2009年附属医院产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌耐药性监测

目的:了解大理学院附属医院2009年临床分离的产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的分布及耐药性.方法:按美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)标准进行ESBLs初筛、表型确证试验和病例回顾性分析.结果:临床各科室共分离肠杆菌科细菌286株,其中大肠埃希菌170株,产ESBLs大肠埃希菌有72株,检出率为42.4%(72/170),产ESBLs菌株对亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为1.4%、4.2%、16.7%和16.7%.结论:临床分离大肠埃希菌中产ESBLs菌株耐药性明显高于非产ESBLs菌株,因此加强产ESBLs大肠埃希菌酎药性监测很重要,有助于指导临床医生合理使用抗生素,防止产ESBLs菌株的广泛流行.     

产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药性分析

按美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)2005年制定的标准方法,筛选产超广普β-内酰胺酶(Extended-Spectrum β-Lactamases,ESBLs)的大肠埃希菌(Escherichia coli)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumonia),并采用微量肉汤稀释法,对宁夏地区以上2种细菌产ESBLs的耐药情况进行了检测.发现63株大肠埃希菌和41株肺炎克雷伯菌中,45株为产ESBLs菌,总阳性率为43.27%,其中,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌阳性率分别为53.97%(34株)和26.83%(11株).45株产ESBLs菌对美罗培南的敏感率为100%.对头孢他啶的敏感率为76.47%,而对其他抗菌药物敏感率较低.实验证明,宁夏地区产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性严重,应限制广谱β-内酰胺类抗生素,特别是第3代头孢菌素的使用.从目前耐药性监测来看,美罗培南可作为治疗产ESBLs菌严重感染的有效药物.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的临床感染分布及耐药性分析

目的-探讨医院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的临床感染分布及耐药情况,为临床抗感染治疗合理选择抗生素、减少耐药发生提供依据。方法：收集2010年8月-2011年12月从临床送检标本中分离的大肠埃希菌264株,药敏试验采用K～B纸片扩散法。根据美国临床检验室标准化委员会（CLSI）推荐的纸片扩散法,严格按照其制定的标准进行ESBLs确证实验。采用wHONET5．4软件进行统计学分析。结果：264株大肠埃希菌中检出134株（50．8％）产ESBLs大肠埃希菌,标本分布以痰标本最高（47．76％）,而科室分布以普外科最高（12．61％）。在药敏实验中,产ESBLs菌株对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮／舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林／他唑巴坦、呋喃妥因、头孢西丁的耐药性较低（0％。15．5％）：环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素、复方新诺明,阿莫西林／克拉维酸的耐药性较高（41.3％～82．8％）;青霉素类、头孢菌素类及ATM耐药性高（100％）,临床不宜选用。结论：产ESBLs大肠埃希菌存在多重耐药性,临床实验室应加强产ESBLs菌株的监测,根据,临床药敏结果合理选用抗生素。     

50例大肠埃希菌超广谱β─内酰胺酶检测结果及分析

目的：了解非临床标本中大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBb)的情况及检测最佳底物，以利于ESBLs菌的监控，防止ESBLs菌的传播和区域性流行．方法：用NCCLS推荐的双纸片协同筛选试验和表型确证试验对50例大肠埃希菌进行ESBLs的检测．结果：非临床标本分离的大肠埃希菌产ESBLs阳性率为896，用于ESBLs筛选的最佳底物是CTX，其次为CRO，而CAZ敏感性较差．结论：检测ESBLs，应用双纸片协同法进行初筛，对可疑菌株再用表型确证实验确证．对底物选择应使用两种以上的头孢类抗生素．     

大肠埃希菌ESBLs检测及其耐药性分析

目的探讨本地区大肠埃希菌分离株中超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的阳性率及产酶株对β-内酰胺类抗生素的耐药性。方法采用双纸片协同法检测菌株的ESBLs,并用Kirby-Bauer法检测了415株产ESBLs的大肠埃希菌对16种β-内酰胺类抗生素的耐药性,并对其标本来源和病区分布进行了分析。结果ESBLs总检出率为50．8％,其中ESBLs检出率较高的科室为普外科、脑外科、肾内科、骨科、呼吸内科。所有大肠埃希菌分离株均对Imipenem和Meropenem敏感。产ESBLs株对其他14种β-内酰胺类抗生素的耐药性均高于非产酶株。结论本地区ESBLs检出率较高,分布科室有特殊性,产ESBLs株对抗生素的耐药性高于非产酶株。     

