氨基酸对锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的效应

研究Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Phe、Met、Asn、Cys、Ser、Thr、Asp、Glu、His、Lys、Arg等17种氨基酸对锯缘青蟹(Scylla serrata)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.结果表明:非极性氨基酸中Gly、Ala、Leu、Phe对酶活力几乎没有作用,而Val、Ile对酶略有激活,20 mmol/L的Val可以使酶活力提高7.5%,40 mmol/L的Ile可以使酶活力提高10.5%;Pro、Met对该酶略有抑制作用,当浓度为40 mmol/L时,分别可以使酶活力下降15.2%和9.8%;极性氨基酸Asn、Cys、Ser、Thr对酶的活力没有影响;带负电荷的酸性氨基酸Asp和Glu对酶有抑制作用;带正电荷的碱性氨基酸His对该酶略有抑制,Lys和Arg对该酶抑制作用较强.研究Lys和Arg对酶催化pNP-NAG水解反应的抑制机理,并测定其抑制常数,结果表明:Lys和Arg的抑制作用均表现为可逆效应,抑制类型均为反竞争性抑制,其K.分别为5.29mmol/L和3.76 mmol/L.     

丙酮对锯缘青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力与构象的影响

以丙酮为效应物,研究其对锯缘青蟹(Scylla serrata)N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响,结果表明:该酶的剩余活力随着丙酮浓度增大而呈指数下降,当丙酮浓度达25%,酶的剩余活力仅为20%,说明丙酮对青蟹NA-Gase有明显的失活作用.导致酶活力丧失50%的丙酮浓度为7.5%.在较低丙酮浓度(＜10%)的失活是可逆的反应过程.动力学研究表明,该酶的失活过程属于混合型,并进一步测定游离酶(E)和酶底物络合物(ES)与丙酮的结合常数(K1和K1s),分别为4.06%和10.49%,K1＜K1s,说明底物存在对酶被丙酮的失活作用有一定的保护作用.应用荧光发射光谱研究青蟹NAGase经丙酮微扰后的分子构象变化情况,结果表明:丙酮对酶分子构象有显著的影响,酶的内源荧光强度随丙酮浓度增大而降低,说明酶分子中的生色基团Trp和Tyr残基的微环境发生了变化.     

不同季节锯缘青蟹内表皮N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力与性质的比较

研究同一生长期不同季节的锯缘青蟹内表皮N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC 3.2.1.52)的活力与部分性质.结果表明:锯缘青蟹内表皮NAGase活力变化的趋势表现出一定的季节性规律,在一年当中,酶活力较高的月份为10～12月,3月份的活力较低.然后活力逐渐升高,直至11月,活力达到最高,此后又逐渐减弱.研究该酶的基本酶学性质,在不同的季节表现都比较稳定,最适pH在5.6～5.8之间,pH稳定性维持在5.0～10.0,最适温度为45℃,温度稳定性的研究表明,在大于45℃的条件下酶活力逐渐丧失.     

菜青虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的抑制剂筛选

以菜青虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)为研究对象,比较了不同菜青虫部位来源及不同生长期的菜青虫NAGase活性.结果表明,5龄虫和预蛹表皮来源的NAGase比活最高.选取肉桂酸等天然化合物及其衍生物以及一些具有抗虫或杀虫活性的植物的粗提物,以其对菜青虫NAGase的抑制作用为指标来粗筛NAGase抑制剂,结果表明茴香酸、异丙基苯甲酸、间-羟基苯甲酸、2,4-二甲氧基苯甲酸以及肉桂酸对该酶具有一定的抑制效果,6 mmol/L浓度可以分别使酶活力被抑制35.3%、25.9%、26.7%、29.1%和20.0%;银杏外种皮粗提物有较强的抑制效果,0.4 mg/mL的银杏酸可以让酶活力几乎完全丧失.上述结果提示有望从粗筛得到的几种植物中进一步分离纯化出高效的NAGase抑制剂,为开发新型生物农药提供理论依据.     

金属离子对棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

研究了金属离子对棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（EC3．2,1．52）活力的影响．结果表明：Na^＋、K^＋和Li^＋等金属离子对酶活力没有任何影响；在指定范围内，Mg^2＋和Ca^2＋对酶活力影响不显著；Zn^2＋、Cu^2＋和Al^3＋对该酶有不同程度的抑制作用．进一步研究Cu^2＋和Al^3＋的抑制作用动力学，结果表明：Cu^2＋对该酶的抑制作用是一种可逆过程，抑制机理表现为混合型，抑制常数Kt为0．23mmol／L，K1s为1．49mmol／L．Al^3＋对该酶的抑制作用是一种可逆过程，抑制机理表现为竞争性类型，抑制常数Kt为6．42mmol／L．     

