HPLC法同时测定淫羊藿中朝藿定A、B、C与淫羊藿苷的含量

建立了同时测定淫羊藿中朝藿定A、B、C与淫羊藿苷含量的高效液相色谱方法。淫羊藿样品经超声波提取,以50%(φ)乙醇溶液为溶剂,在温度50℃、料液比1∶60条件下超声波提取30 m in,共提取2次。色谱条件:ZORBAX SB-C8色谱柱(5μm,4.6×250 mm);流动相A为乙腈,B为1%乙酸溶液;梯度洗脱;紫外检测波长为270 nm。上述4种类黄酮的标准曲线在6.6~33.0 mg/L(朝藿定A、淫羊藿苷)或6.6~55.0mg/L(朝藿定B、C)范围内呈良好的线性关系(r>0.99);加标回收率在97%~102%之间;相对标准偏差小于2%(n=5)。测得不同产地心叶淫羊藿叶片中4种类黄酮的质量分数差异较大;朝藿定A广泛分布于淫羊藿属中。本方法在淫羊藿药材质量控制中具有一定的参考价值。     

超高效液相色谱法分析淡豆豉配方颗粒中3种异黄酮

建立超高效液相色谱法同时测定淡豆豉配方颗粒中3种异黄酮(大豆苷元、黄豆黄素、染料木素)的含量。选择Eclipse Plus C₁₈ RRHD色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)，流动相为乙腈-0.1%乙酸溶液，梯度洗脱，流量为0.3mL/min，柱温为30℃，检测波长为260 nm。大豆苷元、黄豆黄素、染料木素的质量浓度分别在18.41～184.14、0.48～4.82、30.65～306.46μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.999 9)。样品测定结果的相对标准偏差分别为1.80%、2.20%、1.71%(n=6)，平均加标回收率分别为96.49%、100.93%、98.53%。该方法快速，准确、可靠，可为淡豆豉配方颗粒的质量控制提供参考。     

离子对色谱法测定万乳康注射液中淫羊藿苷和盐酸左旋咪唑含量

建立了反相离子对色谱法同时测定万乳康样品中淫羊藿苷和盐酸左旋咪唑的含量。本法使用Shim-pack VP-ODS色谱柱(250×4.6 mm,5μm),该流动相为65%甲醇(V/V),10.0 mmol/L的十二烷基磺酸钠,pH=3.0;等度洗脱样品中的淫羊藿苷和盐酸左旋咪唑。紫外检测波长270 nm。结果表明:淫羊藿苷测定的线性范围为2.73~54.58μg/mL,加标回收率为99.45%~100.69%,理论塔板数达6 641;盐酸左旋咪唑测定的线性范围为26.23~524.54μg/mL,加标回收率为99.58%~100.23%,理论塔板数5 564。该方法可用于淫羊藿提取物和万乳康样品中的淫羊藿苷和盐酸左旋咪唑的测定。     

工业制备高效液相色谱法制备淫羊藿中的黄酮系列对照品

淫羊藿甙和朝藿定A、B、C是淫羊藿中重要的活性成分,本研究应用工业制备高效液相色谱从淫羊藿粗提物中分离制备了这4个成分。淫羊藿粗提物经大孔吸附树脂粗分离获得相应的组分后,利用工业制备高效液相色谱完成精制纯化。采用自装填Chromatorex C18制备柱(220 mm×77 mm, 10 μm),乙腈-水(26:74或30:70, v/v)为流动相进行洗脱,在35 min内,实现了这4种成分的基线分离及规模制备。从300 g粗提物(总黄酮含量约20%)中获得淫羊藿甙33 g、朝藿定C 4.6 g、朝藿定B 3.7 g和朝藿定A 0.6 g,产品纯度均达到98%以上。此方法通过两步分离即可实现这4种成分的完全分离,具有快速高效、产品纯度高的特点,适于淫羊藿中淫羊藿甙、朝藿定A、B、C系列对照品的规模制备。     

