百日咳毒素与霍乱毒素对乙酰胆碱诱导气孔运动的影响

在动物细胞中神经递质乙酰胆碱与其受体结合后,通过G蛋白的偶联传递信号.在植物中,乙酰胆碱也普遍存在并参与调节许多生理过程.乙酰胆碱及其受体参与了气孔运动的调节,G蛋白的激活剂霍乱毒素与抑制剂百日咳毒素影响乙酰胆碱诱导的气孔开放,而且仅在含Ca 2+ 的介质中才能起作用;同时用Ca 2+ 荧光探针Fluo-3检测保卫细胞胞质Ca 2+ 动态变化,表明乙酰胆碱的胞内信号转导中有Ca 2+ 的参与.由此推测在毒蕈碱型乙酰胆碱受体介导乙酰胆碱诱导的气孔运动中,可能存在与G蛋白偶联的信号转导.     

百日咳毒素与霍乱毒素对乙酰酰胆碱诱导气孔运动的影响

在动物细胞中神经递质乙酰胆碱与其受体结合后，通过G蛋白的偶联传递信号。在植物中，乙酰胆碱也普遍存在并参与调节许多生理过程。乙酰胆碱及其受体参与了气孔运动的调节，G蛋白的激活剂霍乱毒素与抑制剂百日咳毒素影响乙酰胆碱诱导的气孔开放，而且仅在含Ca^2 的介质中才能起作用；同时用Ca^2 荧光探针Fluo-3检测保卫细胞胞质Ca^2 动态变化，表明乙酰胆碱的胞内信号转导中有Ca^2 的参与。由此推测在毒蕈碱型乙酰胆碱受体介导乙酰胆碱诱导的气孔运动中，可能存在与G蛋白偶联的信号转导。     

植物激活蛋白的分离、纯化及等电点的的测定

文章主要介绍首次从真菌中提取的植物激活蛋白是一种高效、多功能、广谱性、能诱导植物对病虫害产生免疫抗性的新型植物诱导物质，通过分离纯化该蛋白，可以为下一步的活性检测，序列测定及基因克隆打下良好的基础。     

营养酸模蛋白质等电点测定

利用酸碱沉淀法对营养酸模蛋白质的等电点进行了连续细化测定 ,其测定结果为 :营养酸模叶蛋白等电点为 pH =3 2 ,在此等电点下 ,其最大沉淀率和提取率分别为 74 8%和 2 55% ,为进一步研制和提高营养酸模叶蛋白的工艺和质量提供了重要的参数     

两性氢氧化物的溶解度及等电点

本文讨论了两性氢氧化的溶解度PH的关系及等电点的计算方法。     

百日咳毒素对抗性及敏感棉铃虫神经细胞L型钙通道的调制作用

通过催化抑制性G蛋白α亚基(Gαi／o)的ADP核糖基化,百日咳毒素(PTX)使Gαi／o不能活化,继而抑制Gαi／o-腺苷酸环化酶(AC)-cAMP-蛋白激酶A(PKA)-L型电压门控钙(Ca(L)2 )通道．Ca(L)2 通道可能是拟除虫菊酯类杀虫剂的靶标．本实验观察了PTX对三氟氯氰菊酯(Cy)抗性及敏感棉铃虫神经细胞Ca(L)2 通道的影响, 以期从Ca(L)2 通道动力学的角度探讨棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的机制．急性分离并经12-16 h无菌培养3-4龄棉铃虫神经细胞．实验分4组:①Cy敏感组(Cy-S组);②Cy抗性组(Cy-R组);③Cy-S-PTX组; ④Cy-R-PTX组．400 ng／mL PTX加入培养基中．采用全细胞膜片钳技术记录各组,ICa(L)．结果显示:(1)各组 Ca(L)2 通道的激活电压均是-35--30 mV,最大激活电压是0 mV,但Cy-S-PTX组的最大激活电压是 -10 mV;(2)分别与Cy-S组和Cy-R-PTX组峰值电流密度相比,Cy-S-PTX组峰值电流密度分别增高52．06 ％和44．81％(P<0．01),提示Cy-S-PTX组Ca(L)2 通道电导可能增大．Cy-S组和Cy-R组间的峰值电流密度无统计学差异;(3)与Cy-S组相比,Cy-S-PTX组神经细胞Ca(L)2 通道的半数激活电压向超极化方向移动5．1 mV (P<0．05),半数失活电压向超极化方向移动5．93 mV(P<0．05),提示PTX使敏感组神经细胞的Ca(L)2 通道更容易激活和失活;(4)与Cy-R组相比,Cy-R-PTX神经细胞Ca(L)2 通道的半数激活电压几乎未变,半数失活电压向去极化方向移动2．42 mV(P>0．05),提示PTX对抗性组神经细胞的影响不明显;(5)Cy-R组与Cy-S组神经细胞Ca(L)2 通道的半数激活电压和半数失活电压无显著性差异．结果提示:(1)棉铃虫神经细胞存在(Gαi／o)-AC- cAMP-PKA-Ca(L)2 通道信号传导途径;(2)PTX敏感的抑制性Gi／o蛋白的基础活性对棉铃虫神经细胞Ca(L)2 通道有影响;(3)PTX对敏感虫神经细胞的Ca(L)2 通道的影响较对抗性棉铃虫神经细胞Ca(L)2 通道的影响明显,提示抗性棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的机理可能与其Ca(L)2 通道对Gαi／o-AC-cAMP-PKA-Ca(L)2 通道调控不敏感有关．     

