供了新的技术方法.     

液相色谱串联质谱法用于肌酸的长期毒性研究

肌酸是一种普遍流行的能量增强剂,在生物体内代谢为甲胺,甲胺在对氨基脲敏感的胺氧化酶(semicarbazied-sensitive amine oxidases,SSAO)的催化下进一步生成甲醛、过氧化氢和氨。本文将肌酸的毒性与SSAO活性的升高和产物甲醛的积累联系起来,提出肌酸代谢的毒性假说,建立液相色谱串联离子阱质谱检测SSAO活性的新方法。结果表明,服用肌酸2个月后小鼠尿液中甲胺、甲醛含量升高,血清中SSAO活性升高,对肌酸的长期毒性给于了肯定的评价。     

用分子动力学模拟天然气水合物的抑制效应

用分子动力学模拟方法确定了结构H型(SH)天然气水合物的稳定晶体生长面为(001), 系统研究了277 K时三种动力学抑制剂对此晶面的影响. 模拟显示抑制剂中的氧与表面水分子形成氢键, 从而破坏原有的稳定结构, 造成水合物笼型结构坍塌, 达到抑制水合物形成的效果. 比较三种不同动力学抑制剂对SH的抑制效果得出: PVCap＞PEO＞PVP. 在此基础上研究了PVCap对天然气水合物结构I型(SI), 结构II型(SII)和SH三种不同晶型的抑制效应. 模拟发现抑制效果的次序为: SH＞SI＞SII.     

酚醛型吸附树脂对咖啡因吸附性能的研究

利用 3种自制吸附树脂JDW 1、JDW 2、JDW 3和DuoliteS 761对咖啡因进行了静态和动态吸附研究 .结果发现 3种自制树脂对咖啡因的吸附性能明显优于DuoliteS 761 ;在吸附咖啡因的初始阶段 ,即达到 3 2 %～5 1 %平衡吸附百分率时 ,吸附速率数据和半经验速率方程很吻合 ,证实吸附咖啡因是粒扩散控制过程 ;酚醛型吸附树脂等温吸附咖啡因的平衡吸附数据符合Langmuir方程 ,相关系数在 0 99以上 ,因此 ,酚醛型吸附树脂吸附咖啡因属单分子层吸附 ;用 1mol LHCl和 40 %的甲醇溶液复合使用 ,效果很好     

HPLC法对过亚硝酸根抑制剂筛选的研究

过亚硝酸根是由体内一氧化氮和超氧根阴离子反应生成的一种细胞毒性物质,能和许多生物大分子反应,如DNA、蛋白质和脂质等.本文通过高效液相色谱方法来研究槲皮素和黄酮对ONOO-诱导的DNA碱基修饰以及酪氨酸硝化的抑制作用,结果表明槲皮素抑制效果显著,而黄酮几乎没有效果.本实验的意义还在于可以将本方法推广到其他过亚硝酸根抑制剂的筛选中,成为一种比较有效且灵敏的抑制剂评价方法.     

二甲基精氨酸二甲胺水解酶-1的理论研究

运用分子对接和分子动力学方法研究二甲基精氨酸二甲胺水解酶-1(DDAH-1)与其抑制剂亚胺基烯丁基-L-鸟氨酸(L-VNIO)和亚胺基丙基-L-鸟氨酸(Me-L-NIO)的相互作用和结合模式,并根据实验得到的结论设计了亚胺基苯乙基-L-鸟氨酸(Ph-L-NIO)抑制剂.结果表明:L-VNIO比Me-L-NIO对DDAH-1的抑制效果更强,这个结果与实验测得L-VNIO和Me-L-NIO对DDAH-1的半抑制浓度IC50值大小一致.Phe75、Asp78、His172、Ser175和Asp268这五个氨基酸残基在三种抑制剂形成的复合物中起到非常重要的作用,从计算结果推断在这三个抑制剂中我们设计得到的Ph-L-NIO对DDAH-1的抑制效果最好.     

Cu(Ⅱ)离子诱导的β-淀粉样蛋白聚集抑制剂筛选及分子构效关系分析

阿尔茨海默症药物的开发对该疾病的治疗非常重要。利用纳米金为探针研究了13种化合物抑制Cu~(2+)诱导的β-淀粉样蛋白聚集的能力,筛选出了10种有效的抑制剂,并获得了抑制剂抑制能力与其分子结构间的关系,利用筛选出的抑制剂实现了β淀粉样蛋白聚集过程的抑制和H_2O_2产生量的减少,对阿尔茨海默症的研究具有重要意义。     

天然气水合物抑制剂的分子动力学研究进展

大力开发深海天然气资源是发展清洁能源的一种重要手段,但是天然气水合物的形成会给开采作业带来严重的挑战,水合物动力学抑制剂是一类可以解决深海开采技术问题的高分子化合物。分子动力学(MD)模拟对于研究水合物抑制剂具有很好的理论指导作用,文中综述了近年来利用MD评判抑制剂性能,分析可能发生的抑制方式和机理,研究影响抑制剂效果的因素及开发新型抑制剂的方法,并对今后MD模拟在天然气水合物抑制剂领域的发展方向进行展望。