高效液相色谱法同时测定葛枳胶囊中5种有效成分的含量

提出了高效液相色谱法同时测定葛枳胶囊中5种有效成分(葛根素、大豆苷、甘草苷、大豆苷元和甘草酸)的含量。样品经甲醇-水(50+50)溶液超声提取30min,采用Diamonsil C18色谱柱(200mm×4.6mm,5μm)为分离柱,以不同体积比混合的乙腈和磷酸(0.1+99.9)混合液为流动相进行梯度洗脱,甘草苷的检测波长为276nm,其余4种成分均为250nm。5种有效成分分别在一定的质量浓度范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)在0.050～0.338mg·L-1之间。方法的回收率在97.1%～104%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.0%～2.7%之间。     

高效液相色谱法同时测定复方南板蓝根片中秦皮乙素和菊苣酸

建立高效液相色谱同时测定复方南板蓝根片中秦皮乙素和菊苣酸含量的方法。采用XBridge C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离，流动相为乙腈-0.3%磷酸溶液，梯度洗脱，流量为1 mL/min，检测波长为330 nm，柱温为40℃，进样体积为10μL，以色谱峰面积外标法定量。秦皮乙素和菊苣酸的质量浓度分别在18.40～184.02、4.96～49.61 g/mL范围内与色谱峰面积的线性关系良好，相关系数均为0.999 9。秦皮乙素、菊苣酸测定结果的相对标准偏差分别为0.72%、0.54%(n=6)，平均回收率分别为97.40%、98.45%。该方法操作简单，重复性好，准确度高。     

高效液相色谱法同时测定罗汉果中的六种葫芦烷三萜类皂苷

建立了高效液相色谱测定罗汉果中罗汉果苷Ⅴ、罗汉果苷ⅣA、罗汉果苷Ⅲ、11-氧化罗汉果苷Ⅲ、罗汉果苷ⅡE和11-氧化罗汉果苷ⅡE等6种苷类化合物含量的方法。采用的色谱条件：ZORBAX SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm);柱温30 ℃;以水(A相)和乙腈(B相)为流动相,梯度洗脱程序：0～3 min,20%B～30%B;3～8 min,30%B～35%B;8～9 min,35%B;流速0.8 mL/min;检测波长203 nm;进样量10 μL。结果表明,以上6种苷类化合物分别在0.04～1.0 mg/mL、0.011～0.68 mg/mL、0.010～0.80 mg/mL、0.0097～0.58 mg/mL、0.025～1.0 mg/mL、0.013～0.76 mg/mL范围内线性关系良好(r＞0.9991)。加标回收率依次为99.65%,101.6%,97.05%,103.1%,99.25%和103.0%;相对标准偏差分别为0.83%,3.1%,1.9%,3.3%,0.59%和2.0%。该方法简便、快速、准确,适用于罗汉果原材料及其制品中苷类化合物的检测和含量测定。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定葛根中葛根素和大豆苷元

提出了高效液相色谱-串联质谱法测定葛根中葛根素和大豆苷元的含量。样品经乙醇提取,所得提取液用乙醇定容至100mL后经Waters Xterra MS C18色谱柱(150mm×3.9mm,5μm)分离,用乙腈与50mmol.L-1甲酸溶液(40+60)的混合液洗脱,采用电喷雾正离子电离多反应监测模式。葛根素和大豆苷元的质量浓度分别在0.050～0.50mg.L-1和5.0～50mg.L-1之间与峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)均为5μg.L-1。在0.1,1.0,10.0mg.L-1 3个浓度水平进行加标回收试验,葛根素和大豆苷元的回收率分别为96.6%和97.4%。     

HPLC法测定红景天除鞣质后红景天苷含量的变化

建立测定红景天溶液除鞣质前后红景天苷含量变化的HPLC法。采用Thermo-C18(4.6 mm×200 mm,5μm)为色谱柱,V(甲醇)∶V(水)=15∶85为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长275 nm,柱温25℃。红景天苷的线性范围为1.16~5.8μg;平均回收率分别为100.16%(RSD=0.62%)。所建立的HPLC法可用于测定红景天中红景天苷的含量。     

高效液相色谱法测定马来酸麦角新碱注射液中甲硫氨酸

建立高效液相色谱法测定马来酸麦角新碱注射液中甲硫氨酸含量的方法。采用Venusil HILIC色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5μm），以5 mmol/L磷酸氢二钾溶液（用磷酸调节pH值至6.9）-乙腈（体积比为20∶80）为流动相，流量为1.0 mL/min，柱温为30℃，检测波长为215 nm。结果表明，甲硫氨酸质量浓度在20～400μg/mL范围内与色谱峰面积的线性关系良好，相关系数为0.999 9，检出限和定量限分别为0.5、1.6μg/mL，平均加标回收率为99.7%，测定结果的相对标准偏差为0.3%(n=6)。该方法适用于测定马来酸麦角新碱注射液中甲硫氨酸的含量。     