肽的等电点计算方法

肽是两性电解质,肽的等电点和氨基酸一样可根据它各自解离基团的ＰＫ值求得。即肽的等电点为它的两性离子两侧的ＰＫ的平均值。     

同源蛋白质等电点的预测

应用一个依据蛋白质氨基酸组成可预测其等电点(pI)的数学模型,辅以自行设计的计算程序,计算了弹性蛋白酶(Elastase)、牛胰乳蛋白酶原(Bovine chymotrypsinogen)和α-胰凝乳蛋白酶(α-Chymotrypsin)的pI,计算值同实测值基本吻合。应用该模型还给出了4种精氨酸酶(Arginase)同功酶的pI理论预测值。     

某些激素的等电点预测

本文报道了赖氨酸加压素等８种激素和１１种不同来源的后叶激素运载蛋白的等电点的理论计算结果。表明有关赖氨酸加压素等５种激素等电点的理论计算值与其相应的实验测定值间误差不显著（Ｐ＞０．０５）。其余计算结果均可视为预测值。     

DAB389-Linker-LHRH重组毒素的构建及生物活性的初步测定

采用基因工程方法,将白喉毒素的毒性部分(DAB389)通过柔性连接肽(Linker)与促黄体激素释放素(LHRH)基因连接起来,克隆到高效表达载体pET28a( )中,并在大肠杆菌中表达该融合蛋白(DAB389-Linker-LHRH).通过三步层析纯化目的蛋白,获得了纯度达95%的重组毒素DAB389-Linker-LHRH.用MTT法检测其对过度表达LHRH受体的人宫颈癌HeLa细胞的毒性作用,探讨其对HeLa细胞的特异杀伤情况.实验结果显示DAB389-Linker-LHRH对HeLa细胞具有很强的生长抑制作用,其IC50为12.93μg/mL.表明该免疫重组毒素在体外对人宫颈癌HeLa细胞具有明显的杀伤作用,为进一步研制对宫颈癌有特异治疗作用的靶向抗癌药物奠定了基础.     

细胞膜淀粉酶的纯化和分析(英文)

一种Ruminobacteramylophilus70细胞膜联的新支连淀粉酶被4%TritonX 100提取.其新支连淀粉酶活性存在于70%的硫酸铵沉淀组分中.通过等电聚焦纯化,根据SDS凝胶电泳测定,其新支连淀粉酶的分子量是91 2kDa,其等电点是5 8～5 9.根据另一种淀粉酶活性凝胶电泳的方法测定,其新支连淀粉酶的分子量大约是92 6kDa.在R.amylophilus70细胞中存在着两种类型的淀粉酶(可溶性淀粉酶和膜联淀粉酶,比如新支连淀粉酶)共同承担分解淀粉的作用.     