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在儿科疾病中的临床应用

尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）是在临床应用最广泛的诊断肾脏病变的酶之一,NAG主要来自近曲小管的溶酶体,尿中含量相对稳定,其排泄异常提示肾脏损害,因此是肾小管损伤的敏感标志物,在很多儿科疾病中可以判断是否有肾脏损害和（或）严重程度。     

有机溶剂对南美白对虾N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

研究了几种有机溶剂对南美白对虾（Penaeus vannamei）N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）活力的影响．结果表明：甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇、乙二醇和丙三醇对NAGase的作用均表现为低浓度时对酶有激活作用，随着浓度的升高，激活作用减弱并速转为抑制作用；二甲亚砜和二氧六环对酶的抑制作用呈现明显的浓度效应，随浓度增大酶活力迅速下降．进一步研究二甲亚砜的抑制作用动力学，结果表明：二甲亚砜对酶的抑制作用是一种可逆过程，抑制机理表现为混合型抑制类型，抑制常数K1=0．27mol／L，KB=2．05mol／L．     

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

研究几种抗菌药物对凡纳滨对虾壳膜N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC 3.2.1.52)活力的影响.结果表明,诺氟沙星和磺胺甲噁唑对该酶活力有不同程度的抑制作用,盐酸环丙沙星对此酶有激活作用,而青霉素钾、链霉素、庆大霉素、卡那霉素、磺胺嘧啶等对酶活力基本上没有影响;磺胺甲噁唑的抑制作用最为显著,导致酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)为0.094 mg/mL.抑制作用动力学研究结果表明,磺胺甲噁唑对酶的抑制作用为混合型可逆抑制,其抑制常数KI为5.98 mg/mL,对酶-底物络合物的抑制常数KIS为13.08 mg/mL.该研究对凡纳滨对虾的人工养殖具有一定的参考价值.     

肾损伤标志物N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测方法的研究进展

药物引起的肾损伤是一个备受关注的公共健康问题,目前对于早期肾损伤的临床诊断缺少有效的技术手段,导致疾病不能得到及时治疗,最终危及患者的生命安全。N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG）是一种新型的肾脏损伤的生物标志物,在早期肾损伤时尿液中的NAG活度即可发生显著变化,因此,开发NAG的精确、批量、低成本检测技术,对于肾脏疾病的早期诊断和治疗具有重大意义。为此,中外学者在近几十年内做了大量的研究工作。本文综述了NAG检测方法的研究进展,分析了各种方法的优势和不足,最后讨论了NAG检测技术的发展方向。     

产物类似物对南美白对虾N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

以南美白对虾为材料,分离提纯N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶,研究产物NAG及产物类似物glu、gal、fru等对该酶催化水解pNp-β-D-GlcNAc活力的影响.抑制强度次序为NAG＞gla＞glu＞suc＞fru.研究抑制作用动力学,结果表明NAG对酶的抑制作用表现为反竞争型,其抑制常数KIS为11.4 mmol/L/;gal、glu、fru对酶的作用表现为竞争型抑制,抑制常数KI分别为0.709、0.747和2.94 mol/L;suc对酶的抑制作用表现为非竞争型,抑制常数KI=KIS=2.58 mol/L.     

锯缘青蟹一种球状病毒的分离和组织病理观察

从患病锯缘青蟹组织中分离出一种无囊膜球状病毒,直径50~60 nm.通过病理切片观察,病蟹肝胰腺、肌肉、心脏、肠和鳃等多处组织器官受到感染,该病毒分布在细胞浆中,呈晶格状排列,不形成包涵体;这种病毒会导致细胞瓦解,细胞核肿大变形,核质聚缩,核膜破损,肌丝断裂,线粒体坏死等症状.     

锯缘青蟹抱卵蟹孵化的初步研究

选择性腺发育好的雌蟹 ,经催产后大部分个体在 2～ 14d内即可抱卵 ,抱卵率通常在 6 5 %左右 .抱卵的青蟹在水温 2 3～ 2 9℃ ,盐度 2 5～ 30下 ,经过 10～ 19d即可孵出幼体 .水温高 ,孵化时间短 ;水温低 ,孵化时间长     