HPLC法测定黄芩中8个黄酮类成分的含量

建立了测定黄芩中野黄芩苷、黄芩苷、野黄芩素、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A的高效液相色谱法(HPLC)。其色谱条件为色谱柱Agilent Zorbax Eclipse SB-AQ-C18(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为0.1%磷酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长280 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。野黄芩苷、黄芩苷、野黄芩素、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A的量分别在0.19～2.09μg、0.23～2.53μg、0.21～2.31μg、0.21～2.31μg、0.20～2.20μg、0.22～2.42μg、0.18～1.98μg、0.19～2.09μg范围内与色谱峰峰面积有良好的线性关系,相关系数r²为0.999～1.000,平均加样回收率为99.066%～100.433%,RSD为0.619%～1.763%。该实验方法简便,得到的结果准确性高、可靠性高,可用于黄芩中黄酮类成分的含量测定,同时也可为黄芩的质量评价和控制提供参考。     

高效液相色谱双波长切换法测定石韦配方颗粒中8种有效成分

建立高效液相色谱双波长切换法同时测定石韦配方颗粒中原儿茶酸、咖啡酸、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C 8种成分含量。采用Waters Atlantis T3-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%(体积分数)磷酸溶液作为流动相梯度洗脱,流量为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为260 nm和330nm,进样体积为10μL。8种成分在各自质量浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均为0.999 9,方法检出限为16.45～89.15μg/L,加标平均回收率为95.76%～99.86%,测定结果的相对标准偏差为0.07%～0.44%(n=6)。该方法操作简单、高效,能同时检测石韦配方颗粒中8种成分的含量,可用于石韦配方颗粒样品中的含量测定及产品质量监控。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定黄芩提取物中4种黄酮类成分

黄芩提取物样品中加入水,经甲醇超声提取2次,离心后,合并上清液,用水定容至50.0mL,过0.22μm微孔滤膜,采用超高效液相色谱-串联质谱法同时测定滤液中黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷、野黄芩苷等4种黄酮类成分的含量。以ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱为固定相,以不同体积比的0.01%(质量分数)氨水和乙腈的混合液为流动相进行梯度洗脱,串联质谱分析中采用电喷雾离子源负离子模式(ESI-)和多反应监测模式。4种黄酮类成分的质量浓度在5.0～500.0μg·L~(-1)内与其对应的质谱响应值呈线性关系,检出限(3S/N)为0.3～1.5μg·kg~(-1),测定下限(10S/N)为1.0～5.0μg·kg~(-1)。以空白黄芩提取物样品为基体进行加标回收试验,所得回收率为91.1%～99.1%,测定值的相对标准偏差(n=6)为2.0%～4.1%。     

超高效液相色谱法测定绿茶中5种儿茶素

建立了绿茶中儿茶素、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素和表没食子儿茶素没食子酸酯含量的超高效液相色谱紫外检测方法。样品采用70℃甲醇-水溶液热水浴下提取。色谱柱为Waters Acquity-BEH C18柱(1.7μm,50 mm×2.5 mm);流动相为乙腈和0.1%甲酸,采用梯度洗脱,乙腈洗脱浓度和时间为:9%(0 min)-9%(4 min)-12%(6 min)-25%(8 min)-9%(9 min)-9%(9.5 min);流速0.25 mL/min;柱温30℃;进样量10μL;检测时间9.5 min;二极管阵列检测器;检测波长278 nm。实验结果表明,在该色谱条件下,5种儿茶素能达到较好的基线分离效果,样品回收率在95.0%～105.0%之间,相对标准偏差(RSD)为1.7%～3.0%(n=5)。     