宁夏牛源克雷伯菌和大肠埃希菌分离株产超广谱β-内酰胺酶基因型检测

为了解宁夏牛源产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumonia）和大肠埃希菌（Esche-richia coli）的耐药性和基因型分布,采用美国临床实验室标准化研究所（CLSI）2008年推荐的双纸片确证试验,对宁夏地区100株克雷伯菌和大肠埃希菌进行产ESBLs确定,并采用PCR扩增法和克隆测序法对产ESBLs菌株进行基因分型.结果显示,宁夏地区有42株产ESBLs菌株,阳性率为42%;其中31株菌扩增呈阳性,产TEM型菌17株,产SHV型菌14株,产CTX型菌15株;同时产3种基因型菌1株,同时产2种基因型菌13株,产单一基因型菌17株,分别占产ESBLs菌株的2.38%,30.95%,40.48%;多表现为多重耐药.     

4种检测超广谱β-内酰胺酶方法的比较

以头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松和氨曲南为指示底物,用双纸片协同实验、纸片表型确证实验、三维实验和E-test法4种方法检测45株产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）阳性和59株产ESBLs阴性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌.结果发现,4种方法的敏感性依次为95.56%,97.78%,93.33%,97.78%,特异性依次为96.61%,100.00%,98.31%,100.00%;头孢噻肟为宁夏地区用于检测ESBLs的最适指示底物;纸片表型确证实验和E-test法是4种检测方法中用于检测产ESBLs较可靠的方法,用三维实验检测产ESBLs菌株适合标本量较少的小型医院,双纸片协同实验和纸片表型确证实验在所有医院都适用.     

产超广谱β-内酰胺酶阴性杆菌的耐药性检测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌的耐药特点,以指导临床用药。方法用表型确证实验检测224株阴性杆菌产生ESBLs的情况,惠州阳光微生物半自动分析仪SS-100010型系统提供药敏结果。结果在224株受试菌中,共检出产ESBLs细菌78株,总阳性率为34．8％。其中,大肠埃希菌阳性率38．6％;肺炎克雷伯菌阳性率46．7％。产酶菌株对头孢他啶（CAZ）、头孢噻肟（CIX）的耐药率高达97．3％．100％。而不产酶菌株耐药率仅为10％。产酶菌株对氨基糖甙类、喹诺酮类、磺胺类的耐药率分别为：98．5％、86．3％、97％。所有受试菌均对泰能敏感。结论产ESBLs菌株的阳性率近几年有所增高,应引起临床和实验室工作人员的注意并加强对其的检测工作。     

产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶阴沟肠杆菌的表型检测及耐药性分析

目的：监测江汉大学附属医院临床标本中分离出的阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpCβ-内酰胺酶的状况及其耐药性,为临床治疗提供依据．方法：用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的确证实验进行ESBLs的检测,用表型筛选法进行AmpC酶的检测;用纸片扩散法进行药敏试验．结果：bk75株阴沟肠杆菌中检出ESBLs阳性9株（12．0％）,AmpC酶阳性11株（14、7％）;产ESBLs株对亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林／他唑巴坦、头孢哌酮／舒巴坦、丁胺卡那等药物的耐药率较低,产AmpC酶株对亚胺培南、头孢吡肟、丁胺卡那等药物的耐药率较低．结论：本院分离的阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶情况尚好;临床治疗应在药敏试验的基础上,针对不同的产酶株,选用亚胺培南、头孢吡肟和丁胺卡那等药物．     

儿童大肠埃希菌产ESBLs检测及耐药分析

目的分析吉林地区儿童产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药特点,以指导临床用药.方法用双纸片协同试验检测115株大肠埃希菌产ESBLs的情况,并用K-B纸片扩散法对其耐药性进行了检测.结果产ESBLs大肠埃希菌为36株,阳性率为31.3%;产ESBLs大肠埃希菌对多种抗生素的耐药率高于非产ESBLs大肠埃希菌;所有大肠埃希菌均对亚胺培南敏感.结论吉林地区儿童产ESBLs的大肠埃希菌检出率高并呈多重耐药性.临床治疗中应严格掌握抗菌药物应用指征,并动态监测其耐药性变迁,防止ESBLs大肠埃希菌的局部流行.     