锯缘青蟹不同器官组织中4种类型ATPase活性比较研究

本实验采用生化方法研究了锯缘青蟹的鳃、肝胰腺和肌肉等不同器官组织中4种类型ATPase活性.结果表明,不同器官组织中同类型ATPase活性各异,Na K ATPase活性由强至弱为鳃>肝胰腺>肌肉.Ca2 ATPase活性为肌肉>肝胰腺>鳃.Mg2 ATPase活性为鳃>肌肉>肝胰腺.Ca2 Mg2 ATPase活性则为肌肉>鳃>肝胰腺.同一器官组织中不同类型ATPase活性也有较大的差异,鳃中Na K ATPase活性最大,其余的依次为Mg2 AT Pase,Ca2 Mg2 ATPase,Ca2 ATPase;肝胰腺中Na K ATPase活性最强,其余的依次为Ca2 Mg2 ATPase,Mg2 ATPase,Ca2 ATPase;肌肉中Ca2 Mg2 ATPase活性最大,其余的依次为Ca2 ATPase,Na K ATPase,Mg2 ATPase.此外,锯缘青蟹同一器官组织中同类型ATPase在不同个体间也存在一定差异.不同器官组织中4种类型ATPase活性各异主要与其所执行的生理功能密切相关.     

Unfolding and Inactivation of Green Crab ( Scylla Serrata) Alkaline Phosphatase during Thermal Denaturation *

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＴｈａｔｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｃｃｕｒｓｂｅｆｏｒｅｎｏｔｉｃｅａｂｌｅｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌｃｈａｎｇｅｓｃａｎｂｅｄｅｔｅｃｔｅｄｄｕｒｉｎｇｄｅｎａｔｕｒａｔｉｏｎｏｆｃｒｅａｔｉｎｅｋｉｎａｓｅａｎｄｏｔｈｅ...     

锯缘青蟹营养成分分析

分析锯缘青蟹可食组分－－肌肉,生殖腺和肝脏的含量及其营养成分,其结果是雄蟹可食部分约占体重64％左右,而各组分占可食部分比率,肝脏为10．75％,雌雄生殖腺分别为16．52％和1．83％,肌肉为59．30％（雌蟹）和70．84％（雄蟹）,雌性生殖腺含水分最低（54．69％）,含蛋白质最高（30．59％）,氨基酸评分最高（93．58）,脂肪含量肝脏和雌性生殖腺较高（15．68％和14．50％）,肌肉最低（0．82％）,但肌肉中不饱和脂肪酸（UFA）,多不饱和脂肪酸（PUFA）,EPA,DHA的含量最高,分别为74．58％,47．83％,18．04％,13．52％,肝脏灰分和Ca 含量最高,每100g分别含2．72g和580mg.4组分均为高K低Na,每100g各组分中的Se含量均大于等于110ug,每100克雌生殖腺中胆固醇含量为766．16mg。     

锯缘青蟹肌肉组织坏死的病理研究

针对福建省龙海县土池人工养殖的锯缘青蟹发生肌肉浊白现象，开展肌肉组织病理学研究，发现病蟹的肌纤维断裂、肌细胞坏死溶解、细胞核萎缩和空泡变性、在肌肉组织中存在大量的20面体、大小约为150nm的球形病毒粒子，初步推断该病毒为锯缘青蟹肌肉坏死症的病原体。     

锯缘青蟹幼体消化酶活力

对锯缘青蟹幼体（Ｚ＿１→Ｃ＿１）各发育期的几种消化酶（蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶）活力的测定结果表明，在幼体发育过程中，这四种消化酶比活力表现出三种变化模式。初步认为，青蟹幼体消化酶活力高低与幼体发育期有关，同时受饵料条件和各发育阶段能量需求的调节；状幼体Ｖ期（Ｚ＿５），大眼幼体（Ｍ）高死亡率可能与这两期幼体蛋白酶活力降低有关。     

锯缘青蟹胸神经团的组织学研究

锯缘青蟹胸神经团食道下神经节、胸神经节和腹神经节高度愈合而成，胸神经团具有3种类型的神经分泌细胞（NSC），食道下神经节腹面NSC的数量多于背面，胸神经节背面的NSC靠近步足神经分布；腹面的NSC较多，靠近胸动脉孔发布，腹神经节的NSC聚集成群，主要位于腹面，不同类型的NSC通常参杂分布。     

锯缘青蟹Y器结构与卵巢发育的研究

锯缘青蟹的Y器位于前鳃腔、眼柄的后外侧，其显著特点是细胞紧密排列，细胞核几乎占据了整个腺细胞，异染色质极其丰富，细胞突起多，细胞器少。线粒体具管状嵴，细胞内常见不同大小的空泡，卵巢成熟之前，Y器具有巨大脂肪球；腺细胞胞质少，空泡数量较多，以小泡为主，线粒体基质电子密度高。卵巢将成熟时，腺细胞胞质体积有所增大，多泡小体、髓样小体和大空泡增多，线粒体基质电子密度低，内嵴膨大或消失，表明腺细胞分泌作用逐渐减弱。锯缘青蟹Y器超微结构的变化，为其蜕皮类固醇参与卵巢发育的生理作用提供了形态学依据。