高效液相色谱法测定化妆品原料中N-乙酰神经氨酸

建立高效液相色谱法测定化妆品原料中N-乙酰神经氨酸含量的方法。以体积分数为50%的乙酸溶液为水解溶剂,样品于80℃水浴中加热30 min,以CAPCELL PAK SCX柱（250 mm×4.6 mm,5μm）为分析柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（体积比为80∶20）,等度洗脱,流量为1.0 mL/min,柱温为35℃,采用高效液相色谱二极管阵列检测器测定,以色谱峰面积外标法定量。检测波长为205 nm,进样体积为10μL。N-乙酰神经氨酸的色谱峰面积与质量浓度在10.0～500.0μg/ml范围内线性关系良好,相关系数为0.999 9,方法检出限为0.12μg/mL,定量限为0.4μg/mL。样品加标平均回收率为97.7%～98.9%,测定结果的相对标准偏差为0.37%～1.36%(n=6)。该方法样品处理简便、高效,适用于化妆品原料中N-乙酰神经氨酸的含量测定。     

仲景胃灵片中芍药苷的含量测定

采用SPE -高效液相色谱法测定仲景胃灵片中芍药苷的含量 ;以甲醇 -水 (体积比30∶70)为流动相 ,IntersilODS(3)柱 (250mm×4.6mm ,5μm)为固定相 ,流速为1mL/min,检测波长为230nm ;芍药苷的测定在11.55～92.40mg/L范围内线性关系良好 ,平均回收率为99.9% ,RSD为1.6% ;方法简单 ,灵敏度高 ,可用于仲景胃灵片中芍药苷的含量测定。     

高效液相色谱法测定2种中药片剂中紫丁香苷的含量

建立了测定2种中药制剂灭澳灵片和活络消痛片中紫丁香苷含量的高效液相色谱方法.采用KromasilC18反相色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),以乙腈-1%冰醋酸溶液(体积比10∶90)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长265 nm,在15 min内完成分离检测.紫丁香苷在0.16~100μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),最低检出限0.1μg/mL(S/N=3).灭澳灵片的加样回收率为92.2%~97.6%,活络消痛片的加样回收率为94.0%~102.6%.     

固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定水中13种苯胺类化合物

建立了固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定水中13种苯胺类化合物。样品通过HC-C₁₈固相萃取小柱富集，洗脱后加入内标苯胺-D5进行氮吹浓缩，经HSS T3色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.8μm)分离，采用多反应监测扫描模式，以内标法定量。13种苯胺类化合物在0.1～100μg/L(其中3-硝基苯胺为0.2～200μg/L)范围内与特征离子的色谱峰面积线性关系良好，相关系数均大于0.995，方法检出限为0.001～0.006μg/L，平均加标回收率为67.3%～117%，测定结果的相对标准偏差为3.77%～16.9%(n=6)。该法操作简单、稳定性好，能够满足实际水体中13种苯胺类化合物大批量样品分析的需求。     

二极管阵列检测器高效液相色谱法同时测定小柴胡片中10种指标成分

建立二极管阵列检测器高效液相色谱法同时测定小柴胡片中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、党参炔苷、甘草苷、甘草酸和6-姜辣素的含量。该药物粉末在30℃水温用5%浓氨试液的甲醇溶液超声提取液和70%乙醇溶液加热回流提取液的等体积混合液作为样品溶液,分析采用Venusil XBP C₁₈(L)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,在波长210、237、280 nm下进行检测,体积流量为1.0 mL/min,柱温为25℃。10种指标成分在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数均不小于0.999 7,平均加标回收率为91.40%～97.82%,相对标准偏差为0.79%～2.88%(n=6)。该方法可用于小柴胡片的质量控制。     

在线二维柱切换-超高效液相色谱法同时测定明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的含量

建立了二维柱切换-超高效液相色谱法同时测定明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚含量的方法.一维色谱柱为Thermo Accucore XL C18(250mm×2.1 mm,4μm),二维色谱柱为DIONEX Acclaimphenyl-1(150mm ×4.6mm,3μm),一维分析流动相为乙腈-水,梯度洗脱,二维分析流动相为乙腈-水,等度洗脱,14.5 min进行阀切换;检测波长:0～14.5 min为240 nm,14.5～ 30 min为275 nm,流速:0.5 mL/min,柱温:30℃.30 min即可完成明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的含量测定,并有效地将莫诺苷同分异构体分离.莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的线性范围分别为7.6 ～ 377 mg/L,9.2～ 459 mg/L,8.4～419 mg,/L和8.2 ～ 409 mg/L,相关系数为0.9999,加样回收率为98.3％～ 100.2％.本方法快捷高效,可对控制明目地黄丸质量提供参考.