基于UPLC-代谢组学技术研究泽泻结合有氧运动对高脂血症大鼠的改善作用

基于UPLC-代谢组学技术和预防性给样法研究泽泻提取物结合有氧运动对高脂血的改善作用。用高脂饲料喂饲大鼠4周,同时进行4周的泽泻提取物(AR)、有氧运动、AR结合有氧运动联合干预。第4周末处死大鼠,获得血清,采用UPLC方法测定大鼠血清,研究不同治疗组的治疗效果。测定血清TC,TG,HDL-C,LDL-C,SOD,GSH-Px,CAT和MDA的含量。代谢组学方法与生化指标的结果证明4周时间高脂血症模型成功制作,代谢组学结果显示不仅AR结合有氧运动组对高脂血症的有一定的治疗作用,而且二者联合的治疗效果优于单一AR组或有氧运动组。生化指标显示AR和有氧运动均可显著降低大鼠血清TC,TG和LDL-C含量;AR提取物结合有氧运动组大鼠血清SOD,GSH-Px,CAT显著升高,同时MDA的水平下降。AR提取物结合有氧运动可治疗高脂血症大鼠血脂异常。代谢组学可以作为判断药物或有氧运动改善疾病程度及效果的一个新方法。     

基于代谢组学技术研究泽泻对高脂血症大鼠防治的生物化学作用机制

利用代谢组学方法鉴定泽泻对高脂饲料诱导的高脂血症治疗的尿液生物标示物和阐明生物化学作用机制。超高压液相色谱和质谱联用测定对照组、高脂血症模型组及泽泻提取物治疗组尿液,采用偏最小二乘判别分析法研究对照组、高脂血症模型组及泽泻提取物治疗组之间的代谢物谱差异,鉴定了14个生物标示物,高脂血症模型组高脂饲料上调了大鼠尿液硬脂酸酰胺、油酸酰胺、3-甲基尿苷、十六烷酰胺、吲哚-3-甲酸和肌酐,同时下调了二十四碳六烯酸、3-氧-甲基多巴、吲哚-3-甲酸葡糖苷酸、多巴胺、尿酸、苯丙氨酸、左旋肉碱和甲基肌苷。泽泻提取物逆转了这些异常上调和下调的生物标示物。泽泻提取物改善了由高脂饲料造成的异常的脂肪酸代谢、氨基酸代谢和嘌呤代谢。代谢组学技术能够应用于高脂血症及其泽泻对其治疗的生物化学作用研究。     

基于代谢组学的头颈癌生物标志物研究进展

 头颈癌被列为世界上第六大癌症,头颈癌的主要诱因是人类乳头瘤病毒、酒精和烟草。由于缺乏早期检测和风险评估的生物标记物,超过50%的头颈癌患者往往在晚期阶段才能确诊,5年期幸存率低于50%。基于代谢组学技术的高通量分析方法具有发现肿瘤相关标志物的潜能,综述了代谢组学技术在头颈癌生物标志物发现中的应用进展和存在的问题,展望了进一步研究的主要方向。     

基于LC-TOF-MS与HILIC和RPLC联用的自发性高血压大鼠血浆代谢组学研究

目的 利用液质联用系统(LC-TOF-MS)对自发性高血压大鼠(SHR)实验组和京都种Wistar(WKY,Wistar Kyoto)大鼠对照组的血浆进行分析,利用代谢组学方法探寻SHR的特征性生物标志物及代谢途径。方法 收集SHR和WKY大鼠(各12只)的血浆样本,利用反相色谱(RPLC)和亲水相互作用色谱(HILIC)分离血浆中的内源性代谢物,利用偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)法进行数据分析。结果 在HILIC和RPLC模式下SHR实验组和WKY大鼠对照组之间观察到了良好的分离趋势。鉴定出了包括组氨酸、脯氨酸、尿酸、焦谷氨酸、乙酰肉碱、棕榈酰肉碱、二氢鞘氨醇、3-脱氢鞘氨醇等17个潜在的SHR生物标志物,主要受干扰的代谢途径是氨基酸代谢、肉碱穿梭系统和鞘脂代谢。结论 受到影响的生物标志物和代谢途径可为理解高血压的代谢机制提供依据。     

基于液质联用和代谢组学方法分析11种动物类中药脂质成分

目的:分析11种动物类中药的脂质成分的关联及差异.方法:选择地龙、金钱白花蛇等11种动物类中药,采用超高效液相和质谱联用技术,结合代谢组学的方法,通过检测不同动物类中药脂质成分,比较不同动物类中药的化学成分差异,探讨物质组成及分布情况,从而分析不同动物类中药的异同.结果:共鉴定出1050种脂质化合物成分,不同动物类中药...     