产超广谱-内酰胺酶和AmpC酶阴沟肠杆菌的表型检测及耐药性分析

目的:监测江汉大学附属医院临床标本中分离出的阴沟肠杆菌产超广谱-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC-内酰胺酶的状况及其耐药性,为临床治疗提供依据.方法:用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的确证实验进行ESBLs的检测,用表型筛选法进行AmpC酶的检测;用纸片扩散法进行药敏试验.结果:从75株阴沟肠杆菌中检出ESBLs阳性9株(12.0%),AmpC酶阳性11株(14.7%);产ESBLs株对亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、丁胺卡那等药物的耐药率较低,产AmpC酶株对亚胺培南、头孢吡肟、丁胺卡那等药物的耐药率较低.结论:本院分离的阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶情况尚好;临床治疗应在药敏试验的基础上,针对不同的产酶株,选用亚胺培南、头孢吡肟和丁胺卡那等药物.     

产超广谱β-内酰胺酶的肠杆菌科细菌的研究

目的探讨临床分离的肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,为临床用药提供参考依据.方法采用纸片扩散初筛法、纸片扩散确证试验检测ESBLs.结果 254株肠杆菌科细菌中确证法检出产ESBLs者107株(42.1%).结论 ESBLs是导致肠杆菌科细菌耐药的主要酶.     

产β-内酰胺酶气单胞菌检测及耐药性分析

目的:检测从临床标本中分离的185株气单胞菌对10种抗菌药物的体外活性,及这些菌产AmpC酶、金属β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶的情况,指导临床正确合理使用抗生素。方法:用API-20NE和API-20E及补充生化试验对菌株进行鉴定;采用MIC法检测超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶;改良Hodge试验检测金属β-内酰胺酶;MIC测定采用琼脂稀释法。结果:气单胞菌的产酶率为9.3%(19/185),其中AmpC酶为1.6%(3/185),金属β-内酰胺酶为2.7%(5/185),超广谱β-内酰胺酶为6.5%(12/185)。氨苄西林敏感性低,三代头孢菌素和氨基甙类的敏感率在80%左右,四代头孢菌素、亚胺培南和氟喳诺酮类敏感率大于90%。结论:实验室有必要加强对产β-内酰胺酶气单胞菌的检测。氟喹诺酮类是治疗气单胞菌感染的首选药物,其次为氨基甙类。     

大肠埃希菌ELISA检测条件的优化

目的对ELISA检测大肠埃希菌方法条件进行优化研究.方法以大肠埃希菌为对象,通过Box-Behnken设计星点响应面实验进行优化实验.结果优化后ELISA检测条件:抗原包被浓度为6.25μg/m L,抗原包被最佳时间为7 h,抗体稀释度最佳为1∶625 0,大肠埃希菌ELISA检测OD值为2.12.结论经实验得证,通过星点响应面实验方法进行大肠埃希菌ELISA检测条件优化,结果合理有效,优化效果良好.     

肠杆菌科细菌产AmpC酶及超广谱β-内酰胺酶的研究

目的探讨临床分离的耐药性肠杆菌科细菌产AmpCβ-内酰胺酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,为临床用药提供参考依据.方法采用纸片扩散确证试验检测ESBLs,三维试验法检测AmpC酶.结果207株肠杆菌科细菌中产ESBLs者95株(占45.9%),产AmpC酶者52株(占25.1%).结论 AmpC酶和ESBLs是导致肠杆菌科细菌耐药的两类主要酶.     