用Blue一Sepharose·CL·6B亲和层析法分离纯化甲鱼和北京鸭LDH＿1、LDH＿5A亚基

用ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ·ＣＬ．６Ｂ亲和层析方法分离纯化的甲鱼ＬＤＨ＿５、甲鱼ＬＤＨ＿１和北京鸭ＬＤＨ＿５，进行比较研究。从分子量、等电点、氨基酸组成、平均摩尔差异百分比及在ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ·ＣＬ·６Ｂ层析柱上洗脱特性几方面进行比较，结果表明，两个不同纲的动物（甲鱼和北京鸭）的ＬＤＨ＿５的Ａ亚基之间的差异大于同一种动物的ＬＤＨ＿５的Ａ亚基和Ｂ亚基之间的差异，并说明不同纲的动物ＬＤＨ＿５之间具有同源性。     

Ruminobacter amylophilus 70细胞膜淀粉酶的纯化和分析

一种Ruminobacter amylophilus 70细胞膜联的新支连淀粉酶被4％ Triton X-100提取．其新支连淀粉酶活性存在于70％的硫酸铵沉淀组分中．通过等电聚焦纯化，根据SDS凝胶电泳测定，其新支连淀粉酶的分子量是91．2kDa，其等电点是5．8-5.9.根据另一种淀粉酶活性凝胶电泳的方法测定，其新支连淀粉酶的分子量大约是92．6kDa．在R.amylophilus 70细胞中存在着两种类型的淀粉酶(可溶性淀粉酶和膜联淀粉酶，比如新支连淀粉酶)共同承担分解淀粉的作用．     

猪凝血酶的分离纯化与鉴定

本文报导以猪血为材料，制备凝血酶，血浆在低离子强度下经等电沉淀得优球蛋白，从该沉淀中采用稀盐溶液提取，氢氧化镁吸附和二氧化碳解吸等步骤获得凝血酶原粗品。后者经脑提取液激活，再经乙醇分级、ＤＥＡＥ－纤维素与磷酸纤维素离子交换层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤，得凝血酶制品，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，制品呈单一条带，分子量约为３９ｋＤ，比活达１６１０ＮＩＨＵ／ｍｇ蛋白，以活化的粗品活性为１００％，活性回收率为４８％，纯化倍数约为１０。     

花生蛋白质的主要种类和等电点的研究

花生蛋白等电聚焦显１１条区带，其中６条很明显，说明花生至少有１１类不同等电点的蛋白质。等电点分别为４，３、４．５、５．１、５．４、６．５、６．７的蛋白质是主要的，他们的聚丙烯酰胺凝胶电泳和花生蛋白乳状液的醋酸纤维薄膜电泳的结果都有３条区带，其中两条比较明显，说明花生蛋白有两种主要组分和一种次要组分；这三种组分可有多种等电点，一种等电点可同时有这三种组分。     

过渡金属硒酸盐氨基酸配合物的合成

合成了过渡金属Cu,Mn,Ni硒酸盐的甘氨酸,赖氨酸,谷氨酸的配合物,用元素分析,摩尔电导,化学分析,红外光谱和差热－热重分析对其结构和组成进行了研究,分析了硒酸盐溶液PH值,氨基酸等电点对配合物组成的影响。     

低温等电点沉淀法提取头发中的L-精氨酸

用低温等电点沉淀法对头发中L-精氨酸的提取工艺条件进行了研究,考查了头发水解条件、沉淀剂的种类及用量、pH值、氯离子浓度、提取温度等因素对L-精氨酸产量的影响.实验结果表明：在pH值10、温度0 ℃,氯离子浓度为2.1 mol/L、2 mL苯甲醛作沉淀剂时,30 mL头发水解液中L-精氨酸的产量为0.139 g.     

水稻金属硫蛋白ricMT的一级结构特征分析

为了获得水稻金属硫蛋白 ric MT的一级结构特征 ,通过等电点和蛋白稳定性预测 ,初步判断 ric MT蛋白是一个不稳定的酸性蛋白 ;并用 ric MT氨基酸序列对 EMBL 蛋白数据库进行检索 ,得到 5 0余个同源性较高的来自动植物的 MT蛋白 ,用二重序列对排分析和氨基酸组成模式分析与已知的蛋白进行比较 ,将 ric MT归属于植物类金属硫蛋白类型。采用多重序列比较法总结出植物类金属硫蛋白的一级结构的三点特征 :相对分子量比动物 MT大 ,平均为 71个氨基酸残基 ;与哺乳动物 MT不同的独特氨基酸组成模式 ;一级结构典型的三段式分布 ,间隔区多数达 3 0～ 40个氨基酸残基     

极谱催化氢波测定白喉类毒素

在0.04mol/LNH3-NH4Cl(pH8.31)支持电解质中,白喉类毒素(DT)产生一个极谱催化氢波,峰电位为-1.89(νs.SCE).该波二阶导数峰电流与DT浓度在1.2～2.0μg/mL内有线性关系,可用于生物样本中DT含量的测定.