电喷雾质谱技术研究反应条件对三种含硫氨基酸自组装成肽的影响

研究了三氯氧磷辅助下3种含硫氨基酸的自组装成肽反应,利用电喷雾质谱技术,考察了反应时间、温度和溶剂对3种含硫氨基酸成肽反应的影响,比较了三氯氧磷辅助下3种含硫氨基酸成肽的反应活性.可为寡肽的合成提供一种新的方法.     

五氯化磷辅助下氨基酸的自组装成肽反应研究

L-α-氨基酸和D-α-氨基酸可与五氯化磷直接发生磷酰化反应，随后自组装成多肽，但β-氨基酸不能成肽，DL-α-氨基酸成肽困难；在SOCl2存在下，α-氨基酸也不能成肽，用电喷雾质谱研究了氨基酸的自组装反应，反应过程中有五元环状的氨基酸五配位磷中间体生成，使用硅烷基保护的氨基酸，在^31PNMR中可观察到五配位磷中间体。     

五氯化磷辅助下氨基酸的自组装成肽反应研究

L-α-氨基酸和D-α-氨基酸可与五氯化磷直接发生磷酰化反应，随后自组装成多肽，但β-氨基酸不能成肽，DL-α-氨基酸成肽困难；在SOCl2存在下，α-氨基酸也不能成肽，用电喷雾质谱研究了氨基酸的自组装反应，反应过程中有五元环状的氨基酸五配位磷中间体生成，使用硅烷基保护的氨基酸，在^31PNMR中可观察到五配位磷中间体。     

L-羟脯氨酸寡肽混合物的高效液相色谱分离与质谱分析

研究了三氯氧磷辅助下L-羟脯氨酸的成肽反应,建立了采用反相高效液相色谱-质谱/质谱联用技术分离鉴定羟脯氨酸寡肽混合物的方法,优化了L-羟脯氨酸寡肽混合物的色谱分离条件。实验以YWG C8柱(10 μm,250 mm×10 mm)为分离柱,以乙腈-0.06%三氟乙酸水溶液(体积比为2∶98)为流动相进行等度洗脱,在正离子模式下对洗脱物进行了电喷雾电离串联质谱鉴定。结果显示,分离出的各组分分别为L-羟脯氨酸二肽、L-羟脯氨酸环二肽和L-羟脯氨酸三肽。     

不同类型无机磷试剂辅助下苯丙氨酸自组装成肽反应的研究

该文以三氯化磷(PCl3)、三氯氧磷(POCl3)和环三聚磷酸(P3M)为辅助试剂,进行了苯丙氨酸(Phe)自组装成肽反应的研究,利用液相色谱-质谱联用以及电喷雾多级质谱技术对反应体系组分进行了分析和结构鉴定。考察了不同缩合试剂和反应时间对苯丙氨酸成肽反应的影响,并初步探讨了无机磷试剂辅助下芳香侧链氨基酸的成肽机理。反应中有Phe系列寡肽生成,同时也有少量环肽存在。该研究可为寡肽的合成工艺开发提供参考,同时对于研究生命起源中的前生命化学物质有着重要的理论意义和学术价值。     

离子液体-微乳液协同增敏荧光猝灭法测定L-色氨酸的研究

L-色氨酸是重要的氨基酸,是人体和动物生命活动中必需的氨基酸之一~([1,2]).研究以离子液体/TritonX-100-M作为共同的介质,协同增敏荧光光谱法分析L-色氨酸的新方法.在离子液体/TritonX-100-M介质中,探针体系苯基荧光酮-Se(Ⅳ)与L-色氨酸形成络合物,改变原有体系荧光强度,其荧光猝灭程度与L-色氨酸的量存在线性关系,据此建立了分析L-色氨酸方法.     

微波作用下"氨基酸-磷酸盐"的成肽反应--生命起源的最可能途径的探索

研究了氨基酸与磷酸二氢钠在微波作用下的成肽反应, 结果显示在较短时间里可获得二肽到八肽以及环肽.同时伴有磷酸氢盐分子间缩合形成多聚磷酸盐的反应.在微波作用下, 温度200℃反应2 h后磷酸盐的聚合度可达到99%(其中焦磷酸盐64%, 三偏磷酸盐35%).在反应产物的ESI-MS中还检测到了磷酸盐与甘氨酸分子间脱水生成的混酐中间体.三偏磷酸盐与氨基酸在水体系中也有成肽反应, 在室温下缬氨酸成肽的转化率达到46%.发现并证实了在微波作用下"氨基酸-磷酸盐"的体系中可以实现氨基酸生成肽及磷酸盐聚合、再生、利用的循环过程, 在这个过程中只需要输入能量就可以源源不断的生成肽, 这也许是生命起源以前的化学进化中氨基酸成肽的最可能途径.     