乳腺癌患者血浆和尿液的1H-NMR代谢组学

 为探讨乳腺癌患者血浆、尿液代谢组学变化,建立早期诊断的代谢标志物体系。选取乳腺癌患者45例,健康对照30例,获得血浆1H-NMR谱图,对所得自由衰减信号进行分段积分、数据归一化后用正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）进行模式识别。与健康人群相比,乳腺癌患者血浆中多种氨基酸含量下降,包括亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、丙氨酸、组氨酸、甘氨酸、脂类（LDL）、β-葡萄糖、乳酸、胆碱、肉碱、肌醇显著减少,差异具有统计学意义（P<0.05）;血浆糖蛋白、丙二酸、乙酰乙酸、β-羟丁酸、丙酮显著增多,差异具有统计学意义（P<0.05）。与健康人相比,乳腺癌患者尿液中异亮氨酸、缬氨酸、谷氨酸、组氨酸、二甲胺、马尿酸、甜菜碱、牛磺酸、琥珀酸、柠檬酸、肌酸、肌酸酐减少,差异具有统计学意义（P<0.05）;乳酸增多,差异具有统计学意义（P<0.05）。通过乳腺癌患者的代谢组学的变化,建立可以用于乳腺癌早期诊断的血浆、尿液代谢标志物体系。     

基于ICP-MS的高脂血症潜在元素标志物研究

为研究高脂血症模型大鼠毛发中无机元素的含量变化,基于毛发样品筛选高脂血症疾病诊断的潜在元素标志物.采用高脂乳剂灌胃的方式建立高脂血症大鼠模型,取健康对照组与高脂血症模型组大鼠背部毛发进行微波消解,采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)建立毛发无机元素表达谱,分析模型组与对照组差异.对毛发中75种无机元素的相对含量进行检测,通过主成分分析(PCA)获得得分图和载荷图,筛选差异元素,并使用SPSS统计软件对差异元素进行独立样本t检验.结果显示,对照组与模型组毛发无机元素表达谱存在一定差异,PCA得分图中两组聚类明显,具有生物学功能的差异元素有Mg、Al、Cr、Cu、Zn等,毛发中上述元素相对含量在模型组中显著升高(P<0.001).基于ICP-MS技术从毛发中发现了高脂血症的潜在元素标志物,为深入研究高脂血症疾病机制及其临床诊断提供了新的研究思路和科学依据.     

基于气质联用代谢组学技术的玉屏风散抗疲劳作用研究

玉屏风散为古代经典名方,临床用于小儿慢性咳嗽、慢性肾炎等治疗,具抗炎、抗氧化活性、抗疲劳作用。应用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometer, GC-MS)代谢组学方法考察玉屏风散对小鼠负重力竭游泳模型的抗疲劳作用及机制解释。将小鼠随机分为5组(正常组、模型组、玉屏风散低、中、高3个剂量实验组),每组6只。连续灌胃14 d,采用GC-MS技术分析各组小鼠血清中代谢物,进行多元统计分析获取差异性代谢物信息,构建代谢通路对抗疲劳作用进行解释。结果表明：玉屏风散高剂量组的小鼠负重力竭游泳时间显著长于模型组;给药组小鼠代谢轮廓趋近于正常组,表现一定抗疲劳作用。确定了血清中18种差异代谢物与负重力竭游泳模型有关,涉及的3条主要代谢通路为：亚油酸代谢,甘油代谢以及磷酸肌醇代谢。推测玉屏风散可能通过调节脂质代谢对负重力竭游泳模型小鼠发挥抗疲劳作用。     

代谢足迹技术及在代谢组学中的应用

系统地介绍了一种用于分析生物细胞和组织特异性的新战略——代谢足迹技术以及它在酵母细胞和人体组织中代谢分析的应用．代谢足迹技术是利用直接注射质谱方法,在分析系统中以培养基为介质,监控细胞从生长培养基中消耗营养物以及分泌代谢物至培养基的全部过程．也就是说。这是一种用高通量方法检测由细胞和组织分泌的代谢产物或从环境中吸收代谢物的定性和半定量的通用分析方法．     

基于气质联用技术的猴头菇多糖抗疲劳代谢组学

猴头菇为珍贵的药食两用大型真菌,有抗炎、抗肿瘤、增加免疫力等功效。应用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometer, GC-MS)代谢组学方法考察猴头菇多糖对大鼠负重力竭游泳模型的抗疲劳作用及作用机制。将大鼠随机分为6组(空白组、模型组、猴头菇多糖低、中、高3个剂量实验组、阳性对照组),每组6只,连续灌胃21 d;通过测量各组大鼠体重、比较大鼠力竭游泳时间、分析大鼠血清5-HT含量、比较大鼠外周血血象及胸脾指数等实验指标来评估猴头菇多糖对大鼠疲劳的缓解程度;采用GC-MS技术分析各组大鼠血清中代谢物,并进行多元统计分析获取差异性代谢物信息,构建代谢通路并阐述抗疲劳作用机制。结果表明：猴头菇多糖高剂量组的大鼠负重力竭游泳时间显著长于模型组;猴头菇多糖低、中、高剂量组大鼠代谢轮廓趋近于空白组,表现出一定抗疲劳作用。获得了24个差异性代谢物与负重力竭游泳模型有关,涉及的3条主要代谢通路为：亚油酸代谢、甘油代谢及苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸合成。推测猴头菇多糖可能通过调节脂质代谢以及氨基酸代谢对负重力竭游泳模型大鼠发挥抗疲劳作用。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中莪术醇的浓度

建立了一个快速、 准确、 灵敏的液相色谱 串联质谱测定鼠血浆中莪术醇的分析方法. 血浆样品经乙腈沉淀蛋白后, 以甲醇-乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液（体积比： 42.5 ∶42.5 ∶15）为流动相, 采用反相色谱柱Nucleosil C¹⁸分离, 通过电喷雾离子化源的四极杆串联质谱仪, 以多反应监测方式检测. 线性范围为2.5~500.0 μg／L, 日间和日内精密度< 4.79%,平均提取回收率为100.7%.     

液相色谱—串联质谱法测定中华绒螯蟹中21种磺胺类药物残留

建立了一种液相色谱-电喷雾串联质谱同时测定中华绒螯蟹中21种磺胺类药物残留的方法.均质样品先后用乙腈、二氯甲烷提取,合并提取液,取部分提取液经氮吹浓缩.残渣用1 mL流动相溶解,饱和正己烷脱脂净化.采用ZOR-BAX Eclipse XDB-C8色谱柱,以含0.2%乙酸的水溶液和甲醇(7:3)为流动相,梯度洗脱,在电喷雾-多反应监测离子模式下,进行定量定性分析.方法的定量限为5μg/kg;以标准加入法计算回收率,在4～40μg/kg添加范围内,平均回收率为71.8%～106%;相对标准偏差为0.44%～10.1%.     

HPLC-MS/MS法同时测定华山参滴丸中阿托品、山莨菪碱和东莨菪碱的含量

华山参滴丸是含有托烷类生物碱的中药制剂,主要用于治疗哮喘,具有很好的临床疗效,但缺乏较有效的定量方法控制其质量.建立了一种快速、简单、准确的HPLC-MS/MS法同时测定华山参滴丸中阿托品、山莨菪碱和东莨菪碱的含量.首先采用超声的方法对滴丸进行提取来制备样品溶液,然后采用C18色谱柱对样品进行分离.流动相为20 mmol/L醋酸铵水溶液:甲醇(70:30);流速为0.3 mL/min.质谱检测器采用电喷雾正离子模式的多重反应监测方式进行测定,整个分析时间仅耗时1.5 rain.阿托品和山莨菪碱在250～4 000 ng/mL范围内、东莨菪碱在62.5～1 000 ng/mL范围内均呈良好的线性关系(r2＞0.999).三种成分的日内和日间精密度均小于3.0;平均回收率均大于98%.此方法快速、可靠、重现性好,适用于华山参滴丸的日常质量控制.     

液-质联用测定鱼体内甲基磺草酮的残留量

为了检测鱼体内甲基磺草酮的残留量,建立液相色谱串联质谱的方法测定甲基磺草酮。结果表明:在0.5~100μg/L浓度范围内,线性相关系数(r)为0.998 6。当添加质量分数为0.1~10μg/g时,甲基磺草酮在鱼体内的平均回收率为80.0%~99.3%,RSD为3.4%~8.4%。该方法的最小检出量为5.0×10-12g,鱼体内的最低检测质量分数(LOQ)为0.1μg/g。该方法操作简单可靠,准确度、精密度及其灵敏度均满足农药残留分析的要求,可用于鱼体内甲基磺草酮残留量的测定。     

Probing the Proteolysis of Melitin Using Liquid Secondary Ion Mass Spectrometry

ＰｒｏｂｉｎｇｔｈｅＰｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓｏｆＭｅｌｉｔｉｎＵｓｉｎｇＬｉｑｕｉｄＳｅｃｏｎｄａｒｙＩｏｎＭａｓｓＳｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ＊ＷｕＹｉ＋（武轶），ＷａｎｇＪｉｎｇｚｕｎ（王敬尊），ＳｕｉＳｅｎｆａｎｇ＋（隋森芳）＊＋Ｄｅｐａｒｔｍｅ...     

直接进样超高效液相色谱-串联质谱法测定水中五氯酚

利用超高效液相色谱-串联质谱,建立了水中五氯酚的定量分析方法.该方法不需要浓缩,样品经0.45μm微孔滤膜过滤后,直接进样超高效液相色谱-串联质谱分析.目标物的回收率为78%~110%,在1.0~200μg/L范围内,有很好的线性相关性,方法的检出限为0.01μg/L.结果表明该方法具有灵敏度高,操作简单、快速的优点.     

超高效液相色谱-三重四级杆质谱法测定地表水中丙烯酰胺

采用旋转蒸发浓缩-超高效液相色谱-三重四级杆质谱法测定水中丙烯酰胺,选择V(甲醇)∶V(水)=5∶95为流动相,该方法有机溶剂使用量少,操作简便.20倍浓缩后,水样中丙烯酰胺的检出限为0.000 05 mg/L,实际水样的加标回收率为87%~111%,方法的相对标准偏差小于7%.该方法能满足《地表水环境质量标准》中相关标准限值要求.     

HPLC-MS/MS法测定液态奶中三聚氰胺的含量

建立HPLC-MS/MS法测定液态奶中三聚氰胺的含量,按国家限量标准,比较其是否合格.样品经乙腈-水（5∶5）,0.6mol/LHCl提取后,用二氯甲烷-丙醇（2∶1）反提取,采用ODS-C18（5μm,150mm&#215;2.0mm）柱,20%乙腈-水（含0.5mmol/LNH4AC）为流动相,用串联四极杆质谱在选择性反应监测（SRM）模式下检测.三聚氰胺在0.02480～4.960μg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数r为0.9982;方法高、中、低3个浓度的精密度（RSD）为4.21%～8.92%,准确度为96.2%～107.2%.方法的加样提取回收率为73.76%～77.99%,定量限为0.02480μg/mL.该方法特异性好、灵敏度高、简便、经济,适合液态奶中三聚氰胺的快速检测.     

液相色谱-串联质谱法同时测定食品中9种甜味剂

建立了高效液相色谱-串联质谱法同时测定食品中9种甜味剂(安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、阿力甜、甜菊糖苷、爱德万甜和纽甜)含量的分析方法。样品经超声、离心等前处理后过0.22μm滤膜后上机分析。采用AQ-C18(100mm×2.1mm×3μm)为分离柱,c(乙酸铵)为20mmol/L的水溶液-φ(甲酸)为0.1%的乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,在ESI负离子模式下,采用多反应监测模式进行测定,以质量数和保留时间定性、峰面积定量。结果表明,9种甜味剂在工作曲线范围内相关系数均大于0.9990,方法检出限在0.020~0.055mg/kg,食品加标回收率为90.6%~111.5%,其相对标准偏差(n=6)均小于6.0%。应用此方法对食品(白酒、饮料、果冻、酸奶、糖果)中9种甜味剂进行检测,前处理步骤简单,测定快速、准确度和灵敏度高,能满足国家标准对食品中9种甜味剂的分析要求,与国家标准方法相比,提高了分析效率。     

车前草中一种黄酮化合物的电喷雾多级串联质谱研究

利用电喷雾多级串联质谱技术研究了车前草药材中的一种黄酮化合物,根据其在负离子条件下表现出的特征质谱行为,提出了该化合物可能的电喷雾质谱碎裂规律.