大理学院附属医院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性研究

目的:对大理学院附属医院2011年至2012年临床分离的大肠埃希菌及肺炎克雷伯杆菌的耐药性进行分析,指导临床合理应用抗生素。方法:菌株分离及培养按常规方法进行,细菌鉴定采用VITET-2 Compact 60全自动微生物分析仪,药敏试验采用K-B法。结果:共收集标本183株,其中大肠埃希菌146株:口痰92株(63%)、分泌物17株(11.6%)、尿液16株(10.9%),脓液9株(6.1%),其他12株(8.2%);肺炎克雷伯杆菌37株:口痰27株(73%)、分泌物5株(13.5%)、脓液3株(8%)其他2株(5.4%)。药敏试验结果显示:大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌对头孢哌酮、阿米卡星、亚胺培南等耐药率较低,分别为10.3%、6.2%、2.7%和10.8%、13.5%、2.7%。结论:大肠埃希菌及肺炎克雷伯杆菌两年痰液中检出率呈上升趋势,对左氧氟沙星、头孢唑啉,氨曲南,头孢他啶等耐药率超过50%,特别是头孢他啶的耐药率相对于2008年显著升高,而对头孢哌酮、阿米卡星、亚胺培南等耐药性较低,临床应根据药敏实验合理选择抗生素。     

MUG单管定量检测法对大肠埃希氏菌的检测

采用MUG单管定量检测法对实验室制备的菌悬液、天然海水、水产品进行定量检测,并与大肠埃希氏菌多管发酵法的检测结果进行比对分析.结果表明：MUG单管定量检测法与大肠埃希氏菌多管发酵法对菌悬液、天然海水、水产品的检测结果没有统计学差异;MUG单管定量检测法检测数据的精确性高于大肠埃希氏菌多管发酵法,而且更为快速、经济.因此,该法适用于海水和水产品中大肠埃希氏菌的定量检测.     

肠癌患者肠道菌群中大肠埃希菌携带β-葡萄糖醛酸酶基因的鉴定与特征

目的探讨肠癌患者肠道菌群中大肠埃希菌携带β-葡萄糖醛酸酶(β-Glucuronidase,GUS)基因序列变化特征,为肠癌的防治与诊断提供新的思路.方法采集肠癌患者晨起粪便,常规方法分离大肠埃希菌,提取细菌基因组DNA,设计GUS基因特异性引物,进行PCR扩增及测序分析.结果 10例肠癌患者肠道菌群中大肠埃希菌均携带GUS基因,与Gen Bank(Acession No.S69414.1)uid A基因序列同源性为99%,分别在第1141和1148位A缺失,第1149位A突变成T,第1158位A突变成G.结论肠癌患者大肠埃希菌GUS基因同时出现基因突变和缺失,可成为肠癌诊断的新标记物.     

OmpC高表达与大肠埃希氏菌四环素耐药的关系

大肠埃希氏菌(Escherichia coli)外膜蛋白OmpC与细菌耐药关系密切,但有关其高表达与大肠埃希氏菌耐药的关系研究尚不清楚.为深入探讨OmpC的耐药功能,将ompC克隆到pET-28a载体上进行诱导表达,采用MALDI-TOF质谱分析证明,重组OmpC能够在外膜上大量表达.以此高表达菌株进行四环素耐药试验发现,ompC-pET-28a-BL21的最低抑菌浓度(MIC)值是对照菌株pET-28a-BL21的64倍.研究结果从蛋白质水平进一步证明OmpC在大肠埃希氏菌耐药中的重要作用.     

SHV-12型超广谱β-内酰胺酶的原核表达及免疫原性分析

利用PCR技术扩增了SHV-12 ESBLs目的基因,并将目的基因亚克隆到表达载体pET-28a(+)中,获得重组质粒pET-28a-SHV-12转化于表达菌株BL21(DE3)中诱导表达,表达蛋白纯化后经SDS-PAGE电泳分析.结果表明,目的蛋白SHV-12 ESBLs相对分子质量为30 KDa,经蛋白质印迹检测证...