微波作用下“氨基酸-磷酸盐”的成肽反应

研究了氨基酸与磷酸二氢钠在微波作用下的成肽反应, 结果显示在较短时间里可获得二肽到八肽以及环肽. 同时伴有磷酸氢盐分子间缩合形成多聚磷酸盐的反应. 在微波作用下, 温度200℃反应2 h后磷酸盐的聚合度可达到99%(其中焦磷酸盐64%, 三偏磷酸盐35%). 在反应产物的ESI-MS中还检测到了磷酸盐与甘氨酸分子间脱水生成的混酐中间体. 三偏磷酸盐与氨基酸在水体系中也有成肽反应, 在室温下缬氨酸成肽的转化率达到46%. 发现并证实了在微波作用下“氨基酸-磷酸盐”的体系中可以实现氨基酸生成肽及磷酸盐聚合、再生、利用的循环过程, 在这个过程中只需要输入能量就可以源源不断的生成肽, 这也许是生命起源以前的化学进化中氨基酸成肽的最可能途径.     

水/有机溶剂双相体系中色氨酸合成酶酶法合成L-色氨酸

在水/有机溶剂双相体系中,利用重组大肠杆菌DM206 [pET28a-trpBA/BL21 (DE3)]色氨酸合成酶催化L-丝氨酸和吲哚合成了L-色氨酸.考察了有机溶剂、有机相乙酸乙酯体积分数、反应温度、水相pH、底物L-丝氨酸与吲哚摩尔比、底物L-丝氨酸浓度、表面活性剂和酶添加量对色氨酸合成酶酶活的影响.结果表明,酶...     

紫外分光光度法快速测定发酵液中的L-色氨酸

建立了一种紫外分光度法测定发酵液中L-色氨酸的方法。L-色氨酸和甲酸在HCl介质中生成蓝紫色化合物,该化合物最大吸光度为364 nm,L-色氨酸测定范围为0~2.5mg/mL,工作曲线为Y=0.382X+0.0278,R2=0.9999,其它氨基酸均不干扰L-色氨酸的测定。该方法与氨基酸分析仪测定结果一致,测定改造色氨酸合成酶酶促合成的L-色氨酸浓度达到46mg/mL。     

三氯化磷辅助下缬氨酸自组装成肽反应的ESI-MS研究

多肽是形成生命体的基本物质之一,其合成一直是生物有机化学研究的热点.我们曾报导,在五氯化磷辅助下α-氨基酸可以自组装成多肽1,2].为了对α-氨基酸的自组装成肽反应进行控制,获得具有生物活性的目标多肽,本文通过电喷雾质谱(ESI-MS)跟踪,研究了三氯化磷辅助下缬氨酸的成肽反应,考察了时间、温度、溶剂等对成肽反应的影响.     

溴取代紫外分光光度法同时测定痕量色氨酸和酪氨酸

研究了在水和乙醇溶液中Br2与色氨酸和酪氨酸发生的取代反应,利用测定反应前后Br2与KI反应生成I2的量,建立了不经分离同时测定色氨酸、酪氨酸的新方法。用I2在水和乙醇水溶液中对紫外光的吸收不同和加和原理,建立联立方程并分别求得各自的含量。方法测定色氨酸和酪氨酸的线性范围分别为0.0～0.90mg·L-1和0.0～1.00mg·L-1,表观摩尔吸光系数(ε)在水溶液中分别为1.65×105、1.71×105 L.mol-1.cm-1;在乙醇水溶液中分别为2.31×105、2.05×105 L.mol-1.cm-1。用该法对复合氨基酸溶液和鸡蛋清中色氨酸和酪氨酸进行测定,相对标准偏差分别为1.8%、1.2%,回收率为96.0%～104.3%。     

氨基酸聚合物作为高效液相色谱手性固定相的研究

将L-丙氨酸、L-缬氨酸、L-色氨酸、L-苯甘氨酸和L-苯丙氨酸5种氨基酸的手性单体与甲基丙烯酸-3-(三甲氧基硅基)丙酯共聚到硅胶表面制备了5种氨基酸聚合物手性固定相,并用作高效液相色谱手性固定相。考察了它们的手性识别能力,L-丙氨酸、L-缬氨酸和L-色氨酸聚合物手性固定相具有较好的手性拆分效果,并且它们之间的手性识别能力还具有一定的互补性。     

氨基酸基咪唑离子液体氧化萃取脱硫研究

通过离子交换法制备以天冬氨酸(Asp)、组氨酸(His)、甘氨酸(Gly)、色氨酸(Try)为阴离子的氨基酸咪唑离子液体,与H_2O_2协同深度去除模拟汽油中的二苯并噻吩(DBT)。对合成的氨基酸咪唑离子液体进行了FT-IR、1H NMR表征,并优化氧化脱硫工艺条件。结果表明,与以组氨酸、甘氨酸和色氨酸作为离子液体的阴离子相比,天冬氨酸作为阴离子时,离子液体与H_2O_2体系的催化萃取脱硫效果最好。通过对反应温度、H_2O_2/模拟油体积比和反应时间的工艺优化,探讨了[C_8mim]Asp和H_2O_2催化萃取脱硫的效果,最优工艺条件下,脱硫率可达96.5%。[C_8mim]Asp离子液体再生循环7次后脱硫率仍能保持在93.7%。对[C_8mim]Asp和H_2O_2协同催化脱硫机理的研究发现,[C_8mim]Asp的羧基与双氧水反应成过氧化羧基,将二苯并噻吩氧化成为二苯并噻吩砜,从而达到脱硫的目的。     

产物可用电喷雾质谱检测的氨基酸/肽季铵化新方法

氨基酸和肽中氨基的化学修饰反应,如乙酰化反应和烷基化反应已被广泛用于蛋白组学研究中蛋白质的定量分析．氨基酸和肽的季铵化产物具有独特的优点,在电喷雾质谱中具有很好的离子化效率,可大大提高检测的灵敏度．文献[6～8]报道的氨基酸和肽的季铵化方法均使用高浓度的盐(如KHCO3),严重影响了质谱的检测结果,难以直接用于蛋白质组学研究．     

天花粉蛋白中色氨酸肽键的化学降解研究

用BNPS-Skatole试剂,对琥珀酰化天花粉蛋白的胰白酶酶解肽片段TIG2进行了色氨酸肽键的化学降解。分离纯化了降解反应所生成的肽片段,并测定了新产生的N-端肽片段的氨基酸排列顺序。     

三氯氧磷辅助下缬氨酸的自组装成肽反应

多肽多数具有较强的生物活性,可作为药物或药物前体.关于多肽的合成,目前主要有固相合成法、酶促合成法和经典的氨基酸保护合成法.我们发现,在无机磷试剂辅助下α-氨基酸可发生自组装成肽反应,得到一系列多肽产物[1,2].     

表面等离子体共振技术用于蛋白对氨基酸手性识别的动力学研究

利用SPR技术,以牛血清白蛋白和溶菌酶为探针构筑手性识别传感膜,开展了对L-和D-苯丙氨酸以及L-和D-色氨酸手性识别的动力学研究。实验结果表明,两种蛋白在与每种氨基酸分子的L-和D-型异构体相互作用过程都存在明显的动力学差异。动力学数据进一步显示两种蛋白与每种氨基酸L-型异构体的亲和力均大于D-型。     

氨基酸和肽从水到多羟基化合物溶液的迁移焓研究

采用RD-496Ⅱ型精密微量热量计分别测定了甘氨酸、L-丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、甘氨酰甘氨酸和甘氨酰甘氨酰甘氨酸在纯水以及不同浓度甘露醇、山梨醇和肌醇水溶液中的溶解焓, 计算了这些氨基酸和肽从水到3种多元醇溶液中的迁移焓. 实验发现, 氨基酸和肽从水到多元醇溶液中的迁移焓均为负值, 且随多元醇浓度的增加而减小. 根据共球交盖模型分析了水溶液中氨基酸和肽分子与多元醇分子间的相互作用.     

磷酰化氨基酸反应性质的理论研究

采用量子化学计算研究了磷酰化氨基酸的反应性质,包括N-磷酰氨基酸成肽反应、成酯反应、磷上酯交换反应和磷上的N→O迁移反应的机理以及计算模型和计算方法的选择,并从理论上解释了自然界选择α-氨基酸而不是β,γ-氨基酸的实